大花君子兰ISSR-PCR反应体系的建立与优化

以大花君子兰为材料研究了PCR反应体系的主要成分及退火温度对君子兰ISSR扩增结果的影响,并对影响PCR反应体系的主要成分及退火温度进行筛选和优化,确立了适合君子兰ISSR-PCR分析的最佳反应体系:在20μL的反应体系中,Mg2+为2.0 mmol/L,模板DNA用量为50 ng/μL,Taq酶0.4 U,dNTPs浓度为0.15 mmol/L,引物浓度为0.4 mmol/L。筛选出了13个适宜君子兰遗传分析的ISSR引物,确定最适宜退火温度为52~56℃。     

君子兰杂交后代过氧化物酶同工酶酶谱多样性分析

采用聚丙烯酰胺不连续系统垂直板电泳方法,对杂交亲本及其10个子代的君子兰叶片过氧化物酶同工酶谱进行了分析.结果表明:试材间的酶谱有一定的差异,利用系统聚类分析法,将12个试材分成4个组.其中有7个子代与父本聚为1组,母本自己聚为1组,其它3个子代分别聚为2组.