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为了探究PEDV(猪流行性腹泻病毒)流行毒株SHpd/2012侵染细胞的特性,研究采用IFA(间接免疫荧光)及绘制病毒一步生长曲线等方法,对感染PEDVSHpd/2012株后的Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)病变过程进行研究。结果发现,CPE(细胞病变)主要表现为细胞肿胀、变圆、皱缩、聚集成合胞体甚至从培养瓶壁大量脱落。IFA结果显示,接毒后12h病毒开始增殖,在接毒后36h时感染细胞数量最多,其后病毒增殖速度逐步下降,60h时趋于平稳。病毒一步生长曲线结果显示,SHpd/2012株感染细胞后24~60h的毒价一直处于较高水平,60h后开始下降。此外,本研究成功克隆并真核表达了PEDV S蛋白,为研究PEDV与受体蛋白的互作及病毒的致病机制奠定基础。 相似文献
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<正>一、市场分析随着城市实行双休日及节假日的增多,"假日经济"已成为市场消费的醒目亮点,假日经济的浪潮正把无限商机推向乡村。许多有商业头脑的人,已成为"假日经济"的积级参与者。开办"假日农业生产基地"就是开发假日农业的典范。 相似文献
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对感染猪流行性腹泻病毒(PEDV)的Vero细胞进行透射电镜观察发现:在病毒感染初期(6h),尽管细胞结构完整,部分细胞线粒体、粗面内质网扩张,胞浆出现空泡;随着感染时间的增长(12h),病毒粒子逐渐增多,细胞质内出现较多空泡状结构,病毒粒子先后出现在胞浆及细胞核内部;感染24h后,病毒粒子数目显著增多,空泡化明显,出现细胞核分解,细胞融合更加明显;感染最后阶段(48h),空泡化严重,核质固缩,细胞间大量融合,病毒粒子出芽排出。以上结果,为揭示猪流行性腹泻病毒的感染与致病机制积累了数据。 相似文献
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为探究猪流行性腹泻病毒(PEDV)的新毒株SHpd/2012在感染细胞时与细胞的相互作用机制,根据已得到的序列设计引物,克隆了S1和S2基因片段,构建了pCAGGS-S1和pCAGGS-S2真核表达质粒。间接免疫荧光和Western-blot实验表明,转染后S1和S2都能在Vero细胞内表达,且转染48h后的表达量较高;其中S1蛋白分子量约为90kDa,S2蛋白分子量约为60kDa。流行毒株SHpd/2012的S1与S2两肽段的成功表达,为之后进一步研究PEDV与Vero细胞的相互作用奠定了基础。 相似文献
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猪流行性腹泻是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种可致仔猪严重腹泻的高度接触性肠道传染病。S蛋白在病毒感染和入侵宿主细胞的过程中具有重要作用。为了研究S蛋白的特点,本研究扩增了PEDV新流行毒株SHpd/2012的纤突蛋白S基因分段片段S11、S12、S13、S21和S22,将得到的目的片段导入原核表达载体pGEX-6P-1中,并转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行表达、鉴定,获得了正确的PEDV S的分段蛋白S11(24-277aa)、S12(272-571aa)、S13(560-797aa)、S21(793-1109aa)及S22(1102-1384aa),为后续单克隆抗体的制备和致病机制的研究奠定了基础。 相似文献
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【目的】探究奶山羊不同泌乳时期乳房类型的变化规律及其对泌乳性能的影响。【方法】以99只健康、产奶期相近的初产泌乳西农萨能奶山羊为试验对象，对其5个泌乳时间点（14，70，126，182和211 d）的乳房类型（乳房外形分为方圆形、长条形和宽扁形，乳房基部分为半球形和柚子形）和日产奶量进行记录，同时采集乳样对乳成分（脂肪率、蛋白率、乳糖率、总固体和非脂率）和体细胞数进行检测，并利用SPSS软件对试数据进行分析。【结果】随着泌乳时间的增加，方圆-半球型（Sh）乳房数量占比呈下降趋势，长条-柚子型(Lg)乳房数量占比呈上升趋势；乳房外形由方圆形(S)和宽扁形(W)趋向长条形(L)转变，乳房基部由半球形(h)趋向柚子形(g)转变； 5种乳房类型整体趋向长条-柚子型(Lg)乳房变化。泌乳70 d时，方圆-半球型（Sh）乳房和长条-半球型(Lh)乳房的奶山羊产奶量显著高于长条-柚子型(Lg)乳房和宽扁-柚子型(Wg)乳房(P＜0.05)； 泌乳14 d时，宽扁-柚子型(Wg)乳房的奶山羊的脂肪含量和总固体量均显著高于方圆-柚子型(Sg)乳房（P＜0.05）；泌乳182 d时，方圆-柚子型（Sg）乳房的奶山羊的乳蛋白率显著低于长条-半球型(Lh)乳房和宽扁-柚子型(Wg)乳房（P＜0.05）。不同乳房类型奶山羊乳体细胞数无显著差异(P＞0.05)。【结论】奶山羊的乳房类型随着泌乳时间的推移而发生变化，泌乳70 d时，方圆-半球型（Sh）乳房和长条-半球型（Lh）乳房奶山羊的产奶量高。 相似文献
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