芸薹属SSR标记在菜薹中的通用性及其应用

以4份遗传背景差异较大的菜薹种质为试材,检测133对芸薹属SSR引物在菜薹中的PCR扩增效果,以期发现适用于菜薹的SSR标记。结果表明:有50对引物在4份菜薹种质中表现出较好的通用性,其扩增产物多在100~350bp,多态性数目在1~4,共91个多态性位点。在此基础上,利用在"四九-19号菜心"和"3T6"中具有多态性的40对SSR引物,对130份以"四九-19号菜心"和"3T6"为亲本建立的F6重组自交系群体进行基因分型,构建了一个具有10个遗传群、总长度为641.39cM的菜薹遗传连锁图。研究结果可为今后菜薹遗传多样性、基因定位和分子标记辅助育种提供理论参考。     

菜薹种质遗传多样性的荧光MFLP标记分析

采用M13通用接头连接锚定引物,建立了适合于菜薹的荧光微卫星锚定片段长度多态性（MFLP）技术;在此基础上,从360对选择性扩增引物组合中筛选出9对适宜的引物组合,对收集的32份菜薹种质进行等位基因多态性分析;结果显示这些引物组合的扩增产物在32份菜薹种质中的等位基因多态性在10 ~ 31之间,平均为17.7个;多态性信息量在0.61 ~ 0.98之间,平均0.81。利用获得等位基因多态性进行的遗传相似性分析表明,32份菜薹种质间的相似系数在0.277 ~ 0.836之间,平均0.624;基于多态性数据,运用除权配对法（UPGMA）进行聚类分析,将这些菜薹种质材料分为2个组群和4个亚群。这些结果显示荧光MFLP标记技术能有效地发现供试菜薹种质材料的DNA多态性,表明该技术在菜薹遗传特性分析的研究和应用领域具有可行性。     

高温胁迫对不同耐热性菜心材料生理特性的差异研究

以4个耐热性存在差异的菜心品种(系)为试材,研究持续高温胁迫对菜心叶片中渗透调节物质、电解质渗漏率、活性氧的产生与清除的影响。结果表明:短期(1d)高温胁迫下,除过氧化氢酶(CAT)酶活性在耐热性弱的菜心材料中急剧增加,且达到活力最高值外,其它性状如脯氨酸和甜菜碱含量、电解质渗漏率、丙二醛(MDA)含量、O2.产生速率、H2O2含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)酶活性出现小幅度增加,且这些性状的值在4个菜心材料间差异不大;随着高温胁迫处理时间的延长(3～7d),生理指标在4个材料中呈现不同程度的增加,表现出耐热性强的材料的甜菜碱含量、SOD、POD和CAT酶活性均明显高于耐热性弱的材料,电解质渗漏率、MDA含量、O2.产生速率、H2O2含量则明显低于耐热性弱的材料;而脯氨酸含量的高低则未表现出与菜心耐热性强弱的对应关系。     

单细胞蛋白开发及其在蛋鸡营养中应用的研究

通过对单细胞蛋白的生产原理及生产单细胞蛋白的资源与微生物种类的研究 ,探讨了单细胞蛋白生产的一般工艺 ,以其在蛋鸡营养中的应用 ,提出了单细胞蛋白在运用中存在的问题和解决办法。     

菜心种质材料的分子身份证构建研究

建立菜心种质材料的分子身份证有利于菜心种质材料的收集、保存、管理和利用.利用荧光MFLP标记技术分析供试的36份菜心种质材料,从200对选择性扩增引物组合中筛选出扩增产物清晰稳定的18对引物组合.这些引物组合在36份菜心种质材料中有3～31等位变异,多态性信息量(PIC)和标记指数值(MI)分别在0.26～0.98和0.8～30.4之间.主坐标分析表明,18对引物组合可以区分各供试材料,并按遗传相似性将供试材料归为3个类群.考虑到使用最少引物组合区分不同种质材料,筛选和确定出PIC和MI值最高的3个MFLP选择性扩增引物组合(tfCCTA(CA)7/mAAG、tfGGTC(ATT)5/mCAA和tfCCTA(CA)7/mCTC)作为核心引物组合,建立3个引物组合检测到每份种质材料等位变异有(1)无(0)的二进制数据,并将其转换成简捷直观的16进制数据,从而构建了供试菜心种质材料的分子身份证.     

基于重组自交系群体的烟草农艺性状遗传变异分析

为研究烟草主要农艺性状的遗传变异规律,揭示烟草生长过程中性状间的相互作用。本研究选用‘粤烟98’ב118-3’为亲本建立的135份单粒重组自交系(RIL)群体作材料,在大田生长后期测量各株系的茎高、茎围、节距、叶数和最大腰叶的长、宽及重等7个农艺性状,并采用相关分析、偏相关分析、线性回归分析和通径分析等方法来探究性状间的关系。结果表明,7个性状的广义遗传力依次为:茎围茎高叶数最大腰叶长最大腰叶重节距最大腰叶宽。相关分析发现27对性状中有17对存在显著或极显著相关,而偏相关分析中仅显示7对性状存在极显著相关;茎高、节距和叶数存在良好的线性关系,构建的回归模型拟合度高达96.7%。通径分析发现性状间直接和间接作用的总效果都为正贡献。本研究通过探讨两个性状间和多个性状间的内在联系,为烟草的早期选择和关联选择提供了更充分的依据,有利于提高育种效率。     

大麦EcoTILLING技术体系的优化

 【目的】建立适合于大麦的EcoTILLING技术体系,用于鉴定大麦目的基因或特定区域的自然突变。【方法】利用M13通用接头作荧光标记,采用巢式PCR对大麦目的基因进行扩增,从PCR扩增的退火温度及模板量、CELⅠ的用量和酶切处理时间等方面对大麦EcoTILLING技术体系进行了优化。【结果】用于第一次PCR扩增(10 μL反应体系)的大麦基因组DNA模板最佳用量为20 ng,第一次PCR扩增产物稀释3倍后作为第二次PCR扩增的模板,2次PCR扩增的适宜退火温度均为58℃;在20 μL CELⅠ酶切体系中,最适酶量为0.4 μL(3 U•μL-1),45℃条件下最佳酶切处理时间为17.5 min。【结论】优化的EcoTILLING技术体系能有效地发现大麦自然群体中特定区域的DNA多态性,降低了试验成本,为在大麦及其它作物上的广泛应用提供借鉴。     

菜薹分子标记利用的研究进展

 介绍了近年来菜薹研究中使用的几种分子标记的基本原理及特点,综述了分子标记技术在菜薹种质资源多样性分析、指纹图谱构建及杂种纯度鉴定、遗传连锁图谱构建及QTL定位分析等方面的研究进展和所取得的成绩,分析讨论了分子标记技术在菜薹应用研究中的存在的问题及今后的发展方向。     

夏冬两季广州菜心的硝酸盐含量及营养品质分析

为了解广州菜心的硝酸盐含量及营养品质,分别于夏冬两季对广州4个蔬菜市场的30个菜心品种进行检测分析。结果显示,广州菜心的硝酸盐含量较高,有5个菜心品种超过国家标准,15个品种达到严重污染程度,但冬季菜心硝酸盐含量比夏季菜心低。同时,冬季菜心的外观形态和营养品质也比夏季菜心好。相关性分析显示,夏季菜心最大叶柄长与硝酸盐含量呈显著负相关,叶色与可溶性蛋白含量呈显著正相关;冬季菜心的最大叶长、最大叶宽、薹粗与硝酸盐含量呈显著负相关,叶色与维生素C、可溶性总糖和可溶性蛋白含量都有较高的相关性。因此,夏季适宜选择颜色鲜绿、叶片和叶柄长的菜心;而冬季适宜选择颜色鲜绿、叶片大和薹粗的菜心。     

基于菜心(Brassica campestris)基因组Survey测序开发多态性SSR标记

为解决菜心SSR标记数量不足、已开发的位点多态性差等问题,本研究利用高通量测序技术,对‘四九-19’和‘3T6’两份菜心材料进行基因组Survey测序,规模化开发多态性SSR标记。两个菜心材料分别获得55 649 657个和59 300 433个Clean reads,分开拼接组装得到430 483个和499 876个Contig。在两个材料的Contig中搜索到共有的SSR位点为30 696个,其中以二和三核苷酸重复基序最为丰富,占总SSR位点的67%。分析比较发现,3 652个(12%) SSR位点在两份测序材料间具有潜在多态性,随机挑选50个SSR位点进行PCR扩增验证,48对(96%)引物在4份菜心材料中扩增出清晰的条带,其中31对(62%)引物在两份测序样品间具有多态性,19对(38%)引物在另两份菜心材料间具有多态性。结果表明,利用基因组Survey测序能开发SSR标记和开发具有多态性的SSR标记,本研究开发的多态SSR标记将进一步为菜心分子标记的发展和应用提供基础。