桥接治疗急性缺血性脑卒中患者的血管再通率及远期神经功能恢复分析

目的 探讨重组组织型纤溶酶原激活物（rtPA）静脉溶栓联合血管内介入治疗（即桥接治疗法）对急性缺血性脑卒中患者的治疗效果。方法 选取我院（2015年1月-2018年1月）收治的100例急性缺血性脑卒中患者进行回顾性分析,根据治疗方法分为观察组47例（桥接治疗法）、对照组53例（rtPA静脉溶栓疗法）,对比两组治疗后的血管再通率、神经功能恢复情况。结果 观察组前循环梗死血管（颈内动脉、大脑前动脉、大脑中动脉）再通率91.49%,对照组前循环梗死血管再通率50.94%,两组比较差异具有统计学意义（P<0.01）;观察组治疗14 d、治疗28 d、治疗3个月,神经功能缺损（NIHSS）评分均显著的低于对照组（P<0.01）;根据mRS标准,观察组的预后良好87.23%,对照组预后良好52.83%,两组比较差异具有统计学意义（P<0.01）;观察组的并发症发生率8.51%,对照组并发症发生率16.98%,两组比较差异无统计学意义（P>0.05）。结论 桥接治疗对缺血性脑卒中患者的效果优于rtPA静脉溶栓疗法,对于患者远期神经功能恢复具有显著效果。     

普通质粒载体与Semliki森林病毒复制子载体表达GHRH的比较

新一代Semliki森林病毒RNA复制子源自甲病毒属Semliki森林病毒的基因组,它克服了一些现有的DNA和RNA载体表达效率低的缺点。复制子保留了编码病毒复制酶的基因,结构基因被外源基因所取代。复制酶能够使RNA在胞质中高水平的复制以及外源基因高水平的表达。为了评价SFV复制子载体提高外源基因表达的效力,本研究首先对pIRES-neo表达载体用BamHⅠ酶切和去磷酸化,连接LacZ基因,构建了普通真核表达载体pIRES-neo-LacZ。然后采用脂质体介导分别将含报道基因LacZ复制子载体pCMV-rep-LacZ和两个普通表达载体pLNCX-LacZ、pIRES-neo-LacZ转染293细胞;将表达GHRH的复制子载体pCMV-Rep-GHRH和普通载体pIRES-GHRH、pCDNA3-GHRH转染293细胞。分别对不同载体转染细胞表达的β-半乳糖苷酶以及利用RIA 、RT-PCR对表达的GHRH进行了定量分析,结果表明：复制子载体表达外源基因的效率比非复制子载体高2～3倍。本研究为提高外源基因在真核细胞的表达提供了有益的探索。     

80例支架植入术治疗椎动脉起始部狭窄的临床疗效长期随访

目的 探讨支架植入术治疗椎动脉起始部狭窄的安全性及有效性。方法 回顾性分析2009年1月至2014年1月在长沙市第一医院神经内科住院的80例椎动脉起始部狭窄患者进行支架成形术治疗的病例资料,并对其进行随访,观察其治疗的安全性及长期疗效。结果 80例患者成功植入80枚支架,技术成功率100%;放入支架前椎动脉狭窄率为（76.67±4.03）%,放入支架后椎动脉狭窄率为（13.70±1.88）%;80例患者最长随访7年,最短随访2年,失访1例,2例发生支架内再狭窄,再狭窄率3.75%。58例患者临床症状消失,21例临床症状缓解,1例临床症状加重,总有效率98.75%。结论 支架成形术治疗椎动脉起始部狭窄是一种非常安全及有效的方法。     

大鼠β微管蛋白在大肠杆菌中的表达及其抗体制备

在获得重组质粒pMD-18T—BTUB的基础上，成功地构建了重组表达质粒pET-28a—BTUB，并将其转化入大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中，经IPTG诱导表达，该诱导菌经SDS上样缓冲液进行处理后，SDS—PAGE电泳检测到相对分子质量约为14400的目的蛋白带，薄层扫描分析表明目的蛋白占总蛋白的41．8％。目的蛋白经透析袋电洗脱法纯化后，采用常规方法制备家兔多克隆抗体，ELISA检测表明此蛋白具有良好的抗原性。     

基于RNA复制子GHRH基因表达载体的构建及在293细胞中的表达

本研究将GHRH基因克隆到塞姆利基森林病毒(SFV)复制子质粒型表达载体pCMV-Rep-lacZ,构建了真核表达载体pCMV-Rep-GHRH。采用脂质体介导将表达质粒pCMV-Rep-GHRH转染293细胞,经RT-PCR、IFA、Tricine-SDS-PAGE和Western Blot检测,证明表达质粒pCMV-Rep-GHRH在293细胞中正确地表达了GH-RH多肽分子。本研究还利用放免法检测质粒载体转染细胞培养上清中GHRH浓度,初步比较了RNA复制子载体pCMV-Rep-GHRH和普通载体(pIRES-GHRH和pcDNA3-GHRH)的表达效率,结果表明,转染48 h,RNA复制子载体表达GHRH的含量显著高于普通载体,分别比pIRES-GHRH和pcDNA3-GHRH高出36.12%(P<0.05)和67.94%(P<0.05)。结论:构建的真核表达载体pCMV-Rep-GHRH能够在真核细胞293中表达GHRH多肽分子,且表达水平显著高于普通载体,为下一步更好地调控动物生长以提高动物生产性能奠定基础。