利用iTRAQ技术和转录组筛选芍药属远缘杂交不亲和基因

【目的】远缘杂交育种是目前牡丹、芍药品种改良和育种的主要方法,而远缘杂交不亲和一直是制约其快速发展的主要因素。本研究从牡丹、芍药远缘杂交授粉后不亲和应答相关的柱头差异蛋白与转录组方面深入研究,揭示牡丹、芍药远缘杂交不亲和的分子机理,为杂交育种提供理论依据。【方法】以芍药‘粉玉奴’自交、芍药‘粉玉奴’与牡丹‘凤丹白’杂交为供试材料,在授粉后24 h采取柱头,分别进行同位素标记相对定量（iTRAQ）和转录组技术分析。对所获得的蛋白和转录组数据进行生物信息学分析,并对其中可能与远缘杂交不亲和相关的基因进行定量PCR验证。【结果】利用iTRAQ技术分析牡丹、芍药远缘杂交后柱头中蛋白质的表达差异,共鉴定到685个差异蛋白,富集到了188条通路,其中显著富集的Pathway有18条。与不亲和授粉相关代谢通路有RNA降解、钙信号途径、丝裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase signaling pathway,MAPK）信号途径、磷脂酰肌醇信号系统。在RNA降解代谢通路中,烯醇酶（Enolase）、热休克蛋白DnaK（HSP70）及病菌抗原（GroEL）均表达下调。在钙信号途径中,钙调蛋白（CALM）表达下调,腺苷酸转运酶（adenine nucleotide translocase,ANT）表达量增加,表达上调。MAPK信号途径中,乙二醛酶Ⅰ（GloI）表达下调。磷脂酰肌醇信号系统中的钙调蛋白（CALM）表达下调。随机选取与差异蛋白相关的6个基因进行qRT-PCR验证,结果显示,6个基因的表达与蛋白质水平趋势相一致,均表达下调。通过转录组测序,共获得了52 998个有注释信息的Unigene,占所有Unigene的40.37%。基于6组样品的RPKM（Reads Per Kilobase per Million）值,共筛选到16 224个差异基因。其中上调基因13 361,下调基因2 863个。对差异基因进行Pathway显著富集分析,杂交与自交相比,不亲和差异表达的基因主要富集在氧化磷酸化代谢、ABC转运蛋白、次级代谢产物等通路。与远缘杂交不亲和相关且发生显著变化的基因有CalS-5、CalS-12（胼胝质酶）和SPL（squamosa promoter binding protein-like）表达上调,ABCF（ABC transporter family protein）表达下调。【结论】在转录组和蛋白数据共注释到6个蛋白、4个基因与植物不亲和性密切相关,这些蛋白与基因可能在远缘杂交不亲和方面发挥着重要作用。     

核桃多头高位芽接快速丰产栽培技术

近年来核桃尤其是薄壳核桃发展特别迅速,常导致薄壳核桃苗价位虚高甚至脱销,为了节省资金,一些地区多采用实生苗建园,但是由于核桃实生苗结果晚,必须及时嫁接改优.     

枣新品种‘中牟脆丰’

 ‘中牟脆丰’是早熟鲜食枣新品种。果实较小,平均单果质量5.91 g,整齐度高,肉质酥脆多汁,风味酸甜,可溶性糖含量17.70%,可滴定酸含量0.55%,口感好,鲜食品质上等。结果能力强,丰产性好,裂果轻。9月中下旬成熟,适宜在河南各枣区栽培。     

不同方法对石榴叶片DNA提取效果的影响

以4个石榴(PunicagranatumL )品种为实验材料,用SDSⅠ,SDSⅡ,CTABⅠ,CTABⅡ4种方法提取石榴叶片DNA 结果表明,SDS法提取得率为500～600μg·g-1,但OD值偏低,为1 50～1 70;RAPD分析无扩增;CTAB法所得DNA得率为200～500μg·g-1,OD值为1 80～1 90;RAPD分析扩增带清晰CTABⅠ和CTABⅡ相比,操作简单、省时,得率高,综合考虑CTABⅠ是石榴叶片DNA提取的最佳方法     

河南省新型城镇化背景下新农村规划思考

摘要：文章介绍了河南省新型城镇化发展背景,回顾了河南省新农村发展进程及建设现状,研究了新农村建设与发展中凸显的问题,对新农村规划进行了思考,提出了12条适合新农村规划的战略方法,并对新农村建设提出了9条建议。     

果园间作套种紫花苜蓿技术

从选择良种、选地整地、精细播种、控制杂草、施肥浇水、病虫防治和适时刈割等方面介绍了果园间作套种紫花苜蓿技术。     

无籽西瓜子叶离体培养及植株再生试验

无籽西瓜比普通二倍体西瓜糖度高、食用方便、耐贮运，倍受人们青睐。但其制种复杂，成本高，所得的三倍体无籽西瓜种子中很多胚芽发育不良，子叶畸形，种皮厚，种子发芽率低，苗期生长缓慢，这些因素制约了无籽西瓜的生产。西瓜组织培养始于20世纪70年代，自1979年获得初步成功以来，国内外相继报道了这方面的研究进展，但利用无籽西瓜子叶作为外植体获得再生植株的报道甚少。为此，我们以无籽西瓜子叶为外植体，研究了通过愈伤组织阶段诱导芽及获得再生植株的培养条件。     

无籽西瓜成熟胚无菌萌发条件研究

对无籽西瓜成熟胚的无菌萌发条件进行了系统研究 ,结果表明 :无籽西瓜成熟胚消毒的最佳方案是先用 75 %酒精预消毒 30s ,用无菌水冲洗 3次 ,然后用 10 %漂白粉加 0 .5 %NaClO消毒 30min ,再用无菌水冲洗 4～ 5次。无籽西瓜成熟胚消毒后平放于蛭石培养基或琼脂培养基中 ,先暗培养 3d后转到光下培养 ,生长效果较佳。无籽西瓜成熟胚在无菌条件下萌发生长与品种基因型没有必然的联系 ,只要成熟胚在适宜的光、温、水、气条件下 ,均可正常萌发。     

无籽西瓜子叶离体培养及植株再生研究

以无籽西瓜黑蜜5号无菌苗子叶为材料,对组织培养植株再生的条件进行了详细的研究。研究结果表明:子叶芽诱导的最佳培养基配方为MS 6-BA3.0mg/L NAA0.1mg/L。芽的诱导需要先在黑暗条件下启动,生长分化则须在光下进行。适宜的生根培养基配方为1/2MS IAA0.4mg/L和1/2MS IBA0.3mg/L。试验初步建立了适用于无籽西瓜遗传转化和快速繁育的子叶再生系统。     

运动休闲参与因素和满意度分析——提高休闲体育质量 建设美丽中国

“健康是人全面发展的基础，关乎千家万户的幸福” 。（党的十七大报告）“建设美丽中国”。（党的十八大报告）说明关注健康和生态环境已上升到国家发展战略的高度。采用文献资料、实地调查、问卷调查和数理统计等研究方法，研究探讨了现代社会大众参与休闲体育活动开展的影响因素，其影响因子有环境条件因子、条件引导因子、主观态度因子、经济保障因子和功能绩效因子。对珠江三角洲居民参与运动休闲活动行为的满意度进行了深层分析，研究表明，居民对自身参与的休闲体育行为、对休闲健身的环境和公共服务基本是满意的，该研究为提高珠江三角洲大众参与休闲体育活动质量，建设美丽中国，为相关职能部门决策提供参考。