番茄溃疡病菌PCR快速检测技术

番茄溃疡病是一种严重危害番茄生产的细菌性病害，许多国家将其列为检疫性病害。利用ITS通用引物扩增了番茄溃疡病菌（Clavibacter michiganensis subsp．michiganensis）的ITS序列，并进行克隆测序。根据序列比较结果设计了引物BT1和BT2，该引物特异性好，能专一扩增出268bp电泳条带，而马铃薯环腐病菌等不同亚种、不同属的细菌及健康的番茄材料均无扩增条带。从接种但未显症番茄苗叶片及人工模拟染菌种子上提取总DNA，以此为模板均能稳定地扩增出特异性目的条带。该方法直接对种子或植株进行检测，不需进行病原菌分离培养，快速简便，适用于出入境检验检疫及种苗健康检测领域。     

聚天冬氨酸强化植物修复重金属污染土壤的研究

为了探究PASP作为螯合剂在植物修复过程中的强化作用,采用土柱淋滤实验,研究不同浓度的聚天冬氨酸(PASP)对重金属铅(Pb)、镉(Cd)的活化能力（加入淋出量和空白对比）。结果表明,在一定浓度范围内,PASP对Pb和Cd的活化能力随PASP浓度的增加而增加。在盆栽模拟实验中发现,PASP对玉米修复重金属污染土壤有明显的强化作用。施用11 g/L PASP的玉米株高为114.4 cm,大于施加EDTA的植株(110.9 cm)。确定了PASP的最佳施用浓度为3 g/L和7 g/L,吸收重金属量分别为Pb 114.829 μg和84.662 μg、Cd 54.447 μg和66.915 μg,与EDTA相比对Cd的吸收量提高约10倍,对Pb的吸收量提高约3倍。进一步用水合肼和乙醇胺对PASP进行衍生化,淋洗实验证明用乙醇胺改性的PASP对重金属的活化效果得以提高,为修复被重金属污染的土壤提供了一种较好的络合剂。     

蛋白酶对假丝酵母Candida sp.99-125脂肪酶生物合成过程的影响

在利用豆粕为氮源生产脂肪酶的过程中,假丝酵母同化豆粕会产生蛋白酶,而蛋白酶在水解豆粕的同时,亦会水解诸如脂肪酶等其他蛋白类物质。发酵第4d时,蛋白酶活力达到最高值6.5U/ml,同时脂肪酶活力增长缓慢。在5U/ml的纯蛋白酶粉体系中,分别加入5000U/ml、10000U/ml的脂肪酶粉,反应4h后脂肪酶活力分别为2500U/ml、3900U/ml;在2个含有较高活力的蛋白酶的已除菌的发酵液体系中,40℃下自水解4h,脂肪酶活力损失分别为20.7%和21.2%。发酵前添加外源蛋白酶水解豆粕,可抑制假丝酵母产生蛋白酶,解除其对脂肪酶的影响,发酵周期可缩短4d。     

菌丝体废液对油菜生长的影响

生物工程和生物制药业的不断发展,每天产生大量废菌丝体,如生产青霉素、柠檬酸等的青霉菌和黑曲霉等菌丝体。这些菌丝体几丁质可作为生产壳聚糖等的原料,而原生质部分产生的废液直接排放,会污染环境。本试验将原生质废液作为肥料,研究其对油菜产量和品质的影响,以达到废菌丝体综合利用、保护生态环境。     

壳低聚糖聚合度分析及室内抑菌活性研究

室内用壳聚糖氧化降解法得到了壳低聚糖 ,并采用HPLC方法分析了壳低聚糖的聚合度。结果显示 ,其聚合度分别在 1～12范围内 ,其中单糖占 5.79% ,2～5糖占 38.64% ,6～8糖占 15.29%。采用离体平皿法将获得的壳低聚糖对 17种常见植物病原菌进行抑菌活性测定 ,结果表明 ,壳低聚糖对其中 16种病原菌都有抑制作用 ,且随着浓度提高作用增强。壳低聚糖对土传病害真菌表现出较好的抑制作用 ,其中壳低聚糖对芦笋茎枯病、棉花枯萎病、棉花黄萎病 3种土传病害病原菌的EC₅₀分别为626.78、393.16、854.19μg/mL。     

赤豆(Phaseolus angularis Wight)种子带菌检验

以河北省广泛栽培的6个赤豆品种为材料,进行种子带菌分析.利用洗涤检验法和琼脂平板法获得种子表面带菌21个属,其中数量较大的是:青霉属(Penicillium)、曲霉属(Aspergillus)、链格孢属(Alternaria)、镰刀菌属(Fusariun)、茎点霉属(Phoma)和枝孢属(Cladosporium).利用吸水纸法分离出种内寄藏真菌22个种隶属于18个属,还有一个未定名种.其中细交链孢(Alternaria alternata),蜡叶枝霉(Cladosporium herbarum),串珠镰刀菌(Fusarium moniliforme),半裸大孢变种(Fusarium semitectum var.majus)和微紫青霉(Penicillium janthinellum)的分离频率最高.同时还确定了各种菌在种子内部的定殖部位.     

四种中药提取物对蔬菜病原真菌的抑制作用

采用生长速率法测定了黄连、雷公藤、青蒿和川楝子乙醇提取物对番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)、番茄早疫病菌(Alternaria solani)和辣椒炭疽病菌(Vermicularia capsici)的抑茵活性.结果表明,在质量浓度为1g/mL时,4种中药乙醇提取物对3种真菌生长均具有一定程度的抑制作用,其中黄连提取物对番茄灰霉病菌的抑茵率为65%～68%;青蒿和川楝子提取物对辣椒炭疽病菌的抑茵率分别为63%～85%和59%～77%;黄连、川楝子和雷公藤提取物对番茄早疫病菌的抑制率分别为70%～80%、48%～57%和59%～77%.此外还测定了黄连、川楝子提取物对几种真菌的毒力.该研究为跟踪抗茵活性物质奠定了基础.     

开展“三农”工作应明确党的建设重要性探究 ——基于社会主要矛盾转化视角

十九大报告会上明确提出中国特色社会主义进入新时代的重大政治论断。这一论断 的提出有助于全国人民不断向均衡化、充分化发展迈进,原因在于党和国家的工作重心发生了 转变,与此同时,在决胜全面建成小康社会的重要历史时期,乡村全面振兴就是党的工作的重中 之重,在这个乡村全面振兴的过程中,明确党的建设重要性就至关重要,本文基于社会主要矛盾 转化视角对党的建设重要性进行探究,力求更好的开展“三农”工作,推进“三农”事业的建设。     

南瓜果实中黄瓜绿斑驳花叶病毒的RT-PCR检测及cp基因序列分析

以来自甘肃的南瓜果实样品中提取的总RNA为模板进行RT-PCR扩增，序列测定和分析结果表明：扩增片段包含CGMMV的外壳蛋白基因和3’非编码区，证明南瓜果实中存在黄瓜绿斑驳花叶病毒，将其印基因序列与来自国内不同地区的其他CGMMV分离物进行序列比对，发现国内各分离物间的同源率高，有很近的亲缘关系。     

杂交诱捕实时荧光PCR检测番茄环斑病毒

 番茄环斑病毒(Tomato ringspot nepovirus,ToRSV)广泛分布于欧美及大洋洲,能侵染葡萄、桃、苹果、樱桃、番茄及烟草等150多种植物,引起多种病害,严重时导致绝产^[1]。