新城疫病毒V蛋白C端酵母双杂交诱饵质粒的构建与鉴定

为构建新城疫病毒(NDV)V蛋白C端酵母双杂交诱饵质粒,用RNA试剂盒提取NDV F48E9株的RNA,通过反转录试剂盒将抽提的RNA反转录,以反转录合成的eDNA为模板,通过PCR扩增,获得V蛋白C端基因(VCTD).通过酶切连接的方法将V蛋白C端基因克隆至pGBKT7载体上,命名为pGBKT7-VCTD.将pGBKT7-VCTD转化酵母Y2H Gold酵母感受态细胞,转化产物涂布营养缺陷型平板,观察平板上菌落生长情况,判定诱饵质粒有无自激活能力:同时挑取平板上的生长的菌落接种液体培养基培养,绘制生长曲线,判定pGBKT7-VCTD诱饵质粒有无毒性.酶切和测序结果表明,成功构建pGBKT7-VCTD诱饵质粒,且该诱饵质粒在酵母细胞中无毒性和自激活能力.本研究成功构建了pGBKT7-VCTD诱饵质粒,为筛选NDVV蛋白C端纳米抗体奠定基础.     

青海省非洲猪瘟流行现状与防控风险评估

2018年非洲猪瘟在我国出现大面积流行，给养猪业带来巨大的经济损失。自青海省传入非洲猪瘟以来，省内积极采取了一系列的防控措施，非洲猪瘟防控工作取得了积极成效。本文通过对青海省非洲猪瘟监测、现场调查，掌握本省非洲猪瘟感染及流行现状，系统评估非洲猪瘟发生风险，提出防控建议，为加快推进青海省非洲猪瘟无疫区建设提供科学依据。