广西家蚕僵病流行趋势及其主要病原遗传规律研究

【目的】摸清广西家蚕僵病发生流行规律,研究病原特性及遗传规律,为精准防控家蚕僵病提供科学依据。【方法】以2008—2021年广西家蚕僵病发病原始数据为基础,分析广西家蚕僵病的发病规律。收集广西五大蚕区（桂中、桂南、桂西、桂西北和桂东南）的病蚕、病虫及生物防控白僵菌株,经显微形态鉴定和产孢测定后采用滤纸接触法测试其对家蚕的致病力;基于ITS4/ITS5引物进行PCR扩增,并将双向测序结果输入GenBank进行BLAST比对分析;根据ISSR-PCR扩增结果以Quantity One绘制电泳模式图,使用NTsys计算遗传相似系数并进行UPGMA聚类分析,同时以PopGene32对供试材料的遗传多样性指数进行分析。【结果】 2008—2021年广西家蚕僵病发病率整体上呈波动下降趋势,连续14年的平均发病率为5.19%。5月是广西家蚕僵病的发病率高峰,平均发病率为13.37%;其次是4月和10月,对应的发病率分别为7.91%和6.87%。山区地形的家蚕僵病发生率普遍高于平缓丘陵地区,其中,丘陵蚕区的家蚕僵病发病率排序为桂中（13.55%） >桂西北（12.66%） >桂南（11.56%） >桂西（11.05%） >桂东南（9.53%）,山地蚕区的家蚕僵病发病率排序为桂中（18.91%） >桂西北（17.96%） >桂西（16.01%） >桂西（14.90%） >桂东南（11.61%）。广西家蚕僵病病原包括白僵菌属、曲霉属、拟青霉属和虫草菌属,其中球孢白僵菌（Beauveria bassiana）为主要病原,占比达86.67%,且白僵菌ITS序列高度保守,序列相似性在97.83%~99.83%。不同白僵菌株对家蚕的致病力表现为崇左白僵菌株（农药）的72 h累计死亡率达100.00%,明显高于蚕区僵蚕菌株（8.89%~93.33%）。筛选出的10条ISSR引物从50株菌株样本中扩增出152条清晰条带,其中多态位点147个,多态百分数为87.5%~100.0%; 50株菌株样本的Nei's基因多样性指数（H）为0.1740~0.3257,Shannon信息多样性指数（I）为0.2840~0.4880,均表现出极高的遗传多样性;基于遗传距离构建的UPGMA系统发育进化树显示,桂南、桂西北、桂东南、桂中等蚕区的病蚕白僵菌株与农药源白僵菌株存在非常近的亲缘关系。【结论】广西家蚕僵病危害高峰期为5月,球孢白僵菌是最主要的病原菌,且ITS序列高度保守。不同来源白僵菌对家蚕致病力的排序为农药源白僵菌株>松林白僵菌株>蚕区僵蚕菌株,但三者相互间存在非常高的基因关联性,提示广西家蚕僵病的病原遗传背景复杂,且蚕桑主产区应慎用白僵菌农药。     

环境因子对桑椹菌核病菌核萌发及子囊盘生长的影响

以在桑园收集的越冬桑椹菌核为材料，调查其在湿度充足的自然气候条件下萌发形成子囊盘的发育历期。探索了不同温度、湿度和光照条件对菌核萌发和子囊盘生长发育的影响。结果表明，桑椹菌核病菌核在湿度充足的自然气候条件下从萌芽到子囊盘消亡历时38～52 d，平均历时45.0 d；其中萌芽抽生期16～23 d，平均18.7 d；杯盘膨大期6～12 d，平均8.4 d；平盘期8～20 d，平均14.1 d；消亡期1～6 d，平均3.3 d。菌核在10～20℃范围均可萌发形成子囊盘，最佳温度是15℃。土壤湿度对于菌核萌发有显著影响。土壤湿度25%时，菌核不能萌发；土壤湿度50%时，菌核萌发率为23.5%；土壤湿度75%时，菌核萌发率达78.0%；土壤湿度90%时，菌核萌发率达到100%。光照能刺激菌核萌发形成子囊盘，并能促进子囊盘的生长发育。菌核在全光照不遮光和黑膜遮光透光率5%的情况下均能萌发，全光照不遮光培养，单粒菌核萌发子囊柄的平均数量为4.1个，并且子囊柄顶端均能形成子囊盘；黑膜遮光透光率5%培养，单粒菌核萌发子囊柄的平均数量为1.2个，只有51.3%的子囊柄顶端能形成子囊盘。研究结果为桑椹菌核病...