人参尖镰孢菌原生质体制备条件优化及绿色荧光蛋白转化

为人参根腐病菌的侵染及防治提供可视化的检测和分析手段,通过摸索分生孢子最适萌发时间、酶解液组成、酶解温度、摇床转数及渗透压稳定剂种类,研究人参根腐病菌-尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)原生质体制备技术.结果 表明:将人参尖镰孢菌野生型菌株0083分生孢子在YEPD培养基中培养11h,酶解温度37℃、摇床转数180 r/min,渗透压稳定剂为0.7 mol/L NaC1的条件下,酶解液(崩溃酶、溶菌酶、纤维素酶和蜗牛酶质量浓度分别为0.01,0.03,0.02,0.005 g/mL)酶解0.25 g菌丝时,收获的菌丝体最有利于原生质体的形成和释放,共获得2.8× 107/mL原生质体.用聚乙二醇PEG介导外源DNA随机插入的方法,成功获得具有绿色荧光信号和潮霉素B筛选标记的转化子,转化效率(以单位质量的DNA的转化子数计)为1400/mg.选取转化子FOG1菌株经过6代继代培养后,菌落形态、产孢量和绿色荧光蛋白的表达与菌株0083无明显差异.因此,利用聚乙二醇(PEG)为媒介的遗传转化体系是稳定高效的遗传转化体系.     

刺五加黑斑病的室内药剂筛选和田间药效试验

通过室内药剂筛选和田间药效试验,以期筛选出防治刺五加黑斑病的有效药剂,为刺五加黑斑病的药剂防治及这些药剂在刺五加上使用标准和残留限量标准的制定奠定基础。采用生长速率法测定了39种药剂及不同浓度对刺五加黑斑病菌的室内抑菌作用;在室内抑菌测定的基础上,选用7种药剂进行田间试验。室内抑菌测定结果表明:枯草芽孢杆菌、氟菌唑、寡雄腐霉、嘧菌环胺、啶酰菌胺、咪鲜胺、戊唑醇、氟硅唑对黑斑病菌具有较好的抑菌作用,其EC500.1 mg/L,其次是苯醚甲环唑、丙环唑、吡唑醚菌酯等8种药剂,其EC50为0.1~1.0 mg/L;田间药效试验结果表明:氟菌唑、苯醚甲环唑、菌核净、多菌灵、嘧霉胺、丙环唑和吡唑醚菌酯在试验剂量下对刺五加黑斑病均有较好的防效,防治效果为67.86%~80.62%。     

玉米穗腐病药剂防治研究

采用菌丝生长速率法测定了13种杀菌剂对玉米穗腐病菌(Fusarium graminearum)的室内毒力。试验结果表明:多菌灵、氟硅唑、氟菌唑、丙环唑、代森锰锌和烯唑醇6种杀菌剂对穗腐病菌抑菌效果较好,其EC5 0值分别为0.11,0.22,0.26,0.88,1.09,2.99μg/mL。对多菌灵、氟硅唑、丙环唑和代森锰锌4种药剂进一步进行了田间药效试验,有效成分用量丙环唑150.00 g/hm2、氟硅唑51.00 g/hm2在发病初期穗部喷施对玉米穗腐病的田间防治效果分别达66.14%和66.04%。产量测定结果表明:丙环唑用量为150.00 g/hm2处理的小区产量最高,增产效果显著,其次是氟硅唑用量为51.00 g/hm2。     

吉林省烟草野火病菌群体分子多态性分析

为研究烟草野火病菌的群体遗传多样性,采用正交试验方法,对5个多态性引物(REP,ERIC,BOX,J3,IS1112)的Rep-PCR反应体系分别进行了优化,同时优化了体系中的Mg2+、dNTP、rTaq酶等几个因素,并在此基础上对来源于吉林省不同地区的70株烟草野火病菌进行了分子多态性分析。结果表明:优化的PCR反应体系电泳图谱清晰,多态性丰富,重复性好,适合烟草野火病菌群体分子标记研究。通过聚类分析发现,吉林省烟草野火病菌群体存在分子多态性,在遗传相似系数为0.9时,70个菌株被聚为4个类群(G1~G4),其中G1类群最大(39个菌株,占55.71%),而G3类群最小,仅包括2个菌株。G1和G2类群分别包含了5个和3个亚群。不同类群和亚群的菌株地理来源存在多样性。     

枯草芽孢杆菌JN209及其基因工程菌生理生化特性及抑菌谱比较

比较研究了枯草芽孢杆菌菌株JN209及基因工程菌株JN209/PWB980-hrpZPsg12生理生化特性的变化,并分别通过平板对峙培养法和抑菌圈法比较了二者对一些植物病原真菌和细菌的抑菌效果变化.结果表明:供试菌株JN209及其工程菌株JN209/PWB980-hrpZPsg12在生理生化特性方面没有明显改变.室内平板抑菌试验结果显示:工程菌株JN209/PWB980-hrpZPsg12对玉米弯孢病菌(Curvularia lunata)、刺五加黑斑病菌(Alternara tenuissirna)、芥菜细菌性叶斑病菌(Xanthomonas campetris pv.armoraciae)及烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv.tabaci)、越橘圆斑病菌(Pestalotiopsis photiniae)、万寿菊细菌性叶斑病菌(P.syringae pv.tagetis)、防风叶腐病菌(P.viridifiara pv.pastinacae)、五味子果腐病菌(Pantoea ananatis)、黄瓜角斑病菌(P.syringae pv.lachrymans)抑制效果明显优于原始菌株JN209.     

9种玉米种衣剂对玉米丝黑穗病的田间药效比较

比较了9种国内外最新研制的玉米种衣剂对丝黑穗病的田间药效。结果表明,有8种玉米种衣剂对玉米丝黑穗病的效果较好,其中BASF(中国)有限公司生产的300 g/L灭菌唑悬浮种衣剂在商品剂量200 mL拌100 kg种子的情况下对玉米丝黑穗病的防效最好,为86.68%,高于其他药剂。     

利用PCR技术特异性检测人参恶疫霉菌等6种疫霉菌

为了建立能同时检测人参恶疫霉菌（Phytophthora cactorum）等6种疫霉菌的快速检测方法,以期为病害的发生预测和早期诊断技术提供依据。通过比较基因组学分析,根据恶疫霉菌等疫霉菌属的6个种共有基因设计引物,通过PCR方法筛选特异性引物,并对引物的特异性、灵敏度和应用可行性进行验证。结果表明：筛选到了1对用于检测疫霉属6种病菌的常规PCR特异性引物YB-00394F/YB-00394R,采用优化的PCR扩增体系和反应条件进行扩增,筛选到的特异引物分别从疫霉属的6个种中扩增出386 bp大小的条带,而其他非疫霉属真菌无扩增条带。常规PCR法对人参恶疫霉菌基因组DNA检测的灵敏度为100 fg/μL,应用PCR方法成功快速的在62份植物样本和95份土壤样本中检测到了目标疫霉病菌。建立的常规PCR方法可以快速灵敏地检测6种疫霉属的真菌。     

人参灰霉病菌Botrytis cinerea的种群表型和基因型多样性

为探究人参灰霉病菌Botrytis cinerea的种群表型和基因型多样性,对从我国人参主产区的8个地区所分离到的对人参有致病性的154株灰葡萄孢菌株进行研究,在PDA上培养3周观察其表型,通过PCR扩增的方法鉴定其转座因子类型和MAT基因型,并对不同转座因子类型的菌株进行致病力的测定。通过试验得到8种表型和3种转座因子型(Boty、Flipper和Transposa),不存在Vacuma类型,其中Transposa类型所占比例最高为93.51%,且致病力最强;同时也发现了含MAT1-1和MAT1-2的菌株个数分别为73株和75株,2种基因型在该种群中均匀分布。以上研究结果表明,我国人参灰霉病菌B.cinerea具有相对均匀的种群多样性,同时也具有丰富的表型和遗传分化。     

我国玉米种衣剂应用现状与发展趋势

综述国内外种衣剂的发展历程与应用现状,介绍我国当前玉米种衣剂登记产品及防治对象,分析种衣剂在玉米生产中的应用效果,包括对种子发芽和幼苗生长发育的影响、对玉米病虫害的防治效果及对玉米的保产增产效果等方面的研究进展,指出目前玉米种衣剂应用中存在的问题,从高毒农药的替代使用、生物型种衣剂的应用、多功能复配型种衣剂的开发以及成膜剂和助剂体系的改进等方面探讨玉米种衣剂未来发展前景。     

高粱酒糟对烟草向日葵列当的防治效果及对烟草生长和品质的影响

目的 明确高粱酒糟对烟草向日葵列当Orbanche cumana的防治效果及对烟草生长和品质的影响。方法 通过田间小区试验,研究施用不同剂量的酒糟处理土壤对烟草向日葵列当的防治效果及对烟草生长、产量和品质的影响。结果 在各施用剂量下,土壤施用酒糟对烟草向日葵列当有较好的防治效果,2018年各处理平均株防效和平均鲜质量防效分别为62.73%~74.16%和42.70%~66.03%,2019年平均株防效和平均鲜质量防效分别为57.10%~64.17%和53.23%~80.56%;各施用剂量下烟草长势较好,各项生长指标均明显高于对照;施用酒糟后烟草产量明显提高,2018、2019年烟叶鲜质量分别比对照提高17.76%~24.22%和6.63%~15.71%,烟叶干质量分别提高6.70%~11.63%和15.39%~20.17%,中上等烟叶比例分别提高7.35%和3.90%。结论 高粱酒糟可用于烟草田间防治向日葵列当,在烟苗移栽前均匀撒施并与20 cm深土壤混匀后起垄,施用剂量为1~2 kg/m²。