罗氏沼虾低温有水保活试验

通过对保活温度(12、15、17、20、23、25 ℃)，虾与水质量比(1∶6、1∶8、1∶10、1∶12、1∶15)和暂养时间(0、12、24、36、48 h) 3个因素的单因素试验和正交试验，确定罗氏沼虾低温保活的最佳工艺条件，并检测低温保活过程中的水质指标及肌肉、血液、肝脏等虾体组织指标的变化，探究影响罗氏沼虾的保活机理。结果表明：罗氏沼虾的临界温度为9 ℃；单因素试验中，最佳保活温度为20 ℃，最佳虾与水质量比为1∶10，最佳暂养时间为24 h；正交试验中，最优工艺为保活温度20 ℃、虾与水质量比1∶12、暂养时间24 h，保活24 h内存活率可达100%；以正交优化后的最优工艺条件进行罗氏沼虾的低温保活试验，水样中氨氮质量浓度和菌落总数显著上升(P＜0.05)，但溶解氧质量浓度、pH均仍在适宜罗氏沼虾存活范围内变化，肌肉糖原质量分数、pH和三磷酸腺苷(ATP)质量分数下降，乳酸浓度显著上升(P＜0.05)，血液谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)活力显著上升(P＜0.05)，肝脏糖原质量分数显著下降(P＜0.05)，总超氧化物歧化酶(T–SOD)活力先降后升，而丙二醛(MDA)含量则先升后降。说明水质指标的变化会影响虾体肌肉、血液及肝脏各组织正常的生理代谢，从而影响其保活时间和存活率。     

潘基文:别让气候加速全球粮食危机

<正>联合国秘书长潘基文在哥本哈根全球气候会议举行前夕发出警告,指出保障全球食物供应充足的第一步就是应对气候变化。潘基文的这一言论不禁勾起了人们对"粮荒"的回忆—2008年爆发的食品危机,     

凡纳滨对虾养殖池塘中浮游植物群落结构与水质因子的关系

为研究凡纳滨对虾养殖过程中水质变化特征及其与浮游植物群落结构之间的相关性,本实验于2016年4月至9月在上海市奉贤区某养殖场开展凡纳滨对虾养殖池塘中水质及浮游植物的监测,分析浮游植物群落结构变化与水质因子的相关性。结果显示,凡纳滨对虾养殖池塘中共鉴定出113种浮游植物(包含20个未定种),分别属于7个门、59个属别,从种的数量上来看,绿藻门硅藻门蓝藻门裸藻门黄藻门金藻门甲藻门,18种(含3个未定种)优势种,第一批次共鉴定出10种(含1个未定种)优势种,第二批次共鉴定出14种(含2未定种)优势种,养殖初期优势种为硅藻门,之后是绿藻门,最终以蓝藻门为优势种。对浮游植物群落结构与水质因子进行典范对应分析可知,绿藻门主要受pH、无机氮的影响(包括总氨氮、亚硝酸盐氮、硝酸盐氮),蓝藻门主要受磷含量的影响(总磷和活性磷),硅藻门主要受温度的影响,因此在养殖过程中要格外关注温度、pH以及氮磷含量的变化。     

模拟遮荫对互花米草和海三棱蔗草种子萌发及幼苗生长的影响

通过绿色薄膜遮光模拟植被遮荫,研究了遮荫对外来种互花米草和土著种海三棱草种子萌发及幼苗生长的影响。结果发现:遮荫对互花米草种子萌发率没有影响,但显著降低了海三棱草种子的萌发率;在遮荫条件下,两种植物幼苗的高度显著增加,单株幼苗的茎叶干重和总干重显著降低,幼苗的1周相对生长率显著降低,其中海三棱草幼苗1周相对生长率降低的幅度明显大于互花米草。这表明,遮荫对海三棱草的幼苗更新和生长具有明显的抑制作用。互花米草群落对海三棱草的遮荫可能是其在长江口竞争取代海三棱草的一个重要机理。     

甜菜夜蛾SeCDA8的基因克隆、蛋白表达及几丁质结合活性分析

几丁质脱乙酰酶（chitin deacetylase,CDA）能催化几丁质脱乙酰化产生壳聚糖,在几丁质降解过程中发挥着重要作用。本研究通过分析甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）转录组得到编码甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶的全长CDS序列,命名为SeCDA8（GenBank登录号为OL689577）,其开放阅读框为1158 bp,编码385个氨基酸。NCBI Blast和系统进化分析表明其属于肠道特异CDA蛋白,与斜纹夜蛾CDA相似度最高。成功构建原核重组表达载体pET30a-SeCDA8,转化大肠杆菌,经超声破碎后在沉淀中表达45 kD的重组蛋白。重组SeCDA8蛋白的几丁质结合活性分析结果显示,SeCDA8蛋白与再生几丁质的结合活性较高于胶体几丁质,但均较弱。qRT-PCR分析显示,SeCDA8在前肠和中肠前部高表达,推测其可能与围食膜形成有关。通过探究甜菜夜蛾几丁质脱乙酰酶SeCDA8蛋白的几丁质结合活性和组织定位,为更加深入地探究第Ⅴ类CDA的生理功能提供了重要的理论依据。     

超声预处理微波辅助酶解生产猪血活性肽工艺优化

为了充分挖掘畜禽血液蛋白质资源及开发具有保健功能的血液深加工生物制品,以猪血细胞为原料,在超声波破碎细胞后,利用微波辅助技术,对Alcalase内切酶酶解猪血红蛋白的工艺条件进行了优化。结果表明：当水与血细胞体积比为5：1,超声波功率为300 W时,超声处理25 min后,在功率为500 W的微波中进行酶解,得出最佳酶解条件为：Alcalase内切酶加酶量体积比6.77%,酶解温度54℃,酶解时间11 min,得到血红蛋白的水解度为23.63%,酶解产物大部分为相对分子质量在635.7～1151.1 Da的短肽。该文提供了一种快速提取猪血活性肽的试验方法,在实际生产中具有较好的应用价值。     

潘基文:别让气候加速全球粮食危机

<正>联合国秘书长潘基文在哥本哈根全球气候会议举行前夕发出警告,指出保障全球食物供应充足的第一步就是应对气候变化。潘基文的这一言论不禁勾起了人们对"粮荒"的回忆—2008年爆发的食品危机,     

甜菜夜蛾双重氧化酶基因SeDuox的克隆、表达及功能分析

【目的】昆虫双重氧化酶（dual oxidase,Duox）介导产生活性氧（reactive oxygen species,ROS）是调节昆虫肠道微生物动态平衡的重要免疫机制。本研究通过分析甜菜夜蛾（Spodoptera exigua）双重氧化酶基因（SeDuox）的序列特征与表达模式,RNAi技术探究SeDuox基因沉默对甜菜夜蛾肠道细菌载量的影响,分析SeDuox对苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis,Bt）的免疫响应,从而明确SeDuox在昆虫肠道免疫调控中的作用,为甜菜夜蛾的综合防控提供新的思路和作用靶标。【方法】利用反转录PCR（RT-PCR）技术克隆SeDuox,序列特征进行生物信息学分析,采用ClustalX和MEGA_X软件构建系统发育树;克隆SeDuox膜外91—1 767 bp编码基因SeDuox-OM,利用Bac to Bac表达系统构建Bacmid-SeDuox-OM,脂质体转染法转染昆虫细胞Sf9,表达SeDuox-OM膜外蛋白;采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）方法分析甜菜夜蛾不同组织（围食膜、血淋巴、脂肪体、马氏管、中肠和表皮）和不同发育时期（卵、1—5龄幼虫、雌蛹、雄蛹）SeDuox的表达水平;利用RNAi技术进行功能分析,向4龄幼虫注射SeDuox的dsRNA,以注射绿色荧光蛋白（green fluorescent protein,GFP）的dsRNA作为对照,注射48 h和72 h后检测基因沉默效果及肠道细菌载量的变化;向甜菜夜蛾幼虫饲喂Bt,RT-qPCR方法分析SeDuox及相关免疫基因的诱导表达情况。【结果】SeDuox序列全长为4 497 bp,编码1 498个氨基酸,预测蛋白质的相对分子量为171.62 kD。SMART分析结构域发现SeDuox含有过氧化物酶结构域（peroxidase）、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸结构域（NAD）、N-端钙离子结合域（EFH）、铁还原酶结构域（Ferric）和黄素腺嘌呤二核苷酸结构域（FAD）,与斜纹夜蛾（Spodoptera litura）、草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda）等昆虫的Duox结构域类似。TMHMM分析显示有7个跨膜区,跨膜片段SeDuox-OM 在昆虫细胞中成功表达约80 kD的重组蛋白;RT-qPCR分析结果显示SeDuox在甜菜夜蛾4龄幼虫不同组织中均有表达,其中围食膜和中肠表达量较高;在不同发育时期均有表达,但在卵期表达量最高。与注射dsGFP相比,注射 dsSeDuox 的甜菜夜蛾幼虫在48 h和72 h时,SeDuox表达量分别下调了62.08%和74.94%,肠道微生物载量显著升高。甜菜夜蛾幼虫取食Bt GS36 48 h时,SeDuox表达量显著增加,随着侵染时间的延长,其表达量呈现出先升高后降低再趋于稳定的特点。【结论】甜菜夜蛾SeDuox具有保守的结构域,在中肠和围食膜中高表达,SeDuox在宿主肠道免疫调控中起重要作用,可能与抗菌肽基因协同作用抵御Bt的侵染。     

猪血浆酶解肽的制备工艺及免疫调节功能的初步研究

采用酶解和活性炭相结合的方法对猪血浆的脱色条件进行优化,并对脱色酶解物喷雾干燥后得到的产品功能进行初步动物试验评价。结果表明:采用酶解与活性炭相结合的方法对猪血浆进行脱色,脱色率达90.60%,同时还可以将血浆蛋白分解成多肽,且此多肽对兔的细胞因子(IL-1β、IL-6、IFN-γ、INF-α)的调节起着良好的作用。