MDR1基因shRNA真核表达质粒的构建

为了构建靶向MDR1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达重组质粒,试验针对MDR1基因序列选取3个干涉靶点,设计合成3条编码shRNA的DNA模板,分别定向克隆到真核表达质粒pSilencer 3.1-H1中构建重组质粒,再进行菌落PCR扩增和测序鉴定。结果表明:菌落PCR扩增得到与预期大小相同的阳性带,经DNA测序证实插入片段完全符合设计要求,序列无突变。说明成功构建了3个靶向MDR1基因的真核表达重组质粒pSilencer 3.1-H1 shRNA。     

单菌落PCR在发夹RNA重组克隆鉴定中的应用

以单菌落为模板进行PCR扩增,直接筛选插有发夹RNA(Small hairpin RNA,shRNA)干扰片段的重组阳性克隆。以圆滑单菌落为PCR模板,采用载体通用引物直接扩增目的片段,质粒测序验证PCR结果的正确性。结果表明,在筛选的6个菌落中均扩增出324 bp的目的条带,进一步进行测序分析鉴定,证实了菌落PCR阳性克隆含有发夹RNA干扰片段。单菌落PCR是一种简便、快速、可靠、有效筛选重组阳性克隆的方法。     

我国湿地公园景观设计小议

社会的发展某种程度上以各种生态系统环境的缩小、毁坏或是消失为代价,湿地生态系统的毁坏和消失应该引起人们的关注。本文针对湿地公园的景观设计进行详细系统的探究,以期能帮助湿地公园更顺利地完成建设。     

食物组分差异对树麻雀能量代谢及消化道形态结构的影响

为探寻食物组分差异对小型鸟类生理生化指标和消化道的影响,了解小型鸟类如何通过自我调节以应对不良环境条件变化的生存策略。将树麻雀Passer montanus按体质量随机分为对照组（饲喂小米Setaria italica）,稗草籽组（饲喂稗草Echinochloa crusgalli籽）,黄粉虫组（饲喂黄粉虫Tenebrio molitor）,8只·组-1,进行驯化,4周后通过烘干恒质量法、索氏抽提法、硫酸-蒽酮法、石蜡切片法等方法,测定其基础代谢率（basal metabolic rate,BMR）、体质量、器官鲜质量和干质量、体脂质量分数、糖原质量分数和消化道长度,消化道绒毛高度、宽度、黏膜层厚度及肠壁截面积等指标的变化。结果表明:饲喂4周后,3组树麻雀基础代谢率与第1周相比分别增加0.14,0.35和0.11 mL·g-1·h-1,稗草籽组与对照组和黄粉虫组差异显著（P < 0.05）,对照组与黄粉虫组差异不显著（P > 0.05）;体质量组间差异均极显著（P < 0.01）;黄粉虫组大肠、小肠、十二指肠、直肠、肌胃的鲜质量极显著高于稗草籽组和对照组（P < 0.01）,黄粉虫组十二指肠、肌胃的干质量极显著高于稗草籽组和对照组（P < 0.01）,对照组大肠、直肠的干质量极显著高于稗草籽组和黄粉虫组（P < 0.01）;稗草籽组和黄粉虫组的消化能、消化率与对照组间的差异极显著（P < 0.01）;3组树麻雀大肠、小肠、十二指肠长度组间差异均极显著（P < 0.01）,稗草籽组、黄粉虫组大肠绒毛高度与对照组间的差异均极显著（P < 0.01）,对照组、稗草籽组的小肠和十二指肠绒毛高度、黏膜层厚度与黄粉虫组间的差异均极显著（P < 0.01）。表明食物组分差异是影响树麻雀能量代谢和消化道形态改变的重要环境因子之一。