臭氧和紫外线对冰箱消毒的研究

家用冰箱存在着不同程度的细菌污染，必需对冰箱进行定期或不定期的消毒。经用载体法和平皿法研究发现，用紫外线对冰箱进行消毒是可行的，其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草杆菌黑色变种芽胞有较强的杀灭作用，而且不会引起冰箱内温度升高。同时还可产生少量Ｑ，除去冰箱内异味，因此具有杀菌、抑菌、除臭保鲜的作用。     

人雌激素受体cDNA在酵母细胞中的表达

根据人全长雌激素受体cDNA序列,用RT—PCR方法使乳腺癌细胞MCF-7株扩增人雌激素受体基因(hER cDNA),通过pGEM—T／hER载体克隆到酵母表达载体中,并转化到酿酒酵母细胞中,用Western blot法和免疫组化法检测hER cDNA的表达。结果表明：hER cDNA在酵母细胞中成功表达,可用于建立环境雌激素的酵母细胞检测体系。     

快速筛选环境雌激素酵母细胞的试验研究

通过分子生物学技术将雌激素效应元件(ERE)基本序列插入β-半乳糖苷酶的Lac Z报告基因的上游．并将其置于重组酵母细胞雌激素受体(ER)的调控之下。结果表明：当环境雌激素作用于酵母细胞时,会使ER发生变构效应．与ERE结合使LacZ基因得以表达．其表达量与环境雌激素的污染程度具有剂量效应关系,通过检测β-半乳糖苷酶的活性,可反映环境雌激素的污染程度;与双酚A和苯甲酸雌二醇活性相比较,β-雌二醇活性最强,但双酚A活性明显高于苯甲酸雌二醇。     

基因重组酵母细胞检测养殖场污水中环境雌激素

用细胞生物学分析方法，对某养殖场污水处理厂水样中的类雌激素活性进行了分析，其中处理前水样6份，处理后水样9份。水样中的雌激素类化合物分别用大孔树脂富集，依次用丙酮、甲醇、乙醚洗脱，洗脱液经水浴蒸发挥干并用二甲亚砜定容。用重组人雌激素受体酵母细胞测其类雌激素活性，报告基因为编码β-半乳糖苷酶的Lac Z基因。结果发现，处理前水样雌激素活性较高，而处理后水样对β-半乳糖苷酶的诱导水平较低。经17β雌二醇（E2）标准曲线换算成雌二醇当量，发现处理前水样雌激素活性在0．0001至0．15nmol·L^-1 E2当量，而处理后水样雌激素活性明显下降，有17个水样雌激素活性低于检出限，这说明畜牧厂污水中的雌激素类化合物通过污水处理厂处理后可下降。     

臭氧和紫外线对冰箱消毒的研究

家用冰箱存在着不同程度的细菌污染，必需对冰箱进行定期或不定期的消毒，经用载体法和平皿法研究发现，用紫外线对冰箱进行消毒是可行的，其对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草杆菌黑色变种芽胞有较强的杀灭作用，而且不会引起冰箱内温度升高。同时还可产生少量Ｏ３，除去冰箱内异味，因此具有杀菌、抑菌、除臭保鲜的作用。     

雌激素调控的绿色荧光蛋白在酵母细胞中的表达

采用绿色荧光蛋白(GFP)作为报告基因,用酵母细胞构建环境雌激素(EEH)的评价体系,可敏感、快速、方便地筛选出EEH化合物。通过分子生物学技术,将GFP基因插入到pM P 206/ERE启动子CYC 1的下游,用GFP取代L ac Z基因,并转化于酵母细胞。DNA测序发现ERE-CYC 1-GFP框架正确。对转化子进行PCR鉴定,发现有雌激素受体基因(hER cDNA)和GFP基因特异条带,说明hER cDNA和GFP已重组于酵母细胞。荧光显微镜下发现大量的绿色荧光颗粒,表明GFP基因在酵母细胞中成功表达。酵母细胞经不同浓度雌二醇作用后,与GFP表达量有剂量效应关系。与其他酵母评价体系相比,以GFP为报告基因评价EEH不需要破坏细胞壁,也不需要底物,可在96孔板中完成,这为高通量筛选EEH化合物奠定了基础。     

环境雌激素调控的β-半乳糖苷酶酵母细胞的建立

为建立环境雌激素的酵母评价体系,将人工合成的雌激素效应元件插入pMP206质粒的上游,并将该质粒转入人雌激素受体基因重组酵母细胞,使LacZ基因置于雌激素的调控之下,以构建可用于评价环境雌激素的酵母细胞。结果表明：经DNA测序发现pMP206／ERE-LacZ报告质粒DNA框架正确。对转化子进行PCR鉴定,发现有雌激素受体基因和pMP206／ERE-LacZ报告质粒的特异性条带,说明雌激素受体基因和受雌激素调控的LacZ报告基因已重组于酵母细胞。从而证明以LacZ为报告基因的环境雌激素酵母评价细胞重组成功。     

养殖水体中非离子氨的简易测算

养殖水体中的无机态氮如溶解氮气(N_2—N)、氨(铵)态氮[NH_3(NH_4~-)—N]、硝酸态氮(NO_3~—N)、亚硝酸态氮(NO_2~—N)等是水中浮游植物生长繁殖所需的营养物质。众所周知,氨(NH_3)可以在一定条件下渗入养殖生物体内对其产生毒害作用。因此,少量的NH_3—N是饵料生物生长繁殖的营养物质,而当NH_3—N超过一定限度则对水生生物产生直接危害或使水质变坏而间接影响养殖动物。     

密码子优化的隔孢伏革菌植酸酶基因在毕赤酵母中高效表达

本研究目标是建立隔孢伏革菌植酸酶(6-phyA)分泌表达量高的毕赤酵母株,其作为饲料添加剂,可促进单胃类动物消化道对饲料磷的吸收,减少家畜粪便中磷对环境的污染,又可满足饲料加工的需要.按照毕赤酵母对遗传密码子的偏好性,利用重叠PCR方法人工合成6-phyA,将其插入到pPIC9K载体,构建成6-phyA整合型毕赤酵母表达载体,通过电转化转入GS115酵母细胞,并筛选出Mut+高拷贝转化子.通过SDS-PAGE分析,发现在该酵母细胞克隆株的发酵液中,见有一明显6-phyA条带,经测表达产物酶活性,发现均为对照酵母株的7.5倍以上,说明6-phyA在所构建的毕赤酵母株中成功、有效的表达.