产β-葡萄糖醛酸苷酶菌株胃肠道耐受性与酶学特性研究

为发酵转化黄芩苷生产活性产物黄芩素、研发益生菌和中草药黄芩协同联用绿色混合型饲料添加剂产品奠定基础,试验采用酶解底物显色法和薄层层析法,从健康鸡肠道内容物中分离筛选出一株产β-葡萄糖醛酸苷酶的JY24菌株,经菌落形态、生理生化及16SrDNA序列分析,鉴定为枯草芽孢杆菌。结果表明:(1)JY24菌株对人工胃液、人工肠液均有一定耐受能力,胆盐最高耐受浓度为0.3%～0.5%;(2)JY24菌株所产β-葡萄糖醛酸苷酶的最适温度为35℃,40℃、50℃和60℃处理1 h相对酶活分别为72.96%、31.63%和0;(3)最适pH 6.5,在pH 6.0和7.0环境下,酶活相对稳定,处理1 h相对酶活分别为73.54%和73.63%;(4)浓度为2.5 mmol/L的Ca~(2+)、Fe~(3+)和Zn~(2+)可使酶活升高11.48%～21.05%,对该酶有激活作用,Fe~(2+)和Cu~(2+)可使酶活性下降15.84%～18.28%,对酶活有抑制作用,K~+、Na~+、Mg~(2+)和Mn~(2+)对酶活无明显影响。     

L-精氨酸对冬季低温下产蛋初期攸县麻鸭产蛋、 血液指标和肝脏抗氧化功能的影响

为了考察冬季低温下不同L-精氨酸添加水平对产蛋初期攸县麻鸭产蛋、血液指标和肝脏抗氧化功能的影响。选择90日龄体重相近的健康攸县麻鸭240只,随机分为4个处理组,每个处理设6个重复,每个重复10只,饲养温度为冬季低温,分别饲喂L-精氨酸添加量为0.0%(CK)、0.2%(Ⅰ组)、0.5%(Ⅱ组)和0.8%(Ⅲ组)的基础饲粮,试验期42 d。试验结果表明,Ⅱ组显著提高了第2周、第3周、第4周和全期产蛋率(P0.05);各组之间肝脏、肾脏重量均无显著差异(P0.05);相对于对照组,Ⅰ组显著降低血清中尿酸含量(P0.05),Ⅱ组球蛋白含量显著降低(P0.05),Ⅲ组显著降低血清中直接胆红素的浓度(P0.05);与对照组与相比,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组肝脏中CAT、SOD含量均显著升高(P0.05),MDA含量则显著降低(P0.05)。综合分析,冬季低温下添加0.568%~0.593%的L-精氨酸有利于提高产蛋初期攸县麻鸭产蛋率,提高肝脏组织的抗氧化能力,改善肝脏功能。     

长株潭地区集约化猪场保育舍内好氧微生物的监测

为了研究猪舍空气中微生物的组成,采用自然沉降法在3个集约化保育舍空气中采集好氧微生物样品,利用16S rRNA序列分析及形态观察确定微生物的分类,监测保育舍内好氧微生物的含量和种类,评估保育舍内的空气环境质量以及推断致病微生物可能造成的危害。结果表明:猪场保育舍空气中需氧微生物含量较高,为0.22万～2.70万CFU/m~3,不同保育舍内空气样品中的好氧细菌菌落结构差异较大,球菌和杆菌为保育舍优势菌群,部分保育舍含有较高浓度(占34%)的人畜共患条件性致病菌绿色气球菌,对饲养者身体健康和畜禽生产存在潜在威胁,需引起高度重视。     

饲用枯草芽孢杆菌JY24发酵条件的优化

为JY24菌株的中试生产和产品研发提供理论依据,采用单因素试验与正交试验相结合的方法筛选JY24菌株摇瓶培养条件和培养基成分,并在此基础上优化培养基成分。结果表明:JY24菌株发酵条件为转速240r/min,温度35℃,初始pH 7.0,装液量10%,接种量3%,发酵时间36h;最佳培养基组成为蔗糖12.0g/L+酵母膏12.0g/L+磷酸二氢钾1.25g/L+氯化钙0.22g/L+硫酸镁0.30g/L。在此条件下,发酵液活菌数达1.73×10~(10)CFU/mL。     

娄底地区鱼类肠道微生物与酶活性的初步研究

研究采用微生物传统选择培养法和比色法对娄底地区的草鱼、鲫鱼、鲢鱼和鳙鱼4种鱼肠道的微生物数量和酶活性进行测定,以期为娄底地区鱼类疾病的防治、微生物添加剂的使用提供资料。结果显示:草鱼肠道中真菌、肠球菌和大肠杆菌数量最多,鲫鱼肠道内的优势菌群为乳酸菌,而鲢鱼和鳙鱼肠道内不存在优势菌群;草鱼肠道内纤维素酶和淀粉酶活性较高,鲫鱼肠道内蛋白酶和脂肪酶活性较高,鲢鱼和鳙鱼肠道酶活性表现中规中矩,纤维素酶和淀粉酶活性低于草鱼,蛋白酶和脂肪酶活性低于鲫鱼。分析认为,在健康状态下,鱼类肠道微生物数量和酶活性与其食性存在一定的对应关系。     

黄芩素对22~63日龄湘黄肉鸡生长性能、免疫功能、抗氧化能力、血脂状态及肉品质的影响

本试验旨在研究黄芩素对22~63日龄湘黄肉鸡生长性能、免疫功能、抗氧化能力、血脂状态及肉品质的影响。选择200只初始体重相近的健康22日龄湘黄肉鸡,随机分为5个组,每组5个重复,每个重复8只鸡(公母各占1/2)。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮基础上分别添加0.10、0.20、0.30和0.40 g/kg黄芩素。试验期42 d。结果表明:1)与对照组相比,22~42日龄,0.20 g/kg黄芩素组平均日采食量(ADFI)显著降低(P<0.05),0.30 g/kg黄芩素组ADFI显著增加(P<0.05),各试验组平均日增重(ADG)、料重比(F/G)和死亡率均无显著差异(P>0.05);43~63日龄,各试验组ADFI均显著降低(P<0.05),而ADG、F/G和死亡率均无显著差异(P>0.05);22~63日龄,0.20 g/kg黄芩素组ADFI和F/G均显著降低(P<0.05),0.40 g/kg黄芩素组ADG显著降低(P<0.05),各试验组死亡率均无显著差异(P>0.05)。2)与对照组相比,0.20 g/kg黄芩素组血清免疫球蛋白A(IgA)含量显著增加(P<0.05),0.30 g/kg黄芩素组血清IgA和免疫球蛋白G(IgG)含量均显著增加(P<0.05);各试验组血清白细胞介素-2(IL-2)含量均显著增加(P<0.05),而血清免疫球蛋白M(IgM)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均无显著差异(P>0.05)。3)与对照组相比,0.10和0.20 g/kg黄芩素组血清总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性均显著增加(P<0.05),各试验组血清总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢(H 2O 2)和丙二醛(MDA)含量均无显著差异(P>0.05);0.20 g/kg黄芩素组肝脏T-AOC和T-SOD活性均显著增加(P<0.05),0.10 g/kg黄芩素组肝脏T-AOC显著增加(P<0.05),各试验组肝脏H 2O 2含量均显著降低(P<0.05),而肝脏GSH-Px活性、GSH和MDA含量均无显著差异(P>0.05)。4)与对照组相比,0.30 g/kg黄芩素组血清总胆固醇(TC)含量显著降低(P<0.05);各试验组血清甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量均无显著差异(P>0.05)。5)与对照组相比,0.40 g/kg黄芩素组胸肌屠宰后24 h黄度值显著降低(P<0.05);各试验组胸肌屠宰后24 h亮度值均显著降低(P<0.05),而屠宰后45 min pH与亮度、红度、黄度值以及屠宰后24 h pH、红度值、剪切力和滴水损失率均无显著差异(P>0.05)。由此可见,黄芩素可改善22~63日龄湘黄肉鸡的生长性能、免疫功能、抗氧化能力、血脂状态和肉品质,综合考虑,饲粮中黄芩素的适宜添加量为0.20~0.30 g/kg。     

pCold~(TM)TF载体原核表达FocA可溶性蛋白的研究

为了较好地表达和纯化尿道致病性大肠杆菌F1C菌毛主要亚单位Foc A蛋白,研究以p Cold ~(TM) TF为载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中原核表达F1C菌毛主要亚单位Foc A,验证表达的蛋白是否为可溶性蛋白,并对foc A基因表达的最佳条件进行了优化。结果表明:目的基因foc A在p Cold表达系统中于15℃下诱导24 h蛋白表达量最高,IPTG浓度在0.1~1.0 mmol/L范围内都能表达目的基因,且不同浓度对目的蛋白表达量无明显差异;表达出来的Foc A蛋白为可溶性蛋白。     

凝结芽孢杆菌液体分批发酵的动力学方程构建

采用20 L发酵罐平台对饲用凝结芽孢杆菌W-02菌株进行分批发酵，实时监测发酵液的溶氧含量、吸光度、pH值、活菌数和可溶性总糖含量，在此基础上采用Logistic方程和Luedeking-Piret方程分别拟合了菌体生长和可溶性总糖消耗的动力学方程，获得了该菌株分批发酵的动力学方程模型和参数。结果表明：菌体生长模型为■;可溶性总糖消耗模型为■;2个模型计算的模拟值与验证试验的试验值拟合度均较好，平均相对误差均小于10%。该结果为凝结芽孢杆菌实际生产中发酵过程自动化监测和实时控制提供了依据。