免疫荧光染色质量影响因素分析

免疫荧光技术是标记免疫技术中应用最为广泛的一项技术,具有特异性强、灵敏度高、速度快和便于观察等特点。影响免疫荧光染色质量的因素多种多样,从荧光染料、抗体、样品前处理、染色过程等几个重要的方面入手,就如何提高免疫荧光染色质量,以获得一张高分辨率的图片做了详细的介绍。该研究有利于提高免疫荧光染色质量,为生命科学研究提供了有力帮助。     

姜黄素在畜禽养殖中的应用研究进展

姜黄素（CUR）是从姜科姜黄属草本植物根茎中提取出的一种天然橙黄色多酚类化合物，也是姜黄发挥药理学功能最主要的活性成分。CUR因具有多种生物学功能及较好的应用前景，目前已引起国内外学者的广泛关注。本文综述了CUR的理化性质、生物学功能，尤其是调控肠道健康方面的研究进展及其在畜禽养殖中的应用研究进展，以期为进一步将CUR作为新型饲料添加剂在畜禽生产中的应用提供理论参考，从而推动畜禽养殖的健康发展。     

肌肉生长抑制素(MSTN)对猪前体脂肪细胞增殖和成脂分化的影响

为探讨肌肉生长抑制素(MSTN)对猪前体脂肪细胞增殖和成脂分化的影响,本研究以原代培养的断奶猪前体脂肪细胞为研究对象,分别以0 ng/mL(对照组)、25、50和100 ng/mL的MSTN重组蛋白处理细胞,采用油红O染色和提取法定量分析细胞内脂肪生成和成脂分化程度,使用荧光定量PCR和Western blot分析脂肪细胞分化标志基因过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)、脂肪合成关键酶脂肪酸合成酶(FAS)和乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的表达,探讨MSTN调控猪前体脂肪细胞成脂分化可能的分子机制。结果显示,处理48 h后,与对照组细胞相比,25和50 ng/mL MSTN处理对细胞增殖活力无显著影响,而100 ng/mL MSTN可显著提高猪前体脂肪细胞增殖活力。油红O染色及提取结果表明,MSTN呈剂量依赖性抑制猪前体脂肪细胞的成脂分化。进一步研究表明,与0 ng/mL MSTN组细胞相比,100 ng/mL MSTN处理组细胞中MSTN表达量显著升高,而PPAR-γ、FAS和ACC的mRNA和蛋白表达均显著降低。研究表明,MSTN抑制猪前体脂肪细胞的成脂分化,效果呈剂量依赖性,此抑制作用可能是通过抑制PPAR-γ的表达,进而抑制脂肪的合成来实现的。     

肌肉生长抑制素调控肌肉和脂肪组织代谢的研究进展

肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN),又名生长分化因子-8(growth differentiation factor 8,GDF-8),是一种主要由骨骼肌分泌的蛋白质,在肌肉生长发育过程中起负调控作用。若MSTN基因编码区碱基突变或缺失,可以导致肌肉异常肥大,出现典型的"双肌"性状。近年来研究还发现,MSTN在脂肪组织中也表达,并在脂肪沉积的过程中发挥重要调控作用。因此,本文将从MSTN的基因结构、组织分布、作用机制以及功能等几个方面的相关研究进展进行综述,重点阐述其在肌肉和脂肪组织中的调控作用及机制,以期更深入了解MSTN,为畜牧业新品种的改良和肉质性状的改善奠定理论基础。     

PBL教学法在动物生理学理论教学中的实施与效果

该研究基于动物生理学教学中存在的一些实际问题,探讨了问题导向教学法(PBL)在动物生理学课程理论教学中的实施与效果,认为PBL教学法在该课程理论教学中的实施不仅有助于改善教学效果,提升课堂教学质量,同时对动物医学类拔尖创新人才的培养也有一定的参考价值。     

帕金森病模型大鼠脑内CDNF表达变化

为了探讨帕金森病(PD)发病过程中大脑多巴胺能神经营养因子(CDNF)表达的变化,以大鼠为模型,研究了帕金森病CDNF及相关基因的表达变化,从而为基因治疗帕金森病提供理论依据。实验采用单侧黑质内单点注射6-羟多巴胺的方法制备帕金森病大鼠模型;运用免疫组织化学、Western blot及Q-PCR方法检测CDNF和多巴胺合成限速酶—酪氨酸羟化酶(TH)在模型大鼠黑质中表达的变化。研究结果发现,PD模型大鼠脑黑质区CDNF和TH阳性细胞数明显减少;进一步研究表明,与正常大鼠相比,模型大鼠CDNF m RNA表达水平虽未见显著改变(P0.05),但CDNF及TH蛋白表达极显著降低(P0.01)。提示帕金森病的发病可能与黑质中CDNF和TH表达量降低,进而抑制多巴胺合成有关。     

姜黄素通过激活自噬影响猪前体脂肪细胞脂质沉积的研究

为了探讨姜黄素处理对猪前体脂肪细胞脂质沉积的影响及其自噬激活机制在其中所起的作用,采用断奶仔猪皮下脂肪分离获得前体脂肪细胞,增殖培养至85%~95%融合,利用终浓度为0.1 mmol/L 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、0.25μmol/L地塞米松(DEX)、5μg/m L胰岛素(Insulin)的诱导分化液诱导分化,同时给予姜黄素处理,随机分为2组:对照组(诱导分化液+姜黄素溶解试剂DMSO)和处理组(诱导分化液+10μmol/L姜黄素),48 h后收集细胞进行分析。结果显示:与对照组细胞相比,10μmol/L姜黄素处理对细胞增殖能力没有明显影响(P=0.82),但能极显著降低脂肪细胞中甘油三酯(TG)的沉积量(P0.01);与对照组相比,10μmol/L姜黄素处理能极显著增加自噬标志基因(LC3)和溶酶体酸性脂肪酶(Lipa)mRNA的表达(P0.01);Western blot显示,10μmol/L姜黄素处理能显著增加LC3的表达(P0.05),并促进LC3-I向LC3-II的转化。结果表明:姜黄素处理能显著抑制猪脂肪细胞脂质沉积,该过程可能是通过自噬激活机制来实现的,研究结果为畜牧兽医生产中姜黄素的应用提供理论支持。     

类风湿性关节炎大鼠模型的构建及免疫相关基因mRNA表达的研究

为了比较类风湿性关节炎大鼠模型建模效果,并探究免疫相关基因mRNA的表达,本研究分别采用胶原(CIA)和完全弗氏佐剂(AA)两次皮内注射方法制备大鼠模型,对照组(C组)注射等体积生理盐水,以足趾肿胀值判断成模情况。在造模后不同时间点,采用ELISA试剂盒测定血清中细胞因子IL-1β的含量,运用RT-PCR方法检测脾组织中免疫相关基因PD-1、TGF-β1和Foxp3 mRNA的表达。结果显示,AA组和CIA组大鼠足趾肿胀值均显著增大(CIAAA对照组),血清IL-1β浓度在第2周与第4周显著升高(CIAAA对照组),脾组织中PD-1、TGF-β1和Foxp3 mRNA表达显著降低(CIAAA对照组)。以上结果表明,CIA和AA注射均可成功制备RA模型,且CIA模型较AA模型成模效果更好,IL-1β在RA发病中起着至关重要的作用。     

TNF-α-siRNA联合骨髓间充质干细胞对大鼠类风湿关节炎治疗效果的研究

抑制患者体内肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达可作为治疗类风湿关节炎(RA)的重要途径.以鸡Ⅱ型胶原法诱导的RA模型大鼠为研究对象,探讨TNF-α-siRNA联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗RA的效果及其作用机制.RA大鼠随机分为PBS组(模型对照)、甲氨蝶呤组(阳性药物对照)、BMSCs移植组、TNF-α-siRNA注射组和TNF-α-siRNA+BMSCs移植治疗组共5个组.结果表明:与PBS组模型大鼠相比,4个治疗组大鼠的生长速度均极显著提高,而血清中TNF-α、IL-1β水平、足趾肿胀值及强迫游泳不动时间均极显著降低.进一步研究表明,与PBS组模型大鼠相比,基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP-1)表达水平在4个治疗组均极显著提高,而基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平均极显著降低;TNF-α-siRNA+BMSCs联合治疗效果显著优于其他治疗组.这一研究说明,TNF-α-siRNA+BMSCs联合治疗可能通过抑制RA关节处MMP-9的表达而发挥作用,从而为基因干扰联合干细胞移植治疗RA提供了重要的试验依据.