猪链球菌2型溶血素基因缺失株构建及其生物学特性分析

猪链球菌溶血素(SLY)是较早确定的猪链球菌毒力因子之一,具有细胞毒性,在猪链球菌致病过程中发挥重要作用。利用同源重组技术成功构建了猪链球菌2型(SS2)sly基因缺失的突变株SS2-Δsly,缺失株的体外溶血活性消失,对小鼠脑血管内皮细胞的细胞毒性显著低于亲本菌株(P<0.01),但不影响猪链球菌2型在巨噬细胞中的存活。该菌株可以用于研究SS2溶血素在感染细胞中的作用机制。     

三角风化学成分分析与抗菌效果研究

三角风(Hedera nepalensis K.koch var.sinensis(Tobl)Rehd),又名常春藤、土鼓藤、紫风藤、上树蜈蚣、爬墙虎、钻天风,为五加科多年生常绿藤本植物,广泛分布于我国华中、华南、西南等地。三角风全株都可以入药,临床上常用于风湿、关节肿痛、跌打损伤、疮黄肿毒等症。但三角风含     

检测结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6分泌蛋白双抗体夹心ELISA的建立

用重组蛋白CFP10-ESAT-6免疫新西兰大白兔,通过ELISA方法检测抗体效价水平;高效价抗体用DEAE-32阴离子交换柱纯化后,一部分抗体为包被所用,另一部分抗体用辣根过氧化物酶标记后,作为检测用.建立双抗体夹心法,进行了初步鉴定,确定该方法的可行性.结果表明:抗CFP10-ESAT-6多克隆抗体的效价在1:16 000稀释后D150值基本都达到1.0左右,在纯化、酶标记后,分别以1 : 5 000为包被工作浓度,1:3 000为酶标工作浓度时,能较高特异性检测结核杆菌培养上清分泌的CFP10-ESAT-6抗原.     

不同猪瘟疫苗类型及剂量的抗体反应特性研究

随机选择3个猪场, 从9头母猪生下的仔猪中挑选81头仔猪。随机分成9组,每组又分为3个小组,每小组3头,分别免疫猪瘟组织苗(A)、猪瘟细胞苗(B)和猪瘟脾淋苗(C),各疫苗分别采用1头份、2头份和3头份3个剂量。于25日龄首免疫前后不同时间点采血,分离血清。应用ELISA和IHA两种方法分别对采集的540份血清检测猪瘟抗体。不同类型的猪瘟疫苗免疫试验结果表明：猪瘟脾淋苗免疫效果较好,但不同疫苗之间的抗体水平差异不显著。不同免疫剂量的试验结果显示：3种疫苗以3头份的剂量免疫后抗体反应略高于1头份和2头份,二免后都能获得较高的抗体水平。     

紫菀有效成分分析及生物碱的提取与体外抑菌研究

采用试管法和圆形滤纸层析法分析鉴定了紫菀的化学成分,结果表明,紫菀主要含有生物碱、有机酸、黄酮类、多糖、酚类、鞣质、植物三萜和挥发油等。用醇类溶剂提取法从300 g生药中提取总生物碱0.4520 g,得率为0.1506%。用试管稀释法和纸片法对紫菀乙醇提取物和生物碱提取物进行了体外抑菌效果试验,结果表明,紫菀乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏杆菌都有较强的抑菌作用,其抑菌圈直径分别为18.20±1.30 mm、17.00±2.55 mm、12.40±2.07 mm、14.60±1.82 mm、16.00±4.36 mm;最低抑菌浓度分别为0.80 g/m l、0.05 g/m l、0.50 g/m l、0.20 g/m l和0.20 g/m l;紫菀生物碱提取物对金黄色葡萄球菌、猪巴氏杆菌、大肠杆菌、链球菌和沙门氏杆菌的最低抑菌浓度分别为4 mg/m l、2 mg/m l、6 mg/m l、4 mg/m l和4 mg/m l。     

结核分枝杆菌CFP10-ESAT-6融合基因的表达及其多克隆抗体的制备

以结核分枝杆菌标准株H37Rv的基因组DNA为模板，经重叠PCR扩增获得CFP10-ESAT-6融合基因片段，克隆于pET21a表达载体中，获得了重组质粒pET21a—CFP10—ESAT—6，将其转化大肠杆菌BL21细胞，经IPTG诱导表达，得到了25ku的目的蛋白。表达产物经纯化和定量分析后免疫新西兰大白兔，收集兔血清进行抗体ELISA检测。结果显示，成功构建了CFP10-ESAT-6融合基因的原核表达质粒，获得了CFP10-ESAT-6融合蛋白，以此蛋白免疫动物可产生高效价的抗体。     

小肠结节灌注与尤斯灌流技术在猪肠道功能研究方面的应用

小肠灌注(Small Intestinal Segment Perfusion)技术是通过建立仔猪的原位模型,在病原菌的感染下,检测小肠的净流量和电解质浓度,从而鉴定不同益生物质在腹泻上的作用;尤斯灌流(Ussing chamber)技术通过微电极检测整个肠道细胞膜离子通道变化的电流信号,研究其药物吸收、通透性和分泌情况的变化。本文就这两种技术的发明,主要步骤和在肠道上的应用进行详细的介绍。     

富勒烯[C60]抗氧化应激的研究进展及在畜禽生产中的应用前景

氧化应激损伤是指机体在遭受有害刺激时,体内高活性分子,如活性氧自由基(ROS)或活性氮自由基(RNS)产生过多,导致细胞、组织和动物机体受到严重损伤。畜禽在应激和疾病的条件下会造成氧化应激并引发各种炎症。减少氧化应激以提高畜禽生长性能、减少疾病发病率是畜禽生产中的重要研究内容。近年来,富勒烯[C₆₀]被认为是一种强大的抗氧化剂,大量研究表明富勒烯[C₆₀]及其衍生物在自由基清除和缓解机体氧化应激反应中发挥重要作用。本文对富勒烯[C₆₀]及其衍生物的抗氧化作用和机制进行归纳总结,旨在为畜禽生产中抗氧化剂和抗生素替代物的开发利用找到新的方向,使富勒烯能应用到畜禽生产以代替抗生素解决食品安全问题,更好地发展绿色、健康、安全的养殖业。