来源于云斑天牛肠道细菌Pseudomonas sp. TN06的β-折叠桶植酸酶基因phyA06的克隆、表达和酶学性质研究

从云斑天牛肠道中筛选到一株产植酸酶活性较高的假单胞菌Pseudomonas sp.TN06。采用简并PCR和TAIL-PCR的方法获得一个新的β-折叠桶植酸酶基因(phyA06),开放阅读框全长1 902 bp,编码633个氨基酸和1个终止密码子,预测其前23个氨基酸为信号肽,含有两个β-折叠桶结构域。将phyA06基因在大肠杆菌中表达,重组蛋白经镍柱纯化后达到电泳纯。纯化后的重组酶最适pH为7.0,在pH 6.0~10.0的条件下具有很好的稳定性;最适温度为55℃,热稳定性良好。同时,该酶在低温下仍保持一定活力,甚至0℃仍有活性。该植酸酶具有应用于水产饲料行业的潜在价值。     

复合酶制剂对北京填鸭胴体性状、体脂沉积和营养物质表观消化率的影响

本试验旨在研究饲粮复合酶制剂水平对北京填鸭胴体性状、体脂沉积和营养物质表观消化率的影响。选取35日龄健康、大小均匀的雄性北京鸭96只,随机分成4个组,每个组6个重复,每个重复4只鸭。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮,试验1组、试验2组和试验3组饲粮分别在基础饲粮中添加100、200和300 mg/kg的复合酶制剂,试验鸭在35和36日龄饲粮填饲量分别为260和300 g,之后5 d各组饲粮填饲量均为400 g/d。试验期为7 d。结果表明:1)饲粮复合酶制剂水平对北京填鸭屠体重、屠体率、全净膛重、全净膛率、腿肌重、腿肌率、龙骨长和胸宽均无显著影响(P0.05),而对北京填鸭增重、胸肌重、胸肌率、胸肌厚、肌胃重和肌胃率有显著影响(P0.05)。试验2组和试验3组北京填鸭胸肌重和肌胃重分别比对照组显著提高了7.88%和7.60%(P0.05)。2)饲粮复合酶制剂水平对北京填鸭皮脂重、皮脂率、腹脂重、腹脂率、肝脏重、肝重率和肝脂率均无显著影响(P0.05)。试验1组皮脂厚与对照组相比显著提高了16.2%(P0.05)。3)饲粮复合酶制剂水平对北京填鸭干物质和总能表观消化率无显著影响(P0.05),而对北京填鸭粗蛋白质表观消化率有显著影响(P0.05)。由此可见,饲粮中添加复合酶制剂对北京填鸭体脂沉积无显著影响,但能够提高饲粮中粗蛋白质表观消化率,并促进胸肌和肌胃的生长发育。     

地衣芽孢杆菌对肉鸡生长性能、血清生化指标和肠道形态结构的影响

【目的】研究饲粮中添加不同水平地衣芽孢杆菌BCG对肉鸡生长性能和健康的影响,探究其对肉鸡的益生作用效果,为其在实际生产中的应用提供理论依据。【方法】采用单因素试验设计,选取180只体重相近（42.62 g±0.82 g）、健康状况良好的1日龄爱拔益加（AA）肉仔鸡,随机分为3个处理,每个处理6个重复,每个重复10只鸡。对照组（CT组）饲喂基础饲粮,地衣芽孢杆菌处理组（BCG1和BCG2组）分别在基础饲粮中添加1.0×10⁸和1.0×10⁹ CFU/kg地衣芽孢杆菌。试验鸡分1~21和22~42日龄2个阶段饲养,试验期为42 d。在21和42日龄时以重复为单位对各组肉鸡空腹称重并统计各阶段采食量,计算平均日增重（ADG）和平均日采食量（ADFI）;每个重复选取2只鸡采集血液,测定血常规、血清生化和免疫指标;42日龄时屠宰并分离肠道,观察小肠形态结构,测定肠绒毛高度（VH）和隐窝深度（CD）,计算绒毛高度与隐窝深度比值（VH/CD）。【结果】①与CT组相比,42日龄时,BCG2组肉鸡体重显著提高（P<0.05）;在22~42日龄,BCG2组肉鸡ADG和ADFI均显著提高（P<0.05）,其ADG显著高于BCG1组（P<0.05）;在1~42日龄,BCG1和BCG2组ADG和ADFI均显著提高（P<0.05）,且两组间无显著差异（P>0.05）。②21日龄时,与CT组相比,BCG2组肉鸡血清免疫球蛋白A （IgA）、IgM和IgG含量均显著提高（P<0.05）,内毒素（ET）活性显著降低（P<0.05）,且血清IgA和IgM含量均显著高于BCG1组（P<0.05）;在42日龄时,饲粮中添加BCG对血常规指标和IgA、IgM及IgG含量均无显著影响（P>0.05）。③42日龄时,BCG2组空肠VH显著高于CT组（P<0.05）,VH/CD显著高于CT和BCG1组（P<0.05）。【结论】地衣芽孢杆菌BCG能够提高肉鸡生长性能,增强肉鸡前期体液免疫和肠道屏障功能,改善肉鸡肠道形态结构,以添加1.0×10⁹ CFU/kg地衣芽孢杆菌的益生效果更佳。     

双功能木聚糖酶研究进展

植物细胞壁的降解需要多种酶的参与协作,能够同时具有木聚糖酶、纤维素酶或其他辅酶活性的双功能酶在降低生产成本、提高催化效率等方面都具有一定的优势。随着分子生物学技术的完善,很多新的双功能酶得到分离和鉴定。以双功能木聚糖酶为主,综述了近年来在双功能木聚糖酶结构、功能及作用机理等方面的研究进展,并对其在工业生产中的应用潜力进行了探讨。     

环空间隙与固井质量关系检测方法与试验评价研究

环空间隙的存在会影响固井质量的评价结果。因此,研究环空间隙对声幅测井的影响规律是非常有必要的。用质量分数为9%的膨润土浆涂抹套管外壁,膨润土浆厚度从薄到厚共10个等级,建立了含有不同尺寸的环空间隙套管井模型。根据声幅测井原理对其用水泥浆固井后进行模拟声幅测井试验,分析各模型套管波幅值与环空间隙厚度关系。实验室条件下测得的套管波幅值与现场声幅测井得到的相对幅度为线性关系,通过相对幅度计算套管波幅值,估算环空间隙的厚度,达到对某井段环空间隙厚度预测的目的。     

在烟草中表达的高比活性木聚糖酶XYNB

来源于橄榄绿链霉菌（Streptomyces olivaceoviridis）A1的木聚糖酶XYNB是一性质优良的高比活性木聚糖酶，已在饲料中作为添加剂应用。本研究利用携带双35S启动子和AMV增强子的表达载体，在烟草中高效表达了XYNB。转基因烟草及其子代植株基因组PCR检测证实xynB基因已整合到转基因烟草的基因组中, ELISA和SDS-PAGE以及Western blotting分析确证了xynB基因的高效表达, 木聚糖酶活性分析证实了表达酶具有正常的生物学活性。表达的XYNB约占叶片总蛋白含量的6%， 转基因烟草表现的最高酶活性约为170 IU/g鲜叶片(23 IU/mg总蛋白)。表达酶蛋白分子量为20.8 kD, 与理论分子量相当。转基因植株可以正常生长和繁殖，T₁子代植株表现了与亲代相似的酶活性，具有较好的遗传稳定性。     

发酵麸皮营养品质改善及其在动物饲料中的研究

麸皮富含多种营养物质,但同时含有粗纤维和植酸等,限制了其在饲料中的充分应用。微生物发酵技术可降低麸皮的抗营养因子含量,释放多种活性物质,从而大幅提高其在饲料中的应用价值。作者主要综述了有关麸皮的营养成分、发酵菌种、发酵工艺优化、发酵产物营养品质改善及其功能特点等的研究进展。麸皮中含粗蛋白质、粗脂肪、酚酸和膳食纤维等,这些营养物质以复杂的结构与形式存在麸皮中,限制了其在饲料中的有效利用。麸皮发酵常用的菌种主要有芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌、霉菌四大类,这些菌种分泌的多种酶系在麸皮的发酵降解中发挥着不同的作用。采用合理的优化策略获取最优发酵工艺可显著提高目标产物含量,其中响应面法是应用最多的方法。麸皮通过微生物发酵提高了其酚酸类物质、膳食纤维、可溶性总糖和蛋白质的含量,对动物提高抗氧化水平、增强机体免疫力、改善肠道环境及提高生产性能起到促进作用。     

芦竹不同高度、不同部位及不同青贮时间的营养价值比较

为评定芦竹（Arundo donax）作为牧草的营养价值，本试验对高0.5 m芦竹的茎、叶、全株及高1 m，1.2 m，1.4 m，1.6 m，1.8 m全株芦竹的营养成分分别进行测定，并收获高1.4 m的全株芦竹进行青贮实验。结果表明：芦竹叶的饲用价值优于茎；高度为1.2~1.4 m的全株芦竹具有较高的营养成分含量；青贮过程中，随着青贮天数的延长，青贮料pH值呈现明显下降的趋势，粗蛋白（Crude protein，CP）含量上升，干物质（Dry matter，DM）、粗灰分（Crude ash，Ash）、中性洗涤纤维（Neutral detergent fiber，NDF）和酸性洗涤纤维（Acid detergent fiber，ADF）含量下降，氨态氮（Ammonia nitrogen，NH₃-N）在青贮时间为30 d时含量最高，水溶性碳水化合物（Water soluble carbohydrate，WSC）含量逐渐下降，综合来看，1.4 m全株芦竹在青贮30 d时效果最佳。本研究结果表明芦竹是一种极具饲料开发潜力的牧草。     

饲粮铜水平对冬毛期水貂血清脂类代谢指标、血液参数、肠道消化酶活性及胆汁微量元素含量的影响

本试验旨在研究饲粮铜水平对冬毛期水貂血清脂类代谢指标、血液参数、肠道消化酶活性及胆汁微量元素含量的影响。试验选取(110±3)日龄的健康水貂140只(公母各占1/2),随机分为7个组,每组20个重复,每个重复1只水貂。各组水貂分别饲喂在基础饲粮(铜含量为7.68 mg/kg)中添加0(对照组)、6(Cu6组)、12(Cu12组)、24(Cu24组)、(Cu48组)、96(Cu96组)和192 mg/kg(Cu192组)铜的试验饲粮。预试期7 d,正试期90 d。结果表明:1)水貂血清总胆固醇(TC)含量随饲粮铜水平的增加呈线性(:P0.01,♀:P0.01)或二次曲线降低(:P0.05,♀:P0.01)。雄性水貂的血清TC和甘油三酯(TG)含量显著高于雌性水貂(P0.05)。2)饲粮铜水平对水貂血红蛋白含量和血细胞比容无显著影响(P0.05),雄性水貂血红蛋白含量和血细胞比容与雌性水貂无显著差异(P0.05)。3)雄性水貂空肠脂肪酶活性显著高于雌性水貂(P0.05),空肠、回肠胰蛋白酶活性和空肠淀粉酶活性极显著高于雌性水貂(P0.01)。4)水貂胆汁铜含量随饲粮铜水平的增加呈线性增加(P0.05),水貂胆汁锰和铁含量随饲粮铜水平的增加呈线性或二次曲线降低(P0.01)。由此可见,水貂饲粮添加铜对血清胆固醇、胆汁微量元素含量有重要的调节作用。     

无黏土相盐水储层钻井液体系研究

针对伊拉克Missan油田群储层段钻井作业中存在着卡钻、漏失、气侵、溢流、井壁失稳、井径扩大等复杂事故,为了减少作业事故的发生,提高储层保护的效果,室内通过外加剂的优选,建立了一套无黏土相盐水储层钻井液体系。该体系以改性生物聚合物为流型调节剂,可降解的抗温淀粉作为降滤失剂,并采用NaCl盐水基液和CaCO3复合加重的方式进行体系的密度调节。钻井液性能评价结果表明,该体系抗温可达140℃,滚动回收率达到了95.46%,同时体系还具有较好的抗侵污能力和储层保护效果。