甘蓝THL1真核表达载体构建及其蛋白质结构预测

THL1是参与甘蓝自交不亲和性信号传导的重要调控因子之一.实验从“E”甘蓝柱头组织中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增THL1编码序列,将其末端加“A”后与pMD18-T载体连接,转化E.coli DH5α.选阳性克隆提取质粒,经EcoRⅠ/NotⅠ双酶切后,将目的片段亚克隆至真核表达载体pPIC9K,再转化至E.coli DH5α.经菌落PCR鉴定、酶切鉴定和生物信息学分析表明,THL1正确插入了载体pPIC9K.首次成功构建了真核表达载体pPIC9K-THL1,并进行了THL1蛋白质结构预测,这为深入研究THL1在甘蓝自交不亲和性信号传导中的作用奠定了基础.     

数学课怎样进行启发式教学

为了提高教学质量,现在每一个老师都在结合自己的课程探索如何进行启发式教学。我认为根据每门课程的不同,启发式教学的方式也是多种多样的。就一般来说,如果通过一门课程的学习,能提高学生分析、解决、独立钻研问题的能力,逻辑思维能力     

甘蓝THL1真核表达载体构建及其蛋白质结构预测

THL1是参与甘蓝自交不亲和性信号传导的重要调控因子之一.实验从"E"甘蓝柱头组织中提取总RNA,利用RT-PCR技术扩增THL1编码序列,将其末端加"A"后与pMD18-T栽体连接,转化E.coli DH5a.选阳性克隆提取质粒,经EcoR Ⅰ/Not Ⅰ双酶切后,将目的片段亚克隆至真核表达载体pPIC9K,再转化至E.coli DH5a.经茵落PCR鉴定、酶切鉴定和生物信息学分析表明,THL1正确插入了载体pPIC9K.首次成功构建了真核表达载体pPIC9K-THL1,并进行了THL1蛋白质结构预测,这为深入研究THL1在甘蓝自交不亲和性信号传导中的作用奠定了基础.     

芸薹属ANR(BAN)基因家族RNA干扰载体的构建

花青素还原酶(ANR)是原花青素生物合成的关键酶,对种皮色素的积累起重要作用。黄子是油菜的重要优质性状,但甘蓝型油菜中其基因型缺乏,表型不稳定,分子机理不清。该实验克隆了芸薹属ANR基因家族的RNA干扰片段BANRI,将其反义片段、正义片段采用NcoI+AatII、BamHI+XbaI分别插入到改进型植物RNA干扰基础载体pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成重组载体pFGC5941M-BANRI(简称为pBANRI),复合PCR鉴定表明载体构建成功,并转化根癌农杆菌菌株LBA4404,获得工程菌株。pBANRI的构建有助于揭示芸薹属物种种皮色素合成的机理,探索对油菜等植物种皮色素进行分子育种的可能性。