杀虫真菌对草地贪夜蛾不同虫态的室内活性

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda（J.E.Smith）是一种联合国粮农组织预警的全球重大害虫。为了评价杀虫真菌对草地贪夜蛾的生防潜力，在室内条件下测定了杀虫真菌金龟子绿僵菌CQMa421、球孢白僵菌ZJU435对草地贪夜蛾不同龄期幼虫、蛹、成虫和卵的杀虫活性以及对卵孵化率、蛹羽化率等影响。结果显示：26℃条件下，菌株CQMa421和ZJU435对草地贪夜蛾低龄幼虫具有杀虫活性，接种10 d后对1龄幼虫的校正死亡率分别为35.6%和50.5%，但随虫龄增大杀虫活性降低，其中菌株CQMa421对4龄幼虫几乎没有杀虫活性；菌株CQMa421和ZJU435都引起草地贪夜蛾蛹黑化，降低其羽化率50%以上；但对成虫没有杀虫活性，也不影响成虫的产卵；卵接种菌株CQMa421和ZJU435后，孵化率分别为82.8%和90.7%，显著低于空白对照的100%，并极大地降低新孵化幼虫的存活率，分别为20.8%和0.0%，而空白对照为79.4%。结果表明，杀虫真菌CQMa421和ZJU435对草地贪夜蛾低龄幼虫、蛹和卵具有杀虫活性，同时降低卵的孵化率、新孵化幼虫存活率和蛹羽化率，对草地贪夜蛾种群控制极具潜力。     

杀虫真菌与苏云金芽胞杆菌对草地贪夜蛾的联合室内杀虫活性研究

草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda（J.E.Smith）是一种迁飞性重大害虫。为了弄清不同微生物联合使用对草地贪夜蛾的生防潜力，在室内条件下采用直接喷雾方法，测定了金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421、球孢白僵菌Beauveria bassiana ZJU435和苏云金芽胞杆菌（Baci1lus thuringiensis，Bt）G033A两两之间对草地贪夜蛾幼虫的室内联合杀虫活性。结果表明：金龟子绿僵菌CQMa421与球孢白僵菌ZJU435悬浮液联合接种10 d后，1～3龄草地贪夜蛾幼虫校正死亡率分别为65.6%、58.8%和35.4%，都显著高于CQMa421和ZJU435单剂处理组。CQMa421与Bt联合接种5 d后，2龄草地贪夜蛾幼虫校正死亡率为82.6%，显著高于CQMa421（21.1%）和Bt（65.5%）单剂处理；ZJU435与Bt联合接种5 d后，2龄和4龄草地贪夜蛾幼虫校正死亡率为80.4%和68.6%，显著高于Bt和ZJU435单剂处理组。上述试验结果表明：不同杀虫真菌联合使用、杀虫真菌与Bt联合使用能有效提高对草地贪夜蛾幼虫的杀虫活性，为田间利用不同微生物农药有效防控草地贪夜蛾提供了依据。     

培育桤木移栽小苗最佳播种量研究初报

<正> 桤木生长快,适应性强,固氮量高,是四川省南充地区主要造林树种之一,也是柏木的良好伴生树种。但在播种量方面还未进行过研究。我们在西充县采用单因子对比试验,取得了初步成果。一、试验地概况试验地位于南充地区西充县多扶区,北     

高毒力杀虫真菌基因工程菌株选育的进展与方向

病原真菌主要通过体壁侵染昆虫,在害虫防治中具有重要作用.利用昆虫病原真菌研制杀虫真菌农药的主要技术难点是选育高毒力杀虫真菌工程菌,本文综述了高毒力杀虫真菌工程菌构建技术的现状和菌株选育的进展,分析了其中存在的问题.根据昆虫病原真菌致病机制、害虫新靶标发现等方面的研究进展,提出了高毒力杀虫真菌工程菌选育技术的发展方向.     

PCR法快速检测柑桔溃疡病菌的简易制样技术

采用依据柑桔溃疡病菌独有蛋白基因的保守区段设计的特异性引物及其扩增体系进行测试.4种浸泡液中,浸泡液B的浸提效果最好,最佳浸泡时间为10～15 min.浸提液进行加热灭活与不加热灭活处理,PCR扩增结果无明显差异.对于无症柑桔样品,浸泡液中加入终浓度为0.3%的Na2SO3可以降低植物色素、多元酚和铜制剂残留的Cu2+等抑制PCR反应物质的干扰作用.样品浸提液经过离心处理,不仅可以有效浓缩靶细菌,提高检测灵敏度,而且可以除去PCR反应抑制物质,大大降低了检测的假阴性.     

PCR、DIA与致病性测定法检测柑桔溃疡病菌的比较

 依据柑桔溃疡病菌全基因组序列的独有保守区域设计筛选出的特异性引物对JYF5/JYR5，用于柑桔溃疡病菌的PCR检测，具有很好的检测特异性、灵敏度和稳定性。同时比较了PCR与DIA（斑点免疫结合技术）及传统的致病性测定法在检测灵敏度、稳定性及田间样品检出率等方面的差异。结果表明，PCR的检测灵敏度可达103～104 cfu·ml-1（每个反应体积约10个细菌），明显高于DIA（104～105 cfu·ml-1，每个样点约300个细菌）；PCR、DIA和致病性测定法检测田间显症样品的检出率均可达到100%，而检测柑桔无症样品的检出率依次降低。此外，通过排除PCR抑制物质和在PCR反应体系中加入终浓度为15%的甘油，有效地降低了检测中存在的假阴性。     

柑桔黄龙病的常规PCR及荧光定量PCR检测

【目的】为柑桔黄龙病的早期诊断和寄主体内病原菌的动态监测提供一种稳定、可靠的检验检疫技术。【方法】利用亚洲韧皮杆菌核糖体蛋白基因rplJ/rplL设计了2对PCR引物CQULA03F/CQULA03R、CQULA04F/CQULA04R和1条TaqMan探针CQULAP1，以此为基础建立了常规PCR和TaqMan探针法、SYBR Green I荧光染料法两种荧光定量PCR（共3种）反应体系；确定了3种体系各自的检测灵敏度、特异性和准确性，据此对3种体系进行了比较；从2004年7月到2005年5月还利用常规PCR和TaqMan探针荧光定量PCR体系完成了对柑桔黄龙病病原菌在寄主体内的周年变化的动态监测。【结果】两种荧光定量PCR方法的灵敏度比常规PCR高出至少2～3个数量级，而TaqMan探针法由于使用了杂交探针，其特异性尤其可靠，另外两种定量PCR较小的产物片段使得它们具有更好的稳定性，加上荧光定量PCR方法本身受污染可能性小、操作简便等固有优势，使得前者更适合于柑桔黄龙病的检测。【结论】本研究建立的2种荧光定量PCR方法可以为柑桔黄龙病的病害早期诊断以及柑桔黄龙病病原菌近缘种的甄别提供准确、灵敏、快速的检验检疫技术。     

中国、美国及AOAC微生物分析方法确认准则比较

本文比较了中国国家质量监督检验检疫总局(AQSIQ)、美国环保局(EPA)和AOAC发布的三个微生物分析方法确认准则,供相关管理部门及行业在微生物农药管理及分析方法开发、确认及验证过程中提供参考.     

马铃薯种苗复合感染病毒多重RT-PCR同步快速检测

 基于马铃薯病毒ssRNA的快速制备方法,根据马铃薯病毒CP基因序列设计PVX、PVS、PVY和PLRV特异性引物对、P1基因序列设计PVA特异性引物对,建立了多重RT PCR快速检测体系,可以同步检出复合侵染马铃薯种苗主要病毒,灵敏度比传统的ELISA至少高100倍。结合生物活性稳定剂研制的固相化检测试剂盒,已用于四川和重庆等15个县市田间与苗圃248个马铃薯显症或无症样品的实际检测,表明四川和重庆地区2~3种马铃薯病毒往往复合侵染(PVX、PVA和PVS三种病毒复合侵染或PLRV和PVY二种病毒复合侵染)。     

金龟子绿僵菌CQMa421农药及应用情况

金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae是一种重要的生防真菌，具有安全、易在害虫种群中流行、环境友好、不易产生抗药性等优点，已在中国、美国、欧盟等多个国家或地区登记和应用。本文对我国广谱金龟子绿僵菌CQMa421农药的菌株选育、产品登记、应用技术及产品应用情况等方面进行了概述。