大丽轮枝菌微菌核发育相关基因VdPKS的功能分析

为阐明与大丽轮枝菌微菌核发育相关的聚酮合成酶基因VdPKS的功能,在前期获得VdPKS被单拷贝T-DNA插入的微菌核发育异常突变体2H3的基础上,通过基因敲除和回补技术,经分子鉴定和表型验证,获得了2株VdPKS基因敲除突变体和3株回补突变体。研究发现野生型菌株孢子在接种到PDA培养基上培养的第6 d开始积累黑色素,而此时VdPKS基因的表达量也最高。敲除突变体虽然没有形成黑色素,却也观察到微菌核的初始结构,表明VdPKS基因不是微菌核形成的必须基因,仅参与微菌核发育后期黑色素的形成。致病力测定结果表明VdPKS基因与菌株的致病力无关。杀菌剂嘧菌酯和咯菌腈对敲除突变体菌丝生长的抑制率相对于野生型菌株和回补突变体有显著提高,表明VdPKS基因与大丽轮枝菌的抗逆性相关。     

烟酸微生物转化产物的高效液相色谱分析方法

研究了烟酸微生物转化产物的反相高效液相色谱(RP-HPLC)分析方法。采用ZORBAX ODS(5μm)反相柱，甲醇：水(pH值为3.0)=50：50(V／V)为流动相，流速为1ml／min、检测波长为260nm，此条件下，烟酸、6-羟基烟酸得到最优分离。此法分析周期短，重现性好，操作简便，适于批量微生物样品的分析及对色谱仪器的保护。