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为进一步了解乙型脑炎病毒(JEV)减毒疫苗株基因组变异和分子遗传特性,本研究根据已发表的JEV基因组序列,设计合成了8对引物,应用RT-PCR对SA14-14-2-B3株基因组进行了克隆和序列测定,获得了该株病毒的全基因组序列(10977nt)并推导出其编码的氨基酸序列(3432aa)。序列分析表明:SA14-14-2-B3株与疫苗株SA14-14-2和SA(A)及野毒株SA14的核苷酸和氨基酸相似性较高,分别为99.8%、99.9%、99.4%和99.7%、99.8%、99.1%,与猪源分离株HEN0701和KV1899的核苷酸与氨基酸相似性较低,分别为88.5%、88.5%和97.6%、96.6%,比较显示在SA14-14-2-B3株基因组第10700nt处有一碱基"G"的插入。以全基因组为基础,对SA14-14-2-B3株进行遗传进化关系分析,结果表明:SA14-14-2-B3株与SA14源病毒株SA14、SA14-14-2、SA(A)、SA(V)及分离株Beijing-1、p3、WHe和HW的遗传关系较近,与XJP613株和HEN0701株的遗传关系较远。以E基因为基础,对SA14-14-2-B3株进行遗传进化关系分析,结果表明SA14-14-2-B3株属于JEV基因Ⅲ型。 相似文献
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通过对GenBank中注册的CSFV序列进行比对分析,针对CSFV NPro/C基因中的保守区域,设计合成了一套RT-LAMP引物,应用含有Npro/C基因的阳性质粒株对RT-LAMP引物进行验证.在成功扩增出特异片段的基础上,用CSFV RNA优化RT-LAMP反应体系和条件,建立了CSFV的可视化RT-LAMP快速... 相似文献
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猪瘟病毒感染对猪外周血T淋巴细胞亚群及TNF-α和IFN-γ的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
为探讨猪瘟病毒(CSFV)弱毒株T株和野毒株G株感染对猪外周血T淋巴细胞亚群、TNF-α和IFN-γ的影响,本研究应用流式细胞术和ELISA等方法检测CSFV感染猪与未感染猪的白细胞凋亡、CD4+与CD8+T淋巴细胞亚群数量的动态变化以及TNF-α和IFN-γ的动态变化。结果表明,猪感染CSFV T株和G株第4 d和第7 d后CD4+T淋巴细胞比例分别为28.6%、26%和26%、20%,未感染前分别为33.4%和36.8%。猪感染CSFV T株和G株第4 d、第7 d后CD8+T淋巴细胞比例分别为41%、32%和38%、25%,感染前分别为43.8%和48.8%。外周血白细胞凋亡的检测结果显示,猪感染CSFV T株和G株第7 d后,白细胞凋亡比例分别为8.35%和9.89%,未感染的猪为1.63%。ELISA检测结果表明,猪感染CSFV T株和G株第7 d后,TNF-α的产生量分别为553.4 pg/mL和594.2 pg/mL;IFN-γ的产生量分别为8.2 pg/mL和9.8 pg/mL,未感染猪分别为498 pg/mL、12.5 pg/mL。以上结果提示,CSFV感染会引起机体免疫相关细胞及免疫分子发... 相似文献
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为探究日粮中添加百里香对滩羊肌肉中肌苷酸和肌苷含量的影响,本试验分别在全混合日粮中添加5%百里香组、10%百里香组和对照组(不加百里香)对宁夏滩羊进行饲养,屠宰后利用高效液相色谱分析法,对滩羊背最长肌肉中肌苷酸和肌苷进行了分析。结果表明:日粮中添加百里香可从不同程度上提高肌肉中肌苷酸的含量,影响效果与添加百里香的剂量有关;5%百里香组极显著(P0.01)提高了肌苷酸的含量,且可在一定时间范围内延缓肌苷酸降解生成肌苷,提高了IMP/(IMP+I)新鲜度值,提高羊肉鲜味物质的含量,进而提高羊肉的风味;10%百里香组对肌苷酸和肌苷的影响不大,甚至略有下降的趋势。 相似文献
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对Ⅰ型鸭肝炎病毒3D基因克隆及其原核表达的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
根据Genbank中的Ⅰ型鸭肝炎病毒全基因序列,应用Primer5.0分析软件设计合成了扩增Ⅰ型鸭肝炎病毒3D基因的一对引物,用该特异性表达引物体外克隆1型鸭病毒性肝炎病毒3D基因。构建重组表达质粒pET32a-3D,将此重组质粒转化到受体菌RossetaⅡ(DE3)中进行诱导表达。SDS—PAGE和蛋白质印迹分析表明,诱导4h后表达量达到最高,表达产物大小约为70Ku,表达蛋白能与Ⅰ型鸭病毒性肝炎阳性血清产生特异性免疫反应。 相似文献
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为了研究苜蓿青贮对奶牛氮排泄特征的影响,以优化饲料资源、减少氮排泄对环境的污染,试验采用单因素完全随机设计方法将条件相近的90头奶牛分为2组,苜蓿干草组为对照组、苜蓿青贮组为试验组,研究苜蓿青贮对奶牛氮排泄特征的影响。结果表明:苜蓿干草组奶牛日均粪氮排出量为0.112 kg/d,氮表观代谢率为95.95%;苜蓿青贮组奶牛日均粪氮排出量为0.085 kg/d,氮表观代谢率为97.38%。试验全期苜蓿青贮组奶牛氮表观代谢率显著高于苜蓿干草组(P0.05),高1.49%。说明苜蓿青贮既提高了奶牛氮表观代谢率,又减少了粪氮的排泄量,降低了粪氮对环境的污染。 相似文献
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针对PRRSV ORF5~ORF7设计3对特异性引物,以PRRSV GD-XH株和GD08-1株为模板进行RT-PCR扩增,并将扩增产物克隆到真核表达载体pEGFP-N1中,获得重组质粒pEGFP-N1-(ORF5~ORF7),然后将重组表达质粒转染Marc-145细胞.通过荧光显微镜观察显示,重组质粒pEGFP-N1-(ORF5~ORF7)和载体pEGFP-N1均有绿色荧光出现.结果表明:成功构建了表达PRRSV GD-XH株和PRRSV GD08-1株的GP5、M、N蛋白的真核表达质粒pEGFP-N1-GD-XH-GP、pEGFP-N1-GD-XH-M、pEGFP-N1-GD-XH-N、pEGFP-N1-GD08-1-GP5、pEGFP-N1-GD08-1-M、pEGFP-N1-GD08-1-N. 相似文献