几种常见方法提取番荔枝基因组DNA的比较

以番荔枝幼嫩叶片为材料,分别采用改良高盐低pH值法、改良的CTAB法、SDS法三种方法提取总DNA,通过紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳法对三种提取方法进行综合比较。结果显示改良的CTAB法所得的DNA纯度和得率较高,SDS法最差。     

下河蜜柚RAPD反应体系的建立

利用改良的CTAB方法从柚叶片中提取高质量的DNA。在参考一般RAPD反应程序的基础上,经过反复试验,确定适合柚PCR扩增程序为:模板DNA15ng,随机引物3.3ng/ul,10*PCR buffer 1ul,dNTP 0.5ul,TaqDNA聚合酶0.25ul(1U),总体积10ul。95℃预热2min,94℃变性30s,35.1℃退火45s,72℃延伸45s,30个循环后72℃延伸8min。     

龙柚双引物RAPD分析方法初探

实验选取龙柚3个芽变系基因组DNA作为模板,在100个10bp单引物的基础上,筛选出8个能扩增出稳定、清晰的条带的RAPD引物,用于RAPD双引物的扩增,结果比单引物扩增反应产生出更多更清晰的条带,为龙柚遗传多样性等后续研究奠定基础。     

柚基因组DNA提取方法的研究

以下河蜜柚的幼嫩叶片为材料,采用CTAB法、SDS法和SDS-CTAB法3种不同的DNA提取方法提取其基因组DNA,用紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量。分析结果表明,无论从得率还是DNA质量上看, SDS-CTAB法明显优于其它两种方法。     

台湾麻豆文旦RAPD反应条件的优化

在参考一般RAPD反应程序的基础上,经过反复试验,确定适合台湾麻豆文旦基因组DNA的RAPD扩增程序为(总体积10 ul):模板DNA5 ng,随机引物33 ng,dNTP 1.5 ul,10×PCR buffer 1 ul,MgCl22.0 mmol/L, Taq酶1U.95℃预热2 min,94℃变性30 s,38.7℃退火45 s,72℃延伸45 s,30个cycle后72℃延伸8 min     

模拟酸雨对‘琯溪蜜柚’叶片抗氧化酶活性和光合作用的影响

【目的】探讨酸雨胁迫对‘琯溪蜜柚’叶片抗氧化酶活性和光合作用的影响。【方法】以p H值5.6为对照,采用p H 2.5和p H 4.5模拟酸雨对1 a(年)生‘琯溪蜜柚’进行胁迫,研究酸雨对蜜柚叶片氧化伤害、抗氧化酶系统、气体交换参数和叶片结构的影响。【结果】p H 2.5和p H 4.5模拟酸雨胁迫处理3个月,没有造成叶片可见伤害,叶片上表皮细胞排列整齐紧密,但p H 2.5模拟酸雨胁迫处理显著降低了叶肉中栅栏组织发育;p H 2.5模拟酸雨胁迫处理1 d后,叶片SOD和CAT活性的升高减少O2-和H2O2的积累,降低过氧化伤害,p H 2.5模拟酸雨胁迫处理3 d之后引起叶片膜脂过氧化;p H 4.5模拟酸雨胁迫处理6 d后虽然3种抗氧化系统酶活性显著高于对照,但不足以清除酸雨胁迫引起的活性氧,引起膜脂过氧化;模拟酸雨胁迫处理初期,2种处理均显著抑制光合速率,酸雨处理90 d后,p H 2.5酸雨显著抑制‘琯溪蜜柚’叶片光合速率,推测是由于氧化胁迫、栅栏组织发育等非气孔调节因素引起的,p H 4.5酸雨处理下叶片具有较强自我修复能力,其光合速率没有受到显著抑制。【结论】‘琯溪蜜柚’具有较强的酸雨抗性,p H 4.5中度酸雨胁迫对植株生长影响不显著,p H 2.5重度酸雨胁迫显著抑制叶片光合作用。     

改良CTAB法提取柚总DNA及叶片保存方法的研究

采用改良的CTAB方法提取龙柚新鲜叶片的总DNA，在提取过程中，采用不同的处理液进行预处理，提得的DNA产量高，纯度好，降解少，可用于PCR扩增，能满足相关的分子生物学研究要求。同时，尝试用饱和NaCl-CTAB保存液来保存新鲜叶片，并对分别保存7天、14天、21天、28天的叶片进行总DNA提取，实验结果表明：保存7天的叶片总DNA提取效果最佳。     

平和典型蜜柚果园土壤铜分布及与果树铜累积关系

对福建省漳州市平和县琯溪蜜柚13个典型果园土壤剖面样品铜含量进行研究,结果表明平和蜜柚典型果园土壤上层铜全量空间变异性较强,变异程度高于中层和下层铜全量;土壤上层铜全量平均值高于土壤中层和下层,分别为35.28、15.60和13.85mg·kg~(-1);土壤上层铜全量平均值高于福建省土壤平均背景值(21.6mg·kg~(-1)),23.1%样地果园土壤铜全量超过《土壤环境质量标准》二级标准(50mg·kg~(-1))。大多果园土壤剖面铜赋存形态主要是残渣态,而在含量较高的样地,上层土壤残渣态铜比例明显低于中层和下层土壤。土壤铜全量对铜形态分布影响最大,全量越高,活性最高的弱酸可提取态越高。土壤3个剖面铜全量与叶片和枝条铜含量均显著正相关,各剖面土壤弱酸可提取态铜含量与叶片和枝条铜含量间亦呈现显著正相关关系。由此表明平和蜜柚果园土壤铜上层出现富集,部分果园铜污染严重,应引起足够重视。