青藏高原蕨麻种质资源遗传多样性POD同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析75份蕨麻过氧化物同工酶,结果与形态学标记、细胞水平、分子标记研究的结果一致,显示蕨麻的遗传多样性丰富。证实蕨麻具有丰富遗传变异,为合理保护与科学利用蕨麻资源提供科学依据。检测显示,蕨麻叶片过氧化物同工酶电泳共出现14条酶带;酶带多态位点百分率为100%;NTSYSpc 2.1软件计算的遗传相似系数为0.214~1.000,平均值为0.681;以遗传相似系数为基础,采用非加权类平均法进行聚类分析,在相似系数为0.67时分为2大类,第1类为蕨麻,第2类为鹅绒委陵菜。蕨麻种质资源遗传多样性及遗传变异均较丰富。说明,蕨麻丰富的遗传多样性是在青藏高原复杂的地理环境中长期进化的结果。     

圆孢蘑菇有效成分的定性分析

[目的]确定圆孢蘑菇(Agaricus gennadii)的有效成分。[方法]采用水提法、醇提法和石油醚提取法对圆孢蘑菇的有效成分进行定性提取和分析。[结果]圆孢蘑菇中含有蛋白质、糖类、有机酸、香豆素与内酯等物质,可能含有皂苷和甾体三萜类,不含生物碱、强心苷、挥发油、酚类和鞣质等。[结论]该研究可使人们更加清楚地了解圆孢蘑菇。     

藏药蕨麻中直链淀粉和支链淀粉含量的测定

应用正交试验详细考察并提出蕨麻淀粉分散的最佳条件,采用双波长分光光度法测定了青海人工种植蕨麻和野生蕨麻中直链淀粉和支链淀粉的含量.结果显示,人工种植蕨麻与野生蕨麻2种淀粉含量差异不显著;随着贮藏温度的升高,直链淀粉和支链淀粉含量呈上升趋势;直链淀粉占淀粉总量的37.00％ ～ 42.00％.结果表明,人工栽培蕨麻2种淀粉的含量与野生蕨麻相比没有变化;直链淀粉含量较高,具有较好的开发应用前景.     

聚乙二醇模拟水分胁迫对密花香薷种子萌发的影响

以密花香薷种子为试验材料,研究了不同浓度(5%、10%、15%)的聚乙二醇6000模拟干旱处理对密花香薷种子发芽和生理的影响。结果表明:经不同聚乙二醇6000浓度处理的密花香薷种子,其发芽率、发芽势及胚根的生长都受到了抑制,并随干旱胁迫程度的提高而增加;密花香薷种子萌芽的可溶性糖和脯氨酸含量都有所增加,但经5%PEG浓度处理后丙二醛含量上升不明显,10%和15%PEG处理的,丙二醛含量上升迅速。     

密花香薷有效成分的定性分析

采用水提法、醇提法、酸性醇提法和石油醚提取法等方法对密花香薷的有效成分进行提取,并进行有效成分的定性分析。结果表明:蛋白质、糖类、有机酸、黄酮类、香豆素与内酯、蒽醌、挥发油的实验结果呈阳性;酚类、鞣质、皂苷的实验结果有阳性也有阴性;甾体三萜类、生物碱、强心苷的实验结果呈阴性。说明密花香薷中含有蛋白质、糖类、有机酸、黄酮、皂苷、香豆素与内酯、蒽醌、挥发油等物质,可能含有酚类、鞣质等物质,不含甾体三萜类、生物碱、强心苷等物质。初步确定了密花香薷的有效成分类型,为密花香薷的开发利用提供了理论依据。     

密花香薷中总黄酮的含量测定及提取工艺

通过分光光度法测定不同地区密花香薷中总黄酮的含量,采用正交试验优化提取密花香薷中总黄酮的提取工艺。结果表明,密花香薷中总黄酮的最佳提取工艺为于80℃,加入30倍量60%乙醇回流提取2 h;密花香薷中总黄酮提取含量为13.72%。总黄酮正交提取工艺结果可靠,含量测定方法简便准确,适合于工业化生产。     

醇类化合物气相色谱保留值的预测

定义原子i的特征值为pi,并在邻接矩阵的基础上提出1个新的基团连接性指数nY和羟基定位参数m,用0Y、m与25种醇在6种固定相上的气相色谱保留指数RI进行关联,其相关系数均大于0.99,因而是一种较好的预测醇类化合物气相色谱保留值的方法。     

青海川西獐牙菜HPLC指纹图谱的建立

[目的]为了建立青海川西獐牙菜的HPLC指纹图谱。[方法]按乙醇(A)-0.04%磷酸水溶液(B)梯度洗脱、流速1.0ml/min、检测波长260nm的色谱条件测定了13批不同产地川西獐牙菜样品的色谱。[结果]通过与对照药材比较,建立了由9个共有峰组成的青海川西獐牙菜的特征指纹图谱。采用相似度分析方法对所建指纹图谱进行解析,表明所建立的指纹图谱可用于青海川西獐牙菜药材的真伪鉴别和质量评价。[结论]该方法稳定、可靠、重现性好,可用于川西獐牙菜药材指纹图谱的建立,并为其质量的全面控制提供了参考。     

磁珠富集法开发蕨麻SSR标记引物

微卫星序列(SSR)因具有分布广、共显性遗传、稳定、多态性丰富等优点而被广泛应用于动植物遗传研究中。利用EcoRⅠ,MseⅠ2 种内切酶酶切蕨麻基因组,酶切片段与用生物素标记的探针(AG)₁₅、(GT)₁₅杂交,然后通过链霉亲和素磁珠富集、含有SSR片段的基因组片段被吸附,再经洗脱、PCR扩增、克隆和测序,完成微卫星序列的收集。共获得有效克隆236个,随机挑选其中80个进行测序,结果显示68条序列(85%)为唯一序列,挑选出其中40条含有SSR位点的序列,用引物设计软件Primer 5 成功设计出 40 对引物,经初步筛选,最终获得多态性丰富,可稳定扩增的SSR引物20对,扩增成功率达50%。对20对引物扩增结果做了初步分析,扩增出多态性位点共338个,平均每对引物扩增出17个,平均有效等位基因数(Ne)、多态性信息含量(PIC)、Nei’s 基因多样性指数(H)和Shannon’s 信息指数(I)平均值分别为1.2440、0.8996、0.1768和0.3078。20对SSR引物为蕨麻遗传变异研究提供了新的分子标记工具。