配施有机肥对‘香玲’核桃生长、产量和坚果品质的影响

以4 a生‘香玲’核桃作为供试对象,采用随机区组施肥方法进行试验。在施用等量化肥情况下,研究配施不同有机肥对不同年龄段‘香玲’核桃的生长、产量及坚果品质的影响。结果表明:与不施肥(CK1)处理相比,不同施肥处理均一定程度提高了4年生核桃树的生长量、产量,及坚果营养成分含量,其中化肥同时配施有机肥和生物有机肥(T3)处理效果最显著。4年生核桃T3处理,新梢长度和粗度分别较CK1高出7. 17%和11. 20%,鲜果质量、干果质量和核仁质量分别较CK1提高19. 12%、45. 58%和50. 08%,出仁率和出油率分别较CK1提高3. 10%和4. 04%。核仁中油酸较CK1提高11. 41%,亚油酸、亚麻酸分别降低0. 64%和19. 80%。综上认为,核桃幼园实施化肥、有机肥与和生物有机肥配施,对促进树体生长、提高产量及坚果品质效果显著。     

刚毛柽柳 TheIF1A 基因的互作蛋白及其表达模式分析

翻译起始因子是一类翻译起始所必需的特异蛋白因子,前期研究表明柽柳翻译起始因子 (TheIF1A) 基因能对外界盐和干旱等非生物胁迫做出响应,且过表达 TheIF1A基因能提高酵母和烟草的抗旱耐盐能力。为进一步研究TheIF1A基因的抗逆机制,本研究通过酵母双杂交对柽柳翻译起始因子(TheIF1A) 基因的互作蛋白进行了筛选,共获得5个互作蛋白,分别为RNA聚合酶β II亚基 (RNA polymerase beta II subunit)、ATP合成酶CF1α亚基蛋白 (ATP synthase CF1 alpha subunit protein)、细胞色素b6/f 复合物亚基IV(cytochrome b6/f complex subunit IV)、核酮糖1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶小亚基蛋白(ribulose 1,5-bisphosphate carboxylase/oxygenase small subunit)和组蛋白乙酰转移酶(histone acetyltransferase)。利用实时荧光定量PCR对这5个蛋白基因及 TheIF1A 基因在盐和干旱胁迫处理下的表达模式进行分析,结果表明:这些蛋白基因在盐和干旱胁迫下的表达模式与 TheIF1A基因基本一致,表明TheIF1A可能通过与这些蛋白相互作用来参与逆境胁迫应答。为进一步研究TheIF1A 基因的抗逆机理奠定了基础,有利于完善林木抗逆机制的研究,并为通过基因工程手段提高林木抗逆性提供了候选基因。     

影响核桃高接换优成活率及生长量的主要因素

为了探究砧木直径、立地条件及气候因子3个因素对核桃嫁接成活率和生长量的影响,分别于2013年5月下旬和12月中下旬,以采自西北农林科技大学的"香玲"、"西林3号"、"西洛2号"核桃良种接穗为试材,分别对宁陕县江口镇和商州区腰市镇核桃嫁接成活率及生长量情况进行了调查。结果表明:生产中对核桃实生树进行嫁接改造时,选择砧木直径在9~12cm的实生树可以保证较高的成活率;枝条长度生长量与砧木直径呈正相关;平地的核桃嫁接成活率及生长量均较坡地好;降雨量对核桃嫁接成活率及生长量至关重要。该研究可为生产中提高核桃嫁接成活率和生长量提供依据。     

核桃JrTT1-1启动子不同长度片段响应干旱的活性分析

  目的  TTl是C2H2-ZFP（WIP型锌指结构）类转录因子调控蛋白,核桃JrTT1-1基因启动子含有干旱响应元件,具有调控干旱胁迫的功能。本研究通过分离JrTT1-1基因不同长度启动子片段并对其受干旱胁迫后的表达活性进行分析,探讨JrTT1-1基因响应干旱胁迫的机制。  方法  根据WRKY顺式作用元件的分布,将JrTT1-1基因启动子分为1 002 bp（?1 ~ ?1 002）、720 bp（?1 ~ ?720）、448 bp（?1 ~ ?448）、174 bp（?1 ~ ?174）、149 bp（?1 ~ ?149）5个片段,分别记为S1、S2、S3、S4、S5。用S1、S2、S3、S4、S5分别替换pCAMBIA1301载体的CaMV35S启动子构建重组载体,通过农杆菌介导的蘸花法转化拟南芥,经潮霉素筛选、PCR验证及GUS基因表达分析确定后培养至T3代。对不同生长期不同组织进行GUS酶活性测定,评价不同片段的时空表达活性。将S1、S2、S3、S4、S5转基因植株种子萌发生长30 d进行干旱处理（50 mmol/L甘露醇）,未干旱处理的设为对照（CK）,分析整株、根及地上部分GUS酶活性,评价不同片段响应干旱的差异。  结果  正常生长条件下,S1、S2、S3、S4、S5转基因拟南芥在不同生长时期、不同组织器官中均能检测出GUS酶活性,但不同片段GUS活性具有差异,且随着片段变短,活性降低;但S1和S2之间的差异不显著。比较成熟种子、鲜种子、35 d根、茎、叶、花的GUS活性,发现不同组织之间也有区别,体现了5个片段的组织表达特异性。与CK相比,干旱胁迫下,5个片段整株、根和地上部分的GUS活性均显著提高,其中干旱胁迫后S1、S2、S3、S4、S5全株的GUS活性分别为CK的1.50、1.46、1.47、1.46、2.23倍,根GUS活性分别为CK的1.29、1.29、1.28、1.53、1.36倍,地上部分GUS活性分别为CK的1.62、1.59、1.57、1.59、2.30倍。  结论  JrTT1-1基因启动子片段的表达活性与其长度呈正相关,每个长度启动子片段活性具有根、茎、叶、花、种子等组织特异性;WRKY元件及其数量可能与干旱胁迫调节作用相关,且JrTT1-1启动子在干旱胁迫下的表达也具有组织差异性。      

核桃抗逆基因JrGSTU23的克隆及表达分析

谷胱甘肽转移酶GST基因在植物逆境响应中具有重要作用。核桃Juglans regia是重要的经济林木,其生长和产量受环境因子的影响。为探索核桃抗逆生理机制,筛选抗逆基因,以品种‘香玲’‘Xiangling’为试材,克隆获得核桃JrGSTU23基因,并进行生物信息学和基因表达分析,预测JrGSTU23的基本生物功能。结果显示:JrGSTU23基因的开放阅读框（ORF）为684 bp,编码多肽为25.89 kDa,包含氨基酸227,理论等电点为5.20。与碧桃Prunus persica,毛果杨Populus trichocarpa等同源蛋白进行多序列比对,发现均有GST-Tau保守结构域,且与香蕉Musa acuminata和毛果杨等的Tau家族GST蛋白具有较近的进化关系;其上游2 000 bp启动子中含有多种与逆境响应相关的顺式作用元件。实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）发现,JrGSTU23在植物激素脱落酸（ABA）,茉莉酸（MeJA）,水杨酸（SA）和非生物胁迫氯化钠,聚乙二醇（PEG 6000）,6℃等胁迫下能不同程度地被诱导表达,且在根和叶中的表达趋势不同。表明JrGSTU23受不同植物激素和非生物胁迫诱导,且具有组织表达特异性,推测其在核桃逆境响应中起到一定作用。     

安康‘紫仁’核桃响应干旱胁迫的生理评价研究

为深入了解‘紫仁’核桃响应干旱胁迫的综合能力,选取安康地区培育的‘紫仁’核桃进行干旱胁迫处理下的生理响应试验。对‘紫仁1’和‘紫仁2’分别进行PEG6000处理0、3、6、9、15 d后测定电导率、丙二醛(MDA)、抗氧化酶活性、脯氨酸等生理指标,分析‘紫仁’核桃干旱响应生理。结果表明:‘紫仁1’和‘紫仁2’在干旱胁迫后二者生理响应趋势相似,即相对电导率变大、MDA含量增多、SOD和POD活性增强、脯氨酸含量增加;‘紫仁1’在胁迫后的相对电导率及MDA含量显著高于‘紫仁2’,而‘紫仁1’的SOD和POD活性、脯氨酸含量却又低于‘紫仁2’,说明在相同PEG处理下,‘紫仁1’的综合抗旱能力低于‘紫仁2’。     

刚毛柽柳Dof基因的克隆及盐胁迫表达谱

Dof蛋白是植物所特有的一类DNA结合蛋白,参与多个生物学过程.通过对7个柽柳转录组分析,获得14个Dof全长基因序列,这些基因推导蛋白氨基酸残基数为263～507,编码蛋白的相对分子质量为27.52～55.24 kD,理论等电点为5.94 ～9.51.对7个柽柳转录组中Dof基因表达的分析表明,ThDof3、ThDo...     

核桃TT1类转录因子的筛选及干旱响应分析

TT1基因（transparent testa1）在植物逆境响应中有重要作用。核桃是重要的经济树种，其产量和质量均受环境影响。为进一步探索核桃（Juglans regia）抗逆机制，以‘香玲’核桃为试验材料，克隆获得核桃JrTT1基因，并进行基因表达和生物信息学分析，预测该基因的基本生物功能。结果表明，JrTT1-1、JrTT1-2、JrTT1-3基因的开放阅读框（OFR）分别为1 014、1 023、1 029 bp，蛋白分子量分别为37 763.51、38 492.94、38 136.36 u，含有氨基酸数分别为337、340、342，理论等电点分别为7.88、7.19、8.89。与其他物种的同源TT1蛋白具有较近的进化关系。且其上游1 200 bp启动子中含有多种与干旱逆境响应相关的顺式作用元件。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）发现，JrTT1-1、JrTT1-2、JrTT1-3基因在PEG₆₀₀₀胁迫下能不同程度地被诱导表达，且在叶和根中的表达趋势不同。表明JrTT1基因可以响应干旱胁迫诱导，并具有组织表达特异性，推测其在核桃逆境响应中具有一定作用。     

食用油料经济林油脂合成途径基因研究进展

油茶和核桃是我国最重要的两类经济木本油料,茶油和核桃油均富含不饱和脂肪酸,深受群众喜爱。该文综述了油茶和核桃油脂合成途径中油茶果糖二磷酸醛缩酶(Co FBA)、油茶乙酰辅酶A羧化酶(Co ACCase)、油茶硬脂酰-ACP脱饱和酶(Co SAD)、油茶脂肪酸脱饱和酶(Co FAD)、油茶甘油-3-磷酸酰基转移酶(Co DGAT)、核桃异质型乙酰辅酶A羧化酶(Jr ACCase)等基因的研究进展,并对其在分子育种中的意义进行了展望。以期为分子育种途径调节食用油料经济林油脂不同成分间比例提供理论基础。     

ThMYB3和ThDof2对ThVHAc1基因表达的调控

ThVHAc1基因能响应干旱、盐、重金属等胁迫诱导,该基因能有效提高转ThVHAc1基因酵母的多种抗逆能力。为进一步研究ThVHAc1基因的抗逆调控机理,本研究利用酵母单杂交技术钓取ThVHAc1可能的上游调控因子,并利用基因枪瞬时共转化技术进行初步验证。酵母单杂交结果显示,ThMYB3基因能识别ThVHAc1基因上游MYB顺式作用元件和含有MYB元件的启动子片段。ThDof2基因能识别ThVHAc1基因上游DOF顺式作用元件和含有DOF元件的启动子片段。但ThMYB3和ThDof2均不能识别突变后的元件及含对应突变元件的启动子片段。将ThMYB3和ThDof2分别构建成效应载体,各元件、突变元件、启动子片段及突变的启动子片段分别构建报告载体进行共表达验证。结果发现:效应载体ThMYB3和含MYB元件及含MYB元件的ThVHAc1启动子片段的报告载体,ThDof2和含DOF元件及含DOF元件的ThVHAc1启动子片段的报告载体瞬时共表达烟草叶片能观察到GUS染色,且GUS活性较高;而与相应突变元件及片段的共转化则观察不到烟草叶片的GUS染色,且GUS活性很低。说明只有非突变的元件和启动子片段才能与效应载体进行互作识别,激活GUS基因的表达,验证了酵母单杂交获得的上游调控基因的识别特异性。表明ThMYB3和ThDof2可能通过与相应启动子元件的结合调控ThVHAc1基因。