大鼠快肌卫星细胞移植在肌肉钝挫伤模型中的修复作用

将36只成年SD(Sprague-Dawley)大鼠随机分为2组,试验组和对照组各18只,建立骨骼肌钝挫伤模型。采用组织块法和差速贴壁法培养与纯化快肌卫星细胞,应用免疫荧光细胞化学法进行鉴定,荧光标记后进行移植,术后5、10、15 d检测肌电生理、肌湿重、肌纤维横截面积,研究移植细胞的修复作用。免疫荧光细胞化学鉴定结果显示,快肌卫星细胞的结蛋白(desmin)、肌动蛋白(sarcomeric actin)、肌球蛋白(yosin)都呈阳性表达,成功建立了骨骼肌钝挫伤模型,且快肌卫星细胞移植处可观察到带荧光的快肌细胞核。肌电图显示,相同取材时间段试验组较对照组的波幅逐渐增高、波宽逐渐延长,整体趋于正常水平;HE染色结果显示,试验组较对照组的骨骼肌细胞排列更紧密,更具有方向性,肌纤维横截面积恢复更快;还观察到损伤大鼠随修复时间的延长逐渐恢复。方差统计结果显示,试验组与对照组的肌电生理、肌湿重恢复率、横截面积灰度值差异极显著(P0.01),三者在不同修复时间之间同样差异极显著(P0.01)。表明体外培养的快肌卫星细胞的移植对因钝挫伤而损伤的骨骼肌有明显的修复作用。     

家兔肌酸激酶的分离纯化和测定

[目的]提取分离纯化部分可溶解的肌酸激酶,应用于检测各种病变包括肌肉萎缩和心肌梗塞发生时的血清肌酸激酶水平改变。[方法]先用液氮处理家兔内侧腓肠肌和心肌,经过初步分离纯化得到肌酸激酶的粗提液,然后利用DEAE-52阴离子交换层析进一步纯化酶液,收集其中的活性峰,并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其纯度。[结果]证明肌酸激酶是一个二聚体酶,带有两个相同的近似43kDa的亚基,同时显示家兔心肌和骨骼肌的肌酸激酶与其他物种的肌酸激酶有很大的同族性。[结论]新鲜心肌肌酸激酶的活性与贮存时间较长的心肌肌酸激酶的活性有很大差异。肌酸激酶同工酶具有重要的生理功能和临床医学应用价值。     

骨骼肌转导的基因DNA药物功能研究进展

基因DNA药物就是将裸露的质粒(naked plasmid)DNA作为一种药物导入机体内，并在细胞中调控蛋白质合成，分泌出细胞，作用于靶器官而达到预防和治疗的一种新型药物。实施基因DNA药物必须具备以下几个条件，即第一是目的性基因，例如病毒抗原基因、蛋白类激素、生长因子等；第二是基因转移系统的安全简便、高效、可控性；第二是有特定     

大学本科生学习创新能力培养和优良学风建设

学习创新能力,是创新精神和实践能力的一个重要组成部分。优良学风建设一直是高校的重要工作。针对高校学风存在的主要问题,阐述了学习创新能力的内涵及其重要意义,培养大学本科生学习创新能力的方法与途径,以及通过对大学本科生学习创新能力的培养有助于促进优良学风建设的形成。     

睫状神经营养因子的研究进展

睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）能够促进感觉、运动和交感神经元存活,在神经系统发育、分化和损伤修复过程中发挥重要作用。ＣＮＴＦ与白血病抑制因子、白细胞介素－６有相似的空间结构,它们的受体复合物由３个亚基组成,即作为结合蛋白的α－亚基,以及信号传递体的ｇｐ１３０和ＬＩＦＲβ,ＣＮＴＦ的神经营养作用研究为临床治疗神经系统疾病带来了新的希望。     

骨骼肌纤维烟酰胺腺嘌呤二核苷酸四唑氧化还原酶组化染色的检测

本文应用烟酰胺腺嘌呤二核苷酸四唑氧化还原酶（NADH-TR）组化染色，将大鼠与家兔小腿胫前肌与腓肠肌的肌纤维型分成染色最深的快缩氧化FO型、染色较深的慢缩氧化SO型、染色浅的快缩氧化酵解FOG型及染色最浅的快缩酵解FG型纤维。这与定量分析结果相吻合。并对低温液氮保存骨骼肌标本进行观察，发现小块肌组织＋生理盐水和小块肌组织＋5％二甲基亚砜（DMSO）冷冻保护剂的玻璃化冻存一起浸入液氮制成切片，都未见冰晶形成；而在用5％二甲基亚砜玻璃化冻存大块肌组织切片见有少量冰晶出现；未使用5％二甲基亚砜玻璃化冻存大块肌组织切片见有大量冰晶出现。提示小块标本超快速浸入液氮内能减少冰晶形成，保证酶组化染色切片的质量。并进一步对烟酰胺腺嘌呤二核苷酸四唑氧化还原酶组化作用机理与孵育液的科学配制进行了探讨。     

大鼠胫前肌亚体内基因表达与酶组化染色相关性研究

[目的]研究大鼠胫前肌亚体内不同肌纤维型的分布情况,并探讨RT-PCR方法与酶组织化学染色在定量研究方面的相关性。[方法]应用RT-PCR技术对大鼠胫前肌亚体内4种肌纤维型的表达进行研究,同时与琥珀酸脱氢酶(SDH)组织化学染色进行比较。[结果]2种方法的结果均表明4种肌纤维在胫前肌的前后亚体内表达量存在较明显的差异。前后亚体内肌球蛋白重链异构体相对含量均为Ⅱb>Ⅱa>Ⅰ>Ⅱx,而其中前亚体又以Ⅱb和Ⅱa型相对含量多于后亚体Ⅱb和Ⅱa型;前亚体Ⅰ与Ⅱx型相对含量少于后亚体Ⅰ与Ⅱx型。[结论]RT-PCR方法与骨骼肌肌纤维琥珀酸脱氢酶组织化学染色方法在定性定量研究方面具有相对的一致性。     

家兔骨骼肌肌球蛋白重链构成的电泳

[目的]探究家兔骨骼肌肌球蛋白重链构成的电泳的作用机制。[方法]应用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测成年家兔后肢肌胫前肌、腓肠肌和比目鱼肌的肌球蛋白重链异构体(MyHCs),采用大体解剖法依次取出家兔的每块骨骼肌,分别与样品缓冲液一起研磨成肌细胞匀浆,经高速冷冻离心后取出上清液,按照不连续SDS-聚丙烯酰胺小孔梯度凝胶电泳操作程序依次试验。[结论]该研究进一步证实3种快纤维型在成年啮齿动物肢体肌肉中的作用,但同源结构是否有这些肌纤维值得继续深入探索。     

β-actin在小鼠外侧腓肠肌3个亚体中的表达差异

研究成年小鼠后肢外侧腓肠肌的3个肌亚体即内侧亚体、外侧浅亚体、外侧深亚体β-肌动蛋白(β-actin)基因中半定量RT-PCR的表达差异.采用RT-PCR方法分别抽提各个肌亚体的总RNA,逆转录成cDNA,通过PCR扩增,以甘油醛-3-磷酸脱氢酶作为内参,用半定量RT-PCR方法测定成年小鼠β-肌动蛋白基因在3个肌亚体的表达差异.研究结果,β-肌动蛋白主要在外侧腓肠肌内侧亚体表达(0.63),外侧浅亚体较少(0.42),外侧深亚体最少(0.10).     

趾长伸肌肌动球蛋白腺苷三磷酸酶与氧化还原酶染色的相关性分析

哺乳动物骨骼肌的肌纤维可根据肌动球蛋白腺苷三磷酸酶(ATP酶)染色,分成Ⅰ型为红肌纤维又称慢缩纤维,ⅡA型为浅红肌纤维又称中间快缩纤维,ⅡB型为白肌纤维又称快缩纤维,分别适应不同的生理功能[1]。Peter[2]依据肌纤维的代谢特征将其分别归属于琥珀酸脱氢酶反应区分的慢缩氧化型(SO型)、快缩氧化糖酵解型(FOG型)和快缩糖酵解型(FG型)。烟酰胺腺嘌呤二核苷酸四唑氧化还原酶染色技术也是国外学者用于区分骨骼肌纤维结构的重要方法之一[3],该方法简便易行,能够依据骨骼肌纤维的形态特征、生理生化、功能代谢以及组织化学反应,也可将其分…