猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪流行性腹泻病毒双重TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为了建立快速、简便且能同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)和猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的方法,试验根据GenBank中已登录的PRRSV ORF7基因序列和PEDV N基因序列,设计2对特异性引物和2条TaqMan探针,通过优化扩增条件建立检测PRRSV和PEDV的双重TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,同时还进行了特异性、敏感性、重复性试验以及临床样品检测。结果表明:最终确立的20μL扩增体系中各引物和探针的加样量分别为:PRRSV-F 0.8μL,PRRSV-R 0.6μL,PRRSV-P 0.5μL;PEDV-F 1.2μL,PEDV-R 1.0μL,PEDV-P 0.7μL。(优化后的最佳扩增程序为:50℃反转录6 min;95℃预变性1 min;95℃变性10 s,55℃退火10 s,72℃延伸10 s,共40个循环)。检测PRRSV和PEDV的敏感性可分别达到1.05 TCID_(50)/100μL和3.16 TCID_(50)/100μL,该方法特异性好,不与其他常见猪病病原体发生交叉反应,批内变异系数和批间变异系数均不高于2.0%。用该方法对234份临床样品进行检测,PRRSV阳性样品15份, PEDV阳性样品20份,检出率高于常规RT-PCR方法。说明试验建立的双重TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法敏感性高,特异性好,可同时准确、快速检测PRRSV和PEDV。     

田阳县加大扶持贫困户发展山羊养殖方法的建议

正笔者参加了田阳县政协第八次会议第74号提案的答复工作,对政协委员提出的"关于加大圈养山羊扶持力度的建议",经实地调研和考察,并对照精准扶贫开发的相关政策,认为巴别乡要求加大圈养山羊扶持力度,通过山羊养殖脱贫致富的愿望是值得关注和支持的。为了拓宽群众的致富门路和正确引导山羊养殖的发展思路,现将扶持、指导巴别乡大力发展山羊圈养的建议归纳如下,以便广大养殖户参考和借鉴。     

林业新技术(二则)

△巴西卡宾纳斯有一株从外地移植来的观赏树木,十五年来一直不开花,后经巴西针灸专家莱依达采用针灸法治疗,终于开出满树的花朵。莱依达认为,中国的「阴阳学说」,不仅适用于给人治病,同样适用于给植物治病。他对不开花或不结果的树木进行了针灸试验,把针灸穴位定在树的分杈处,对「阴失调」的树,就在分杈的内角扎进几根钉子对「阳失调」的树,则把钉子扎进分杈的外角。他的试验取得了令人难以置信的效果。△日本专家研制成一种能够快速鉴别树种的电子仪器。从热带雨林取来的不知名称的树叶,只要将其放在该仪器上,就能很快地鉴别出这是什么树的树叶。利用这种电子仪器鉴别树种,不仅可节省时间,而且还能充分掌握树种的分布情况。△最近由法国某公司研制成功了一个由一台水泵和台空气涡轮机组成的森林灭火设备。使用时,先将水注入空气涡轮机内,然后通过水泵成雾状喷出,射向火     

哺乳仔猪断奶后的疾病

1前言 曾经有人跟我说过一句话:“猪的出生有2次”.虽然后来明白了其中的含义,但刚听到这句话时,脑海中却浮现出许多的问号. 本文的题目是有关仔猪断奶后会发生的疾病.即使在科技相当发达的今天,仔猪也是要在母猪体内经过大约114 d的妊娠期才会生出来,这就是所说的第一次诞生.然后,刚出生的仔猪,能够从母猪那儿收到会影响其今后生长的重要礼物“初乳”.     

青石山水电站增容改建工程切割爆破拆除设计方案

一、工程概况青石山水电站位于甘南藏族自治洲临潭县新堡乡境内的洮河干流上。已建电站是利用长约8km的河曲截弯取直,引水发电,利用水头约26.0m,设计引水流量57.9m3/s,装机12MW。主要建筑物有溢流坝、泄冲闸、进水闸、动力渠道、引水隧洞、前池、厂房     

父亲的“小四轮”

1998年春节前夕,我因有许多事要处理,一直忙到腊月二十九才坐上回家的列车。车窗外大雪纷飞,漫山遍野银装素裹。我非常激动——一半缘于这美丽的雪景;一半缘于即将与家人团圆。     

双吸盘小麦精密排种器参数设计与优化

为适应小麦精密播种的要求,对传统气吸式精密排种器进行改进,确定了各部件参数的取值范围。通过二次回归正交试验,分析吸孔直径、吸孔处压力和排种盘转速3个因素对合格率的影响,并建立了合格率的回归方程进行方差分析和拟合度检验。结果表明:影响小麦气吸式排种器合格率的因素依次为:排种盘型孔直径、吸孔处风压和排种盘转速;经回归方程优化得到各因素的最优组合为,吸孔直径2.6 mm、排种盘转速28.3 r/min、吸孔处压力2.28 kPa,此时排种器合格率达到97%,满足小麦精密播种的要求。改进后的小麦精密排种器结构简单,较传统气吸式精密排种器排种性能有较大提高。     

生态工程背景下黄土高原植被变化时空特征及其驱动力

[目的]分析1990—2015年黄土高原植被的时空演变规律,并从气候变化和人类活动两个方面分析该地区植被变化的驱动力,以期为生态环境保护相关政策的制定和区域可持续发展提供理论依据。[方法]基于GIMMS NDVI和MODIS NDVI建立长时间序列NDVI数据集,采用线性趋势分析、多元线性回归和改进的人类残差等分析方法,以NDVI为指标,辅助土地利用数据,对黄土高原地区1990—2015年期间植被时空变化特征及其影响因素进行了定量分析。[结果]①在1990到2015年期间,黄土高原地区植被的NDVI总体表现为上升趋势,且变化趋势较明显的分为两个时期,其中2000年以后NDVI上升速率较快;②2000年以后,黄土高原植被NDVI迅速上升,上升区域面积达到总面积的91.90%,其中NDVI显著上升面积比为65.78%;③黄土高原地区植被面积总体表现为增加,且主要来自于耕地的转入;④人类活动促使的植被恢复区域占黄土高原总面积的21.74%,主要分布在内蒙古的东部和北部、甘肃和宁夏的南部,以及陕西和山西的中部地区。[结论]随着退耕还林还草政策的实施,黄土高原地区植被面积持续增加,且植被生长状况持续变好,黄土高原植被恢复的原因主要是气候和人类共同影响,其中人类影响的程度较大。