枯草芽孢杆菌发酵的优化

抗生素作为饲料添加剂,在畜禽防疫方面虽起到积极的作用,但近10多年来由于科学水平的提高,国外饲料业和饲养业中很多人反对用抗菌素做饲料添加,这是因为抗菌素在预防性应用时,其化学残留污染肉、蛋、奶;另外,抗菌素会抑制和杀死肠道内的有益菌群,造成肠道正常菌群生态失调,导致疫病的发生,出现二重感染,有害于人畜健康.鉴于此,国内外专家学者对研究开发微生态制剂用于畜禽养殖日趋关注,从而也促进了这一产业的迅猛发展,国内用于制作微生态添加剂的主要是一些芽孢菌类和乳酸菌类,但长期以来生产成本一直居高不下,对企业的发展造成了障碍,本文阐述了如何通过对枯草芽孢菌发酵过程进行优化,来降低生产成本.     

枯草芽孢杆菌发酵过程的优化

抗生素作为饲料添加剂,在畜禽防疫方面虽起到积极的作用,但近10多年来由于科学水平的提高,国外饲料业和饲养业中很多人反对用抗菌素做饲料添加,这是因为抗菌素在预防性应用时,其化学残留污染肉、蛋、奶;另外,抗菌素会抑制和杀死肠道内的有益菌群,造成肠道正常菌群生态失调,导致     

真菌多糖免疫调节作用研究进展

真菌多糖是从真菌子实体、菌丝体或发酵液中分离出的一类由醛糖或酮糖通过糖苷键连接而成的高分子聚合物,具有免疫调节、抗炎、抗病毒、抗肿瘤、抗辐射、抗氧化、保肝、降血糖、降血脂等广泛的生物学活性和药理作用,其中以调节机体免疫作用最为重要,可作为免疫调节剂。对真菌多糖的结构、活性成分、构效关系及其对机体的免疫调节作用的研究将逐渐成为各国学者的研究热点。文章就真菌多糖在免疫器官、非特异性免疫和特异性免疫等方面对机体发挥免疫调节作用的研究进展进行了概述,并展望了真菌多糖的应用前景。     

牛乳金黄色葡萄球菌分离株超抗原肠毒素基因分型研究

为研究牛乳金黄色葡萄球菌 SP-3分离株携带超抗原肠毒素的基因型，设计合成了金黄色葡萄球菌超抗原肠毒素基因 SEA-SEE 及 TSST-1特异性引物，并以其固有基因 femA 和 femB 为阳性对照，以分离菌株 DNA 为模板，经 PCR 扩增菌株携带的毒素基因。结果表明，SP-3分离株和阳性对照菌株均含有femA 和 femB 基因，且牛乳分离株携带 sea、sec、sed 和 tst-14种超抗原肠毒素基因，为开展动物源超抗原毒素基因系统分型及有效防控金黄色葡萄球菌奶牛乳腺炎奠定基础。     

榆耳发酵产物的体外抑菌及免疫增强作用

为探讨榆耳G930菌种发酵上清液的抑菌谱及理化因素对其体外抑菌作用的影响和榆耳发酵液多糖对小鼠的免疫增强作用,采用杯碟法对体外抑菌作用进行研究,通过测定小鼠脾脏指数、腹腔巨噬细胞吞噬率、血清溶血素水平及淋巴细胞转化率对免疫增强作用进行研究。结果表明,榆耳发酵上清液抑菌谱较广,对肠道致病菌的体外抑制作用强于对呼吸系统致病菌的体外抑制作用;榆耳发酵上清液中的抑菌物质具有良好的热稳定性及耐酸性,但在碱性环境中易失活。小鼠饲喂榆耳发酵上清液多糖21 d后,所有试验组小鼠的血清溶血素水平均极显著增强(P0.01);当榆耳发醇上清液多糖的剂量为5、10 mg/d时,可以显著增强小鼠的脾脏指数、淋巴细胞转化率(P0.05),极显著增强腹腔巨噬细胞吞噬率及吞噬指数(P0.01),说明榆耳发酵液多糖可增强机体免疫功能。     

兽用冻干疫苗耐热保护剂的研究：鸡传染性支气管炎冻干活疫苗耐热保护剂试

本试验以水解乳蛋白、乳糖、硫脲、多聚蛋白胨、聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰＫ９０）等为主要材料，配Ａ组保护剂，并加Ｂ组保护剂（国内常规的蔗糖脱脂乳）和Ｃ组保护剂（国外疫苗保护剂）分别与鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ Ｈ１２０、Ｈ５２、ＨＫ肾型）弱毒原液，按一定比例配苗，采取特定的冻干曲线制备的试验疫苗，在不同温度下保存后测定效价变化情况。试验证实，Ａ组保护剂耐热保护性能最好，在２～８℃条件下有效保存期达２年以上，达到国外同类产品水平。     

兽用冻干疫苗耐热保护剂的研究——鸡传染性支气管炎冻干活疫苗耐热保护剂试验

本试验以水解乳蛋白、乳糖、硫脲、多聚蛋白胨、聚乙烯吡咯烷酮 (PVP K90 )等为主要材料 ,配 A组保护剂 ,并加 B组保护剂 (国内常规的蔗糖脱脂乳 )和 C组保护剂 (国外疫苗保护剂 )分别与鸡传染性支气管炎病毒 (IBV H1 2 0、H52、HK肾型 )弱毒原液 ,按一定比例配苗 ,采取特定的冻干曲线制备的试验疫苗 ,在不同温度下保存后测定效价变化情况。试验证实 ,A组保护剂耐热保护性能最好 ,在 2～ 8℃条件下有效保存期达 2年以上 ,达到国外同类产品水平。     

解淀粉芽孢杆菌实时荧光定量PCR测定方法的建立及其在豆粕发酵中的应用

本试验旨在通过快速定量不同发酵时期下发酵豆粕中解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)的数量,以解决豆粕发酵过程品质监控的瓶颈难题,建立解淀粉芽孢杆菌的实时荧光定量PCR方法。根据解淀粉芽孢杆菌DNA解旋酶A亚基(gyrA)基因及16S核糖体RNA(16S rRNA)基因的保守区设计出3对引物,利用常规PCR筛选出1对特异性引物,并以该引物的扩增产物构建的重组质粒作为标准品,建立实时荧光定量PCR方法,并对该方法进行特异性、灵敏性、重复性检验,核酸水平抗干扰验证及豆粕对检测敏感度的干扰验证,最后对发酵的豆粕样品进行定量检测。结果表明:1)以gyrA基因设计的引物构建的质粒标准品建立的实时荧光定量PCR方法具有良好的特异性;2)该方法检测解淀粉芽孢杆菌核酸和菌液的最低检测限分别为102 copies/μL和103 CFU/mL;3)该方法组内变异系数在0.76%~3.27%,组间变异系数在0.34%~1.88%,均低于5%,说明重复性良好;4)含有与不含副干酪乳杆菌核酸的解淀粉芽孢杆菌的Ct值无显著差异(P>0.05),说明该方法不受检样中其他微生物的核酸干扰;5)该方法对豆粕中解淀粉芽孢杆菌的检测限为104 CFU/mL,比纯菌液最低检测敏感度(103 CFU/mL)降低了1个数量级(但不影响该方法的实际检测应用)。解淀粉芽孢杆菌在不同发酵时期发酵豆粕样品中定量检测结果表明,发酵0 d解淀粉芽孢杆菌的数量为9.33×10^5 copies/g,发酵至5 d接种菌数量为4.16×10^8 copies/g。由此可见,本试验建立的解淀粉芽孢杆菌实时荧光定量PCR方法特异性强,灵敏度高,抗干扰能力强,可快速定量发酵豆粕中的解淀粉芽孢杆菌的数量。     

金黄色葡萄球菌乳腺感染模型的建立与评价

本研究通过将临床分离的金黄色葡萄球菌(金葡菌)834菌株以不同的感染剂量经乳腺基部直接注射和剪断乳头尖端后经乳导管注射2种途径感染泌乳母鼠,建立了乳腺炎病理模型,并对感染后母鼠乳腺眼观病理变化、乳腺组织的病理学变化和乳腺中金葡菌数进行了比较研究.结果表明,与乳腺基部直接注射相比,剪断乳头尖端后经乳导管注射法可诱发更为典型的乳腺感染,不仅乳腺中感染菌数多、病理变化明显,而且试验结果的重复再现性好,是一种良好的小动物金葡菌乳腺感染模型.该模型的建立,将为进一步研究金葡菌乳腺炎的病原特性、发病机理、治疗方法和疫苗开发,提供可靠的小动物模型.     

地衣芽孢杆菌发酵过程的优化

通过对培养基配方的调整和发酵培养过程中对发酵工艺的调整,从而节约生产中成本,提高了产量,通过实验所得的工艺条件不但大大降低了成本而且使产量在原有的基础上有了大幅度的提高,极大的提高了产品的市场竞争力。