首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
     检索      

人参尖镰孢菌原生质体制备条件优化及绿色荧光蛋白转化
引用本文:吴照群,卢宝慧,王莹,王苏宁,岳琪,杨翠,高洁.人参尖镰孢菌原生质体制备条件优化及绿色荧光蛋白转化[J].吉林农业大学学报,2021,43(4):414-419.
作者姓名:吴照群  卢宝慧  王莹  王苏宁  岳琪  杨翠  高洁
作者单位:吉林农业大学植物保护学院,长春130118;吉林省农业科学院,农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室,长春130033;吉林农业大学植物保护学院,长春130118;吉林省农业科学院,农业部东北作物有害生物综合治理重点实验室,长春130033
摘    要:为人参根腐病菌的侵染及防治提供可视化的检测和分析手段,通过摸索分生孢子最适萌发时间、酶解液组成、酶解温度、摇床转数及渗透压稳定剂种类,研究人参根腐病菌-尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)原生质体制备技术.结果 表明:将人参尖镰孢菌野生型菌株0083分生孢子在YEPD培养基中培养11h,酶解温度37℃、摇床转数180 r/min,渗透压稳定剂为0.7 mol/L NaC1的条件下,酶解液(崩溃酶、溶菌酶、纤维素酶和蜗牛酶质量浓度分别为0.01,0.03,0.02,0.005 g/mL)酶解0.25 g菌丝时,收获的菌丝体最有利于原生质体的形成和释放,共获得2.8× 107/mL原生质体.用聚乙二醇PEG介导外源DNA随机插入的方法,成功获得具有绿色荧光信号和潮霉素B筛选标记的转化子,转化效率(以单位质量的DNA的转化子数计)为1400/mg.选取转化子FOG1菌株经过6代继代培养后,菌落形态、产孢量和绿色荧光蛋白的表达与菌株0083无明显差异.因此,利用聚乙二醇(PEG)为媒介的遗传转化体系是稳定高效的遗传转化体系.

关 键 词:尖镰孢菌  原生质体  制备条件  荧光信号

Protoplast Preparation Optimization and Green Fluorescent Protein Transformation of Fusarium oxysporum in Ginseng
WU Zhaoqun,LU Baohui,WANG Ying,WANG Suning,YUE Qi,YANG Cui,GAO Jie.Protoplast Preparation Optimization and Green Fluorescent Protein Transformation of Fusarium oxysporum in Ginseng[J].Journal of Jilin Agricultural University,2021,43(4):414-419.
Authors:WU Zhaoqun  LU Baohui  WANG Ying  WANG Suning  YUE Qi  YANG Cui  GAO Jie
Abstract:
Keywords:
本文献已被 万方数据 等数据库收录!
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号