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用4种PCR体系(2×Taq MasterMix,Forward Primer,Reverse Primer,Template DNA,RNase-free Water;2×PCR buffer,2 mmol/L dNTPs,Forward Primer,Reverse Primer,KOD FX,Template DNA,RNase-free Water;10×Bufferfor Blend Taq,Blend Taq,Template,Forward Primer,Reverse Primer,dNTPs,RNase-free Water;10×Taq PCR Buffer,dNTP Mix,Forward Primer,Reverse Primer,MgCl2,Template DNA,Taq DNA Polymerase,RNase-free Water),分别对不同含量和质量的湖北海棠DNA进行PCR实验。结果表明,DNA稀释几倍后对4种PCR体系的影响不大,扩增的条带清晰;但不同质量DNA对4种PCR体系影响很大,低质量DNA只能在混合酶体系下才可以扩增出清晰、明亮的条带,而其他3个体系下的扩增产物均不清晰。 相似文献
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从苹果属腊叶标本中提取DNA的改良CTAB法研究 总被引:2,自引:1,他引:1
为了探求从保存年代较长并富含多糖多酚的苹果属植物腊叶标本中提取基因组DNA的方法,在传统CTAB法的基础上加以改良,无液氮研磨材料后加入预冷CTAB free缓冲液和提高沉淀时盐浓度,所得模板直接用于扩增nrITS区和cpDNA matK基因。经紫外分光光度和琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明用改良方法提取的DNA在质量和产量上优于常规方法并能满足后续扩增反应的要求。该方法不需要液氮研磨,节省了人力和成本,提前加入除杂缓冲液对去除多酚的效果良好,增加沉淀时盐的浓度能有效去除多糖,表明改良CTAB法适合苹果属腊叶标本叶片总DNA的提取。 相似文献
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