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1.
黑曲霉酸性β-甘露聚糖酶的纯化及部分性质研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
黑曲霉(Aspergillus niger)WM20-11固态发酵成熟曲,经磷酸缓冲液浸提、硫酸铵分步盐析、DEAE-Sepharose fast flow阴离子交换层析、Sephadex G-100凝胶过滤层析等分离纯化手段,最终获得了Native-PAGE、SDS-PAGE纯的酸性β-甘露聚糖酶组分,其纯化倍数为25.08,收率为5.1%。Sephadex G-100凝胶过滤层析和SDS-PAGE测得纯酶的相对分子质量分别为39 kD和40 kD,表明该酶以单体形式存在;IEF-PAGE测得该酶的等电点为4.0;含糖量测定为19.6%;酶蛋白氨基酸组成中(Asp+Glu)/(Lys+Arg)为3.74。  相似文献   
2.
朱劼  杨书艳  邬敏辰 《安徽农业科学》2007,35(21):6443-6444
为研究低聚木糖对小鼠血糖、血脂的影响,采用四氧嘧啶造糖尿病小鼠模型,喂食高脂溶液建立高脂血症小鼠模型,对其灌胃低聚木糖,测定小鼠体重、血清中血糖(Glu)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量。结果表明:低聚木糖可使正常小鼠的体重减轻,有效降低糖尿病小鼠的Glu含量而不改变ALT,降低高脂血症小鼠TG、TC的水平,提高HDL-C与TC的比值。  相似文献   
3.
以宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)E001株基因组DNA为模板,PCR扩增了编码木聚糖酶Ⅱ(Xyla-nases,XynⅡ)成熟肽的DNA片段。构建重组克隆质粒pUCm-T-XynⅡ,并以其为摸板,PCR扩增XynⅡ成熟肽的cDNA片段(555 bp),连接于表达质粒pGEX-5X-3的BamHⅠ和EcoRⅠ酶切位点间,构建重组表达质粒pGEX-5X-3-XynⅡ,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,并对表达产物进行检测。结果表明,XynⅡDNA中存在1个内含子,长度为51 bp;融合蛋白GST-XynⅡ主要以包涵体形式存在,相对分子质量约为50 ku,IPTG诱导1,3和5 h融合蛋白GST-XynⅡ的表达量分别约占菌体总蛋白量的12.6%,25.3%和32.1%。表明宇佐美曲霉E001菌株XynⅡ基因融合表达成功。  相似文献   
4.
徐静娟  邬敏辰  许钢 《安徽农业科学》2007,35(30):9683-9684
为更好地开发利用茶树菇。采用氮蓝四唑(NBT)光化还原法、抗坏血酸-Cu2+-H2O2体系法和亚油酸体系法,研究茶树菇提取物清除超氧自由基O2-.、羟基自由基.OH和脂过氧自由基ROO.的效果。在配制的不同质量浓度的茶树菇提取物溶液中,在一定的浓度范围内,茶树菇提取物对超氧自由基O2-.、羟基自由基.OH和脂过氧自由基ROO.的清除率随着浓度的升高呈上升趋势。质量浓度分别为17.78、4.67、12.82 mg/ml时,茶树菇提取物对O2-.、ROO.和.OH的清除率最高,依次为69.29%、63.59%、90.26%。茶树菇提取物有较强的抗氧化能力,作为天然的抗氧化剂具有良好的开发前景。  相似文献   
5.
酸性β-甘露聚糖酶高产菌株的诱变育种   总被引:1,自引:0,他引:1  
摘要:以一株实验室保藏的酸性β-甘露聚糖酶产生菌黑曲霉(Aspergillus niger)LW-1作为原始出发菌株,首先经自然分离筛选出一株产酶较稳定的N-9作为诱变出发菌株,再经真空微波和甲基磺酸乙酯(EMS)逐级诱变处理,采用基础发酵培养基固态发酵筛选以及斜面传代培养,获得了一株高产、稳产酸性β-甘露聚糖酶的E-30菌株。其产β-甘露聚糖酶活性达36 675 U/g,是原始出发菌株(17 048 U/g)的2.15倍。E-30菌株三角瓶麸曲种子保藏两个月,产酶活性稳定。  相似文献   
6.
为探讨黑曲霉固态发酵酸性磷酸酯酶(ACP)的产酶条件,首次采用固态培养的方法,在对黑曲霉3350产酸性磷酸酯酶的培养基组成和培养条件单因素研究的基础上,设计了Plackett-Burman试验选取了3个主要影响因素,并进行响应面分析.结果表明,黑曲霉3350产酸性磷酸酯酶的最适培养基和发酵条件为:麸皮8.0 g,蔗糖2.0 g,豆饼粉1.11 g,水13.9 ml,土温-801.0ml/kg,NH4NO320g/kg,KH2PO42.5g/kg,自然pH值;32℃固体静置培养120h,期间翻曲2~3次.在该条件下菌株最高产酶活性为154IU/g干曲,比优化前产酶提高88%,与液态发酵周期(9d)相比缩短了44%.  相似文献   
7.
食用菌深层发酵及其多糖活性研究进展   总被引:3,自引:0,他引:3  
邓超  邬敏辰 《安徽农业科学》2007,35(15):4622-4625
综述了食用菌深层发酵及其多糖活性的研究概况,包括食用菌深层发酵的工艺和特点,深层发酵产物的应用,真菌多糖分离测定方法及生物活性。  相似文献   
8.
茶树菇深层发酵产物与子实体营养成分的分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
邓超  邬敏辰 《安徽农业科学》2007,35(5):1342-1343
对茶树菇深层发酵产物和子实体的一般营养成分、氨基酸的组成及含量、微量元素的含量以及不同来源的茶树菇多糖的单糖组成进行了分析.结果表明,茶树菇发酵菌丝体、发酵液和子实体均合有17种氨基酸,以谷氨酸和天冬氨酸含量最高,必需氨基酸中茶树菇菌丝体和子实体都以亮氨酸含量最高,发酵液以赖氨酸含量最高.茶树菇菌丝体和子实体中均含有较高的Ca、Fe、Zn等人体易缺少的微量元素,菌丝体中的微量元素含量的多少易受培养基成分的影响,与子实体中微量元素含量有差别.胞内粗多糖中多糖含量为11.2%,胞外粗多糖中多糖含量为20.3%.不同来源的茶树菇深层发酵多糖在单糖组成上基本相似,都是以葡萄糖作为其主要成分,其次是半乳糖,除了5种标准单糖外,可能还含有其他单糖.茶树菇胞内多糖和胞外多糖各主要单糖组成及质量分数分别为阿拉伯单糖0.74%、1.10%,木糖1.41%、0.62%,甘露糖0.96%、1.30%,葡萄糖22.3%、26.3%,半乳糖2.97%、3.15%.  相似文献   
9.
宇佐美曲霉木聚糖酶(xynⅡ)基因在大肠杆菌中的表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
根据宇佐美曲霉(Aspergill ususamii)E001菌株木聚糖酶xynⅡcDNA序列(GenBank登录号为DQ114485),合成1对引物(含EcoRⅠ和SalⅠ酶切位点),以重组质粒pUCm-T-xynⅡ为模板,扩增得到编码xynⅡ成熟肽的cDNA片段(555bp)。将其与表达质粒pET-28a连接,构建重组表达质粒pET-28a-xynⅡ,并转化大肠杆菌(Escherichia.coli)BL21-CodonPlus(DE3)-RIL,获得重组工程菌BL21xynⅡ。经IPTG诱导表达,木聚糖酶的比酶活力最高可达35.6Umg。最后采用金属Ni2 螯和层析柱对所表达的木聚糖酶进行纯化,获得电泳纯的木聚糖酶。重组表达的木聚糖酶最适温度为45℃,最适pH4.6。  相似文献   
10.
木瓜蛋白酶水解大豆蛋白工艺条件的优化   总被引:3,自引:0,他引:3  
以大豆浓缩蛋白为原料,研究了酶用量、固液比、水解时间、水解温度及pH值对氨基酸提取率的影响。最佳酶解条件为:酶用量为5%,固液比为1∶8,水解时间为5h,水解温度为55℃,pH值为6.7。得到了用木瓜蛋白酶水解大豆蛋白质的最佳酶解工艺。  相似文献   
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