黑曲霉固态发酵产酸性磷酸酯酶的工艺研究

为探讨黑曲霉固态发酵酸性磷酸酯酶(ACP)的产酶条件,首次采用固态培养的方法,在对黑曲霉3350产酸性磷酸酯酶的培养基组成和培养条件单因素研究的基础上,设计了Plackett-Burman试验选取了3个主要影响因素,并进行响应面分析.结果表明,黑曲霉3350产酸性磷酸酯酶的最适培养基和发酵条件为:麸皮8.0 g,蔗糖2.0 g,豆饼粉1.11 g,水13.9 ml,土温-801.0ml/kg,NH4NO320g/kg,KH2PO42.5g/kg,自然pH值;32℃固体静置培养120h,期间翻曲2～3次.在该条件下菌株最高产酶活性为154IU/g干曲,比优化前产酶提高88%,与液态发酵周期(9d)相比缩短了44%.     

产α-葡萄糖苷酶菌株的筛选及其培养条件的研究

以6株霉菌为出发菌株发酵提取α-葡萄糖苷酶,以麦芽糖为底物进行转苷试验,用高压液相色谱法分析,筛选出1株产酶活力较高的菌株黑曲霉41873,并对其液体培养产酶条件进行了优化.单因素试验发现最佳碳源为麦芽糖,最佳氮源为豆饼粉,钙离子对产酶有促进作用.为进一步优化产酶条件,采用Plackett-Burman试验设计,从8因素中选出影响产酶的3个重要因素:麦芽糖浓度、接种量和培养时间.利用响应面分析法预测了当麦芽糖浓度为19.8 g/L,培养时间为18.2 h,接种量为0.2 ml时酶活达最大,为549.65 U/ml,通过试验验证,实际酶活分别为529、544U/ml,该模型有较好的预测性.