云南红豆杉扦插育苗中的插条与基质选择试验

2006年12月在云南省林业科学院昆明树木园的苗圃内选用了4种类型的插条和4种基质进行了云南红豆杉扦插育苗的效果试验.经2007～2008年连续两年对不同插条类型、育苗基质的扦插成活率及其扦插苗高径生长观测与分析,表明:在云南红豆杉扦插苗培育中,选取萌生枝条尤其是带有顶芽的萌生枝条作为插条,并用混合土(即1/3生土+1/3蛭石+1/3腐殖土)做基质,是一种较为合理的搭配.     

表达牛呼吸道合胞体病毒G蛋白基因的重组Ⅰ型牛疱疹病毒的构建与鉴定

为构建表达牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)G蛋白基因的牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)重组病毒,本研究将人工合成的BRSV全长G蛋白基因编码序列插入到巨细胞病毒(CMV)启动子之下构建TK基因缺失转移载体。利用磷酸钙-DNA沉淀法将该转移载体与亲本病毒BHV-1/TK-/LacZ+的基因组DNA共转染牛鼻甲细胞后收获增殖的病毒。通过反向蚀斑筛选,得到重组病毒BHV-1/TK-/G+。PCR检测结果证实G蛋白基因已经插入到了亲本病毒BHV-1/TK-/LacZ+的基因组中,间接免疫荧光试验和western blot证实BHV-1/TK-/G+中的G蛋白基因在感染的细胞中获得了表达。本研究为研制BRSV及其他重要牛传染病的BHV-1病毒活载体疫苗奠定了基础。     

牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的多克隆抗体制备及鉴定

为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)重组E2蛋白的兔源多克隆抗体,本研究利用表达BVDV E2蛋白的重组质粒pET30a-E2转化E.coli BL21(DE3),经诱导表达获得重组E2蛋白。Western blot检测显示纯化蛋白能够与BVDV参考阳性血清反应。以纯化的重组E2蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,病毒中和试验测定其中和效价为1:2048,间接免疫荧光和western blot试验表明其具有良好的反应性和特异性。本研究制备的BVDV重组E2蛋白兔源多克隆抗体可应用于BVDV的检测,同时为进一步建立检测BVDV E2蛋白的ELISA方法奠定基础。     

牛病毒性腹泻病毒E0蛋白的表达与多克隆抗体制备

为了制备BVDV的E0蛋白兔源多克隆抗体,试验采用大肠杆菌对E0蛋白进行了表达,根据已发表的BVDV的VEDEVAC株的全基因组序列设计1对扩增E0的引物,经RT-PCR扩增出长约680 bp的E0基因片段,然后将目的基因克隆到pET-30a载体上,经酶切鉴定获得阳性重组质粒后进行测序,再将测序正确的阳性重组质粒转化BL21表达菌,经扩大培养及IPTG诱导后获得以包涵体形式存在的重组E0蛋白,经亲和层析法纯化后进行Western-blot检测,同时以纯化的E0蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,并对E0多克隆抗体进行了中和试验和免疫荧光检测。结果表明:E0蛋白具有良好的反应性;E0多克隆抗体的病毒中和试验测定其中和抗体效价达到1∶128,具有良好的反应性和特异性。说明制备的重组E0蛋白多克隆抗体可以用于BVDV的检测。     

O型FMDV VP1基因的表达鉴定及其多克隆抗体的制备

为制备O型口蹄疫病毒(FMDV)VPI抗血清,本研究人工合成了FMDV的VPI基因,并克隆构建了采用PCR方法以pUC57-VP1重组质粒,以其作为模板,经PCR将VPI基因亚克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,获得重组质粒pET-VP1.重组质粒鉴定验证后,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导后,SDS-PAGE结果显示重组蛋白的分子量约为38 ku,以包涵体的形式存在.Western blot与间接ELISA结果显示重组蛋白能够与FMDVFn性血清反应.进一步将纯化的重组蛋白免疫BALB/c鼠制备多克隆抗体,ELISA测定抗体效价为1:1 600.本研究为FMDV的其他研究工作提供了基础材料.     

突出非主要农作物监管 落实《种子法》精神

正2015年11月4日,新修订通过的《中华人民共和国种子法》(以下简称《种子法》)确定稻、小麦、玉米、棉花、大豆等5种作物为主要农作物,由28种减少到5种。同时,国家对部分非主要农作物将实行品种登记制度,登记目录由国务院农业主管部门制定和调整。这是新时期转变政府职能、明确主体责任、推行简政放权的内在要求和集中体现,弱化事前审批,强化事中事后监管。因此,在今后种子市场监管中,要坚持"市场准入放宽、市场监管放严",突出监管能     

滇西北亚高山退化林地的土壤种子库

对滇西北亚高山不同演替阶段退化林地的土壤种子库进行了初步研究.结果表明:演替早期样地种子丰度最大、物种多样性指数较低,并呈现随演替发展而增加的趋势;大约75%以上的种子都分布在0～5 cm厚土层;演替早期样地雨季前(次年4月)种子丰度最大,而在演替的中后期,雨季(7月)种子丰度要高于雨季后(11月)和雨季前;不同物种在...     

云南红豆杉人工林定向培育的目标与模式

云南红豆杉具有极高的药用价值和优雅古朴的园林观赏价值,是珍贵的工业用材.在分析人工林培育现状的基础上,分别确定了短周期药用原料林、珍贵用材林、观赏盆景林三大红豆杉人工林的经营目标,并从育苗、营林技术、采伐管理等方面组装形成各自的经营模式.     

Asia 1型口蹄疫病毒VP1基因的表达鉴定及其多抗制备

本研究旨在表达口蹄疫病毒(FMDV)的VP1全基因并制备特异性的多克隆抗体。利用PCR方法扩增Asia 1 IND 49197株VP1全基因,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,在大肠杆菌BL21中进行表达。SDS-PAGE结果显示表达产物分子量约为31.6ku,以包涵体的形式存在。通过Ni-NTA Purification System纯化后进行western blot和间接ELISA分析,结果显示重组蛋白能够被FMD阳性血清识别,具有良好的反应性。将纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,ELISA测定抗体效价为1∶20480,病毒中和试验测定抗体效价为1∶64。本研究所表达的VP1蛋白可用于开发检测Asia1口蹄疫抗体的诊断试剂,所制备的多克隆抗体为进一步研究VP1的结构、功能以及抗原表位的鉴定提供了条件。     

滇西北地区生态退化成因及其保护与建设对策

滇西北地区是我国重要的生态功能区，通过对滇西北地区自然和社会经济状况的调查，总结了其生态退化的状况，分析了其生态退化的成因是自然因素和人为活动的结果。并提出了生态保护与建设的对策。