动物锰营养中含锰超氧化物歧化酶研究进展

锰超氧化物歧化酶(MnSOD)是一种催化超氧阴离子自由基发生歧化反应 ,生成氧和过氧化氢的重要含锰金属酶。本文对MnSOD的分布、结构、活性、基因表达以及动物饲粮锰及其它因素对MnSOD的调节等进行了综述 ,以期推动锰营养学的进一步深入研究     

siRNA介导的Plk1表达沉默对食管癌细胞生长的影响

在包括食管癌在内的多种肿瘤中,Plk1呈现过表达且具重要预后价值,表明该分子是一个潜在的肿瘤治疗靶点.为了探讨Plk1作为分子靶点用于食管癌治疗的潜在价值,采用siRNA技术抑制Plk1的表达,并观察了其对3株代表性食管癌细胞生长的影响.结果表明:合成的特异性短链Plk1 siRNA在mRNA和蛋白质水平上均能高效、特异性地抑制3株代表性食管癌细胞系中Plk1的表达.同时,siRNA介导的Plk1表达沉默显著抑制了食管癌细胞的生长,细胞活力同时显著下降.另外,Plk1表达被抑制后,大量细胞有丝分裂受到阻滞,并进而发生大规模细胞死亡.这些结果表明,siRNA介导的Plk1表达沉默能显著抑制食管癌细胞的生长,Plk1是一个潜在的用于食管癌治疗的新靶点.     

PBL在生物化学教学中的应用

在高等院校的生物类专业中生物化学是一门非常重要的基础课程。为提高教学质量,将PBL教学法应用于生物化学教学实践中,发现通过PBL运用可使学生更好地掌握生物化学相关的基础知识,提高学生分析问题和解决问题的能力,更好的达到教学目标与要求。我们的教学实践证明PBL教学是适合我国高等院校创新人才培养的良好教学模式之一,值得推广应用。     

静脉注射不同形态锰源对肉仔鸡生物学活性的影响

【目的】研究经静脉注射途径进入体内的不同形态锰在肉仔鸡体内代谢利用上的差异。【方法】将180只22日龄肉公鸡按体重随机分为5个处理组,分别翅静脉注射生理盐水,或在生理盐水中溶解硫酸锰及弱、中等和强络合强度有机锰源的注射液20 d。【结果】静脉注射后第10和20天,各注射锰源组鸡的跖骨灰锰含量、心肌锰含量、心肌细胞线粒体中MnSOD活性和MnSOD mRNA均显著（P＜0.03）高于注射生理盐水的对照组,但前3项指标未能恒定一致地反映出不同形态锰对肉仔鸡的生物学活性的差异。注射中等络合强度锰源组心肌细胞线粒体中MnSOD mRNA水平显著高于注射硫酸锰组（P＜0.01）和强络合强度锰源组（P＜0.09）,且注射弱络合强度锰源组心肌细胞线粒体中MnSOD mRNA水平显著高于注射硫酸锰组（P＜0.06）。【结论】注射锰在转录水平上显著影响心肌细胞线粒体中MnSOD的基因表达, 这一功能性基因表达指标比其酶活性等其它指标更敏感、更恒定地监测出肉仔鸡对不同锰间生物学利用性的差异。经静脉注射途径进入体内的中等和弱络合强度有机锰源对肉仔鸡的生物学活性显著高于无机锰,而强络合强度有机锰源不利于肉仔鸡体组织细胞对其中锰的利用。     

MOOC背景下生物化学教学的对策与改革

将MOOC的教学理念引入生物化学教学中,与课堂教学相结合,对提升教师教学的质量和效率,调动学生的学习积极主动性,以及建立有效的学习效果评价体系等方面进行探讨及改革,以期适应电子信息化时代对提高人才培养质量的需求.     

CyclinE基因siRNA真核载体的构建及干扰效果的初步鉴定

根据CyclinE（细胞周期蛋白E）基因序列,设计siRNA干扰序列,将带9个碱基茎环结构的干扰序列插入带U6启动子真核表达载体,构建针对CyclinE基因的shRNA真核表达载体.酶切和测序鉴定确认载体构建成功后,脂质体法转染宫颈癌HeLa细胞,观察绿色荧光蛋白表达检测转染效率,RT-PCR法检测载体对CyclinE基因的表达抑制效果.实验结果显示CyclinE基因的RNAi真核表达载体构建成功,转入HeLa细胞后可以特异抑制细胞中CyclinE基因的表达.其中靶向（＋797～＋819）位点的质粒干扰效果较好,基因表达抑制率为59%.这些结果为利用该载体抑制CyclinE基因进行宫颈癌基因治疗研究奠定了基础.     

有机锰源化学特性研究

测定了5种蛋氨酸锰(Mn—Met A～E)、2种锰蛋白盐(Mn—Pro A和Mn—Pro B)和5种复合氨基酸锰(Mn—AA A～E)的元素含量、氨基酸组成、溶解度、红外光谱特征、在pH2、0．2mol／L HCl—KCl或pH5、0．1mol／L KH2PO4—K2HPO4缓冲液中的稳定性及络合强度。结果表明，12种有机锰源产品的含锰量为6．48％～17．44％，也含有不同数量的常量元素和微量元素，总氨基酸与锰的摩尔比为0．04：1～1．83：1。除Mn—AA D在0．4％盐酸溶液中的溶解度为90．3％、Mn—Pro B和Mn—AA D在pH2、0．2mol／L HCl—KCl缓冲溶液中的溶解度分别为74．1％和85．3％外，所测有机锰源产品在0．4％盐酸、2％柠檬酸、中性柠檬酸铵及pH2、0．2mol／L HCl—KCl缓冲液中的溶解度均在95％以上，在水和pH5、0．1mol／L KH2PO4—K2HPO4缓冲液中的溶解度受载体性质影响，变化范围为5．8％～99．8％。所测4种有机锰源产品均具有金属元素络合物的结构特征。未检测到有机锰源产品在pH2、0．2mol/L HCl—KCl或pH5、0．1mol／L KH2PO4—K2HPO4缓冲液中的可溶部分经凝胶过滤后有以络合锰形式存在的锰。有7种有机锰源产品的络合强度低于10，属于弱络合强度络合物；有4种有机锰源产品的络合强度介于10～100之间，属于中等络合强度络合物；有1种有机锰源产品的络合强度介于100～1000之间，属于强络合强度络合物。本研究结果提示，有机锰源产品含锰量和氨基酸组成可为有机锰源产品配入饲粮提供基础信息；溶解度测定法简单易行，但对其结果的解释需慎重；红外光谱法可以对定性鉴别是否有络合物存在提供化学信息；凝胶过滤色谱法可以按分子大小将不同形态锰分开，是研究不同形态锰源结构的重要手段；极谱分析法可以较科学、合理、方便地测定有机锰源的络合强度即稳定常数，对实际生产中科学研制和应用有机锰源添加剂具有重要意义。     

CyclinE基因siRNA真核载体的构建及干扰效果的初步鉴定

根据CyclinE(细胞周期蛋白E)基因序列,设计siRNA干扰序列,将带9个碱基茎环结构的干扰序列插入带U6启动子真核表达载体,构建针对CyclinE基因的shRNA真核表达载体.酶切和测序鉴定确认载体构建成功后,脂质体法转染宫颈癌HeLa细胞,观察绿色荧光蛋白表达检测转染效率,RT-PCR法检测载体对CyclinE基因的表达抑制效果.实验结果显示CyclinE基因的RNAi真核表达载体构建成功,转入HeLa细胞后可以特异抑制细胞中CyclinE基因的表达.其中靶向(+797～+819)位点的质粒干扰效果较好,基因表达抑制率为59%.这些结果为利用该载体抑制CyclinE基因进行宫颈癌基因治疗研究奠定了基础.