苹果属无融合生殖SERKs基因家族的克隆和表达分析

本研究利用同源克隆法以苹果属平邑甜茶和杂种后代叶片为试验材料,克隆得到4个SERK基因家族片段,并分析了SERKs家族基因在平邑甜茶和杂种后代不同器官和组织中的表达情况。研究结果表明:分离获得的4个SERK基因家族片段的氨基酸序列与模式植物拟南芥、烟草等植物的同源性均在84%以上,同时与其他物种的氨基酸序列进行Blast比对都具有较高的同源性;RT-PCR定量分析结果表明SERK1、SERK2、SERK3、SERK4基因主要在生殖器官中表达。因此,推测SERKs基因在平邑甜茶和杂种后代生殖发育过程中起着重要的调控作用。本研究结果为进一步揭示无融合生殖的发生机理奠定了基础。     

辽宁省山楂资源微核心种质的构建方法和评价

以30份辽宁省山楂资源为试材,利用35个农艺性状的鉴定数据(形态指标法)、13条ISSR引物的扩增结果(分子标记法)和二者的总体数据(综合法),采用优化的最小距离逐步取样法分别获得了组成不完全相同的8份核心种质资源。再根据原产地把30份资源划分为数量均衡的2组,每组采用同样方法分别获得了由4份不完全相同资源组成的核心种质。通过农艺性状和分子标记位点覆盖率分析了各组资源和所得核心种质的特征。结果发现,不分组时所构建8份核心种质的农艺性状和分子标记位点占有量的累加值明显高于分组又合并所得8份核心种质的各项数据;在本研究中形态指标法构建的核心种质是有效和可用的。     

平邑甜茶染色体制片技术的风油精法

采用风油精作为预处理药剂,用常规压片技术对平邑甜茶进行染色体标本制备.结果表明,用风油精溶液预处理的染色体,分散度高,染色体浓缩长度适中,染色体不易断裂、粘连.     

平邑甜茶后代双胚苗的倍性鉴定及核型分析

为了确定平邑甜茶双胚苗的倍性特征和核型特点,采用压片和流式细胞仪观测的方法对平邑甜茶后代中双胚苗进行染色体倍性观察和核型分析。结果表明:4株供试材料均为三倍体,2n=3x=51,染色体为小型,染色体长度比差异不大;核型组成由中部着丝点染色体(m)和亚中部着丝点染色体(sm)组成;株系8-1、8-2、12-1和12-2的核型公式分别为2n=3x=45m+6sm,2n=3x=48m+3sm,2n=3x=27m+24sm,2n=3x=33m+18sm;染色体相对长度和着丝点指数的变异范围分别为1.21%～2.68%和34.19%～42.37%,1.44%～2.63%和35.59%～44.08%,1.36%～3.02%和32.85%～42.18%,1.43%～2.87%和34.23%～44.02%;核型分别属于1B、1A、2B和1B类型,表现为株系之间的核型不完全相同。本研究为丰富无融合生殖型砧木的育种理论,获得新的苹果无融合生殖型砧木提供有益的借鉴。     

锌铜处理对苹果属植物叶内碳酸酐酶活性的影响

通过室内外试验,观测了锌、铜处理对苹果属植物叶内碳酸酐酶(CA酶)活性的效应和锌处理对叶内锌、铜、磷、钙、铁含量韵影响。结果表明:在甜茶实生苗和苹果幼苗水培中,锌0.5mg·1~(-1)处理的CA酶活性最高;加入到苹果幼苗酶提取液中的波尔多液(1:2:160)明显抑制CA酶活性,而硫酸铜溶液(160倍)只有微弱的抑制作用,在幼苗叶上喷波尔多液对CA酶活性有一定的抑制作用;在红星苹果大树上喷施锌肥对叶内的CA酶活性无显著影响;梯度锌水培和新梢速长期叶面喷锌的处理都显著或极显着改变和提高了叶内含锌量,但对铁、铜、钙含量影响较小。对叶内锌含量与CA酶活性的关系和波尔多液对CA酶活性的抑制原因进行了讨论。     

苹果实生树阶段转变特异蛋白质的SDS-PAGE分析

 利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术（SDS-PAGE）分析了6株苹果实生树（‘红玉’ב金冠’）叶片中蛋白质随节位升高的动态变化。结果表明,随节位升高蛋白质带发生变化,共发现了3条阶段转变特异蛋白质带,分子量分别为55 kD、19 kD和17 kD。其中55 kD蛋白质表现为定性变化,有5株实生树在36～75节出现,到101～126节消失;19 kD蛋白质在实生树低节位含量高,在86～100节之后含量突然降低;17 kD蛋白质在实生树低节位含量低,随着植株的发育蛋白质在36～50节含量突然增加并保持稳定,到91～105节后含量突然下降。认为这3种蛋白质是苹果实生树阶段转变的特异蛋白质。     

苹果属植物无融合生殖特性——文献综述

介绍了国内外苹果属中无融合生殖种类;综述了国内外学者对这些种无融合生殖特性的研究成果，包括兼性无融合生殖习性、无性胚形成方式、遗传方式、染色体倍性和同工酶表现；简述了无融合生殖在科研及生产的应用现状和潜力。     

锌铜处理对苹果属植物叶内碳酸酐酶活性的影响

通过室内外试验，观测了锌、铜处理对苹果属植物叶内碳酸酐酶活性的效应和锌处理对叶内锌、铜、磷、钙、铁含量的影响。结果表明：在甜茶实生苗和苹果幼苗水培中，锌０．５０ｍｇ．１＾－１处理的ＣＡ酶活性最高，加入到苹果幼苗酶提取液中的波尔多液（１：２：１６０）明显抑制ＣＡ酶活性，而硫酸铜溶液（１６０倍）只有微弱的抑制作用；在幼苗叶上喷波尔多液对ＣＡ酶活性有一定的抑制作用；在红星苹果大树上喷施锌肥对叶内的ＣＡ酶     

平邑甜茶基因组DNA提取方法的比较

为获得高质量的基因组DNA,以平邑甜茶及其与扎矮山定子杂交所得四倍性矮生后代33#、45#新鲜叶片为试材,分别采用常规CTAB法、改良的CTAB法和基因组试剂盒法提取平邑甜茶总DNA,进行琼脂糖凝胶电泳,使用核酸蛋白仪对DNA质量和纯度进行检测。结果表明:利用基因组试剂盒法、常规CTAB法和改良CTAB法均可获得DNA,但获得的DNA质量和纯度存在一定的差异。试剂盒法和CTAB法可以获得较高质量的DNA。但由于基因组试剂盒法成本相对较高,改良CTAB法较耗时,建议采用常规CTAB法提取平邑甜茶及其杂交后代33#、45#品种基因组DNA。