氯虫苯甲酰胺和氟虫腈对黏虫细胞色素P450基因表达的影响

为筛选出黏虫Mythimna separata参与杀虫剂解毒代谢的主效细胞色素P450基因,采用叶片浸渍法测定了用于处理黏虫3龄幼虫的亚致死浓度,通过构建转录组测序文库并结合数字基因表达(digital gene expression,DGE)对不同处理的黏虫进行测序,并运用实时荧光定量PCR(realtime quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)技术验证12个P450基因的表达情况。结果表明,用于处理黏虫的氯虫苯甲酰胺和氟虫腈亚致死浓度LC_(10)分别为0.15、13.66 mg/L;对照样品、氟虫腈处理样品和氯虫苯甲酰胺处理样品分别获得59 521 504、64 838 148和41 722 990个原始序列数据,分别获得57 441 216、62 368 912和40 285 164个过滤后的序列数据;过滤后的序列长度分别为8.62、9.36和6.04 G;碱基错误率均为0.02%;Phred数值大于20、30的碱基占总碱基的百分比均高于90.59%;鸟嘌呤+胞嘧啶(guanine cytosine,GC)含量分别为47.16%、48.94%和47.55%,表明转录组测序质量较高;黏虫受氯虫苯甲酰胺胁迫后,29个P450基因表达量上调,27个P450基因表达量下调;黏虫受氟虫腈胁迫后,23个P450基因表达量上调,26个P450基因表达量下调;12个P450基因表达量的RT-qPCR技术检测结果与DGE测序文库显示的结果基本一致。     

基于转录组测序技术分析吡虫啉或氟啶虫胺腈对麦二叉蚜细胞色素P450基因表达的影响

为了筛选出麦二叉蚜Schizaphis graminum 参与吡虫啉或氟啶虫胺腈代谢调节的细胞色素P450(P450) 基因,采用浸渍法,用吡虫啉或氟啶虫胺腈处理麦二叉蚜24 h后,通过构建转录组测序文库,并进行RNA-seq测序,筛选出差异性表达的P450基因,并进行实时荧光定量PCR(qPCR) 验证。结果表明:用吡虫啉处理麦二叉蚜后,有19个P450基因上调表达,15个P450基因下调表达;用氟啶虫胺腈处理麦二叉蚜后,有18个P450基因上调表达,15个P450基因下调表达。运用qPCR验证了吡虫啉对12个P450基因的诱导表达,其结果与DGE测序文库显示的结果基本一致。这些结果可为深入研究麦二叉蚜P450对蚍虫啉和氟啶虫胺腈的解毒代谢作用提供依据。     

解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2对玉米挥发物质的影响

为了明确解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2(简称Y2)防病机制,利用顶空抽提法收集Y2菌液和喷施Y2后玉米幼苗挥发物,并通过气相色谱-质谱联用仪对其进行分离和鉴定,共收集到18种Y2菌液挥发物和42种玉米活体植株挥发物。玉米释放醛类化合物8种、萜烯类11种,庚醛、十二烷、癸醛和十三烷为菌液和玉米植株共同抽提到的挥发物。不同处理收集的玉米活体植株挥发物组分种类和相对含量存在差异,Y2处理玉米1、3和5 d后,玉米新出现了1-乙基-2-甲基环戊烷、2-辛烯醛、十一烷、十四碳烯和β-愈创木烯5种化合物,α-衣兰烯等11种化合物相对含量极显著地提高,芳樟醇等8种化合物出现振荡,反-罗勒烯等6种化合物消失;喷施菌液7 d后,Y2对玉米活体植株挥发物种类与相对含量都恢复到常态。     

生物炭处理对花生咪唑乙烟酸药害 的缓解效果研究

为探讨长残效除草剂咪唑乙烟酸对花生生理指标的影响,以及生物炭处理土壤后对花生药害的缓解效果,采用盆栽试验,在土壤中施用咪唑乙烟酸推荐高剂量的2倍后,分别添加0、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0g/kg生物炭,测定花生的株高,叶绿素、丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性的变化。结果表明:咪唑乙烟酸推荐高剂量的2倍对花生有抑制作用,使叶片叶绿素含量降低,MDA含量增加,SOD、CAT活性降低,POD活性升高。土壤中添加4 g/kg生物炭,对花生各项生理指标均有一定的修复效果。     

解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2悬浮剂配方的筛选

通过对润湿分散剂、黏度调节剂、UV保护剂、防腐剂、抗冻剂和消泡剂的筛选,确定5.0×109cfu/mL解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2悬浮剂的最佳配方:Y2菌粉5.00%,农乳34 2.50%,D-425 2.00%,OP-101.50%,黄原胶0.15%,尿素0.15%,对羟基苯甲酸甲酯0.06%,甘油5.00%,正辛醇0.20%,水83.44%。经过湿法研磨后测定,解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2悬浮剂的悬浮率达92.00%以上,且冷热贮藏稳定。     

灰葡萄孢菌两种发酵粗提物的除草活性研究

测定了灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)固体和液体发酵粗提物对小麦、高粱、黄瓜、油菜的幼苗和幼根生长抑制活性。浓度20 mg/mL的固、液粗提物对4种供试植物的幼苗和幼根的抑制率均达到100%;对4种植物的幼苗和幼根同时具有抑制作用的最小有效浓度均为0.62 mg/mL;相同浓度的粗提物(5 mg/mL),液体发酵粗提物对小麦幼苗的抑制作用显著高于固体粗提物,而对高粱幼根和黄瓜幼苗的抑制作用却显著低于固体粗提物(p<0.05),对高粱幼苗、小麦幼根、黄瓜幼根、油菜幼苗和幼根的抑制作用与固体粗提物均无显著差异(p>0.05)。综合评价除草活性效果,灰葡萄孢菌固体和液体发酵粗提物均有很高除草活性,而固体发酵因原料廉价、操作简单具有更为广泛的应用前景。     

解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2对玉米叶际微生物群落的影响

为明确解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2(Y2)对施用环境微生物的影响,采用Biolog-ECO板培养法研究其对玉米叶际微生物群落结构的动态变化。结果表明,喷施Y2菌液1、3和5 d后,玉米叶际微生物对碳源的代谢活性(AWCD值)均显著低于空白对照,9、12 d后代谢活性高于空白对照;药剂对照百菌清处理后的代谢活性均最低(7 d除外)。Y2对Shannon、Simpson和McIntosh指数的影响较小,百菌清处理对其的影响显著(前6次采样)。Y2与空白对照的叶际微生物存在相似的碳源利用种类(前4次采样),百菌清处理的叶际微生物有其独自利用的主要碳源,与其他处理间均存在很大差异。6次采样中,对PC1贡献率大的碳源种类主要为糖类,所占比例为31.25%~50%。玉米叶际微生物对外源物质反应敏感,喷施生防菌Y2和百菌清处理对其群落结构均产生影响;Y2影响远小于百菌清处理。     

Bartter综合征2例

例 1,女 ,5个月 ,因发热、腹泻 2 d入院。无呕吐、抽搐。无多尿多饮及慢性腹泻病史。查体 :体温 38℃ ,血压 10 /7k Pa,体重6 kg。发育营养稍差 ,精神差 ,皮肤弹性稍差 ,前囟及眼窝略陷。心音尚好 ,律齐 ,腹稍胀 ,肠鸣音减弱 ,肌张力正常 ,双膝腱反射减弱 ,血生化 :钠 12 0 mmol/L ,钾 1.2 mmol/L ,氯 6 1mmol/L ,钙 0 .86 mmol/L ,碳酸氢盐 5 6 mmol/L ,尿素氮 1.92 mmol/L。血气分析 :p H 7.5 8,HCO- 35 6 .7mmol/L ,碱剩余 +33.3mmol/L ,标准碳酸氢盐 6 3.9mmol/L。血醛固酮 16 5 pmol/L (正常值8.3～ 44 .2 pm ol/L ,卧位 )。心…     

解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2对玉米叶斑病的防治效果

采用凹玻片法测定解淀粉芽孢杆菌B9601-Y2(Y2)发酵液、上清液和芽孢对4种病害的孢子萌发抑制率,研究Y2对玉米叶斑病的防治效果。结果表明,Y2发酵液、上清液和芽孢对大斑病菌抑制率分别为82.72%、76.71%、4.89%,对小斑病菌抑制率分别为88.04%、82.85%、5.63%,对圆斑病菌抑制率分别为84.90%、79.90%、10.81%,对弯孢霉叶斑病菌抑制率分别为98.79%、95.05%和6.23%。温室盆栽试验表明,Y2的最佳施用浓度为1×10~7CFU/m L,最佳施药时间为接种病菌前8 h,对4种叶斑病的预防效果分别达80.83%、84.62%、84.33%和87.74%。田间试验表明,Y2悬浮剂对4种病害的预防效果分别为65.90%、69.21%、67.97%和70.22%。     

斜纹夜蛾SlGSTO2对拟除虫菊酯类和有机磷类杀虫剂体外代谢及其抗氧化活性

拟除虫菊酯类和有机磷类杀虫剂常用来防治包括斜纹夜蛾在内的多种鳞翅目害虫，目前斜纹夜蛾已对这两类杀虫剂产生了不同程度的抗性，谷胱甘肽S-转移酶 (glutathione S-transferases，GSTs) 广泛参与害虫对杀虫剂抗性的形成。前期通过转录组技术筛选到斜纹夜蛾SlGSTO2基因在拟除虫菊酯高抗种群中显著上调表达，为进一步探究该基因的功能，将其在大肠杆菌中异源表达，并测定重组蛋白对拟除虫菊酯类和有机磷类杀虫剂的代谢活性，同时采用抑菌圈试验测定了其抗氧化活性 。 结果表明:重组蛋白SlGSTO2仅对三氟氯氰菊酯有微弱的体外代谢活性，而对氰戊菊酯、高效氯氰菊酯、辛硫磷和毒死蜱均无代谢活性；抑菌圈试验结果表明，表达pET-26b(+)/SlGSTO2的大肠杆菌可以显著降低不同浓度过氧化氢异丙苯的抑菌圈直径，说明SlGSTO2具有抗氧化活性。研究结果丰富了对斜纹夜蛾GSTs Omega家族基因的功能认知。