棉铃虫复眼中Clock生物钟基因的昼夜表达模式

【目的】克隆并分析棉铃虫(Helicoverpa armigera)复眼Clock(Clk)生物钟基因的c DNA序列,探讨棉铃虫复眼中Clk生物钟基因的昼夜表达模式及其表达水平的影响因子,以确认其在复眼中是否起着调节生物节律的功能,为理解复眼中生物钟基因网络提供理论参考。【方法】以2日龄棉铃虫复眼为试验材料,采用RT-PCR和RACE末端扩增技术克隆棉铃虫Clk生物钟基因。利用生物信息学软件对得到的棉铃虫CLK氨基酸序列进行生物信息学分析。采用实时荧光定量PCR(q RT-PCR)技术,检测棉铃虫成虫不同器官(头、胸、腹、足、翅、脑、触角、复眼)中Clk生物钟基因的表达水平;通过设置不同的光周期环境,检测复眼中Clk生物钟基因的昼夜表达模式;通过在暗期设置6 h不同波段光(UV、蓝光和绿光)照射,检测复眼中Clk生物钟基因的表达水平;通过设置棉铃虫雌雄蛾交配处理,检测交配结束0 h和3 h复眼中Clk生物钟基因的表达水平;通过饥饿处理棉铃虫雌雄蛾,检测复眼中Clk生物钟基因的表达水平。【结果】克隆得到棉铃虫Clk生物钟基因的c DNA序列,命名为He CLK(Gen Bank登录号为KM233158),开放读码框1 860 bp,编码619个氨基酸组成的多肽,理论推测分子量(Mw)为69.32 k D,等电点(p I)为5.71。推导得到的氨基酸序列具有3个跨膜拓扑结构,包含多个昆虫CLK蛋白的保守区域(PAS和HLH),其与甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)和黑脉金斑蝶(Danaus plexippus)的同源性较高,分别为97%和74%。与点蜂缘蝽(Riptortus pedestris)和马铃薯甲虫(Leptinotarsa decemlineata)的同源性较低,分别为53%和52%。q RT-PCR结果表明在检测的成虫器官中,He CLK在复眼中表达水平最低,触角中表达水平最高。在14L﹕10D光周期下,复眼中He CLK的表达量在白天增高,夜晚下降。生物钟基因的昼夜表达模式在1 d黑暗下可以持续,而在持续黑暗下固有表达节律消失。复眼中He CLK的表达水平在6 h光照后上调,但不同波段光照射无显著性差异。复眼中He CLK的表达水平在交配后有下调趋势,在雄蛾交配后表达水平显著性下降。复眼中He CLK的表达水平在饥饿处理后无显著性变化。【结论】成功从夜蛾棉铃虫的复眼中克隆得到Clk生物钟基因,由Clk生物钟基因推导得到的氨基酸序列具有典型的CLK蛋白特征,且与昆虫CLK蛋白同源性较高。在检测的棉铃虫成虫器官中,He CLK在复眼中的表达水平最低。He CLK在外周组织复眼中的表达水平受蛾类自身节律、光照和蛾类生理状态的影响,证实棉铃虫复眼中He CLK在调节生物节律方面具有重要作用,但生物钟基因网络在复眼与中枢神经中是否类似有待进一步深入研究。     

棉铃虫YTHDF1基因的表达模式及在核型多角体病毒侵染中的作用

为明确N6-甲基腺苷（N6-methyladenosine,m⁶A）修饰在棉铃虫核型多角体病毒（Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus,HearNPV）侵染棉铃虫中的作用,根据基因组和转录组数据,对棉铃虫m⁶A结合蛋白基因YTHDF1（YTH domain-containing family protein 1）进行鉴定和分析,利用实时荧光定量PCR技术检测棉铃虫YTHDF1基因的时空表达模式、HearNPV处理后的表达变化情况以及RNA干扰效率,并调查该基因下调后对HearNPV复制及感染HearNPV棉铃虫死亡情况的影响。结果显示,棉铃虫YTHDF1基因开放阅读框全长为2 019 bp,编码672个氨基酸,含有1个保守的YTH结构域,其氨基酸序列与斜纹夜蛾Spodoptera litura同源物序列一致性达87.52%。YTHDF1基因在棉铃虫不同发育阶段均有表达,其中在进入5龄期24 h幼虫中的表达量最高,在2龄取食期幼虫中的表达量最低。YTHDF1基因的空间表达谱呈现一定的组织特异性,在幼虫血细胞和成虫头部的表达量最高。HearNPV侵染棉铃虫后YTHDF1基因上调表达,经RNA干扰使该基因下调后显著抑制了HearNPV多角体蛋白基因polyhedrin的表达并延迟了感染HearNPV棉铃虫的死亡时间。表明YTHDF1基因在HearNPV侵染棉铃虫的过程中发挥着重要作用。     

基于标度律的政府投入与高校创新效率研究*

目的对科研经费投入与创新效率进行评价,主要是为国家制定科研发展规划及政策,提高科研管理水平提供参考依据。方法标度律可以反映复杂系统的基本机制、动力学和结构。笔者将标度律推广到科研投入与产出关系的分析上,通过分析科研机构的资金以及科技人力投入与科研产出数据。结果发现科研投入与产出符合标度律关系,标度律指数基本保持稳定。基于标度律的方法,客观的对高校科研质量进行了评估,对于科技计划管理机构在高校经费投入和管理方面提供了事实依据和可量化比较的基准信息,是高校创新效率的重要参考标准,对中国在新时代完善高校科研投入和管理有重要的启示意义。     

基于多样度、匹配度和平衡度的常见蔬菜营养价值评价

目的蔬菜作为人们日常饮食中重要的组成成分,包含人体所需的多种营养素,根据蔬菜所含营养素的种类、含量及比例等指标对常见蔬菜进行综合营养评价,为人们选择蔬菜提供科学指导。方法选取常见的38种蔬菜,根据《中国食物成分表 第2版》中蔬菜及其制品中的分类方法将其分为叶菜类、茎菜类、花菜类等10类。该方法以42种人体必需的营养素为评价指标,包括7大营养素以及被公认为对人体有益的两种多不饱和脂肪酸（亚油酸和亚麻酸）和膳食纤维。分别计算10大类38种常见蔬菜中42种营养素的“多样度”（Degree of diversity,DD值）、“匹配度”（Degree of match,DM值）和“平衡度”（Degree of balance,DB值）指标,根据各指标分值及排名进行营养评价。最后计算3个指标的综合评价指标—“偏离指数”,根据偏离指数对蔬菜进行综合排名分析。结果 根据“多样度”得出各种蔬菜所含营养素种类大致相同;根据“匹配度”得出茎菜类、叶菜类和花菜类营养素含量较高,排名前3位的蔬菜依次为荠菜、香菜、菠菜;根据“平衡度”得出花菜类和葱蒜类营养素比例更符合人体需要,排名前3位的蔬菜依次为大葱、韭菜、黄瓜;最后根据“偏离指数”得出蔬菜营养价值的综合排名,茎菜类、叶菜类和花菜类蔬菜偏离指数较小,排名前3位的蔬菜依次为荠菜、香菜、菠菜。结论 该评价方法能较综合地评价蔬菜营养价值,与营养质量指数、营养素度量法等以往蔬菜评价模型相比,增加了各营养素之间的比例,对蔬菜营养价值的评价更加全面。     

农田灌溉中的渠道防渗施工技术

渠道防渗工程是有效降低渠道输水损失,节约用水,高效利用水资源,以延长渠道防渗工程的寿命,提高渠道防渗工程使用效果。     

2015—2020年辽宁省铁岭市畜禽无害化处理分析

为了解死亡畜禽无害化处理状况,统计了铁岭市2015—2020年生猪、牛羊和家禽出栏、无害化处理和保险数据,并结合其死亡畜禽无害化处理体系建设情况、存在问题的走访调查情况进行了分析。结果发现,铁岭市2018—2020年生猪无害化处理率和投保数量较2015—2017年显著提高（P <0.05）;保险理赔是铁岭市死亡生猪无害化处理的主要方式,牛羊和家禽无害化处理率一直处于较低水平;铁岭市存在无害化处理补助和保险政策实施不均衡、收集和转运体系运行不高效、监管体制和机制运行不顺畅的问题。由此,提出了优化无害化处理补助和养殖业保险政策,提高死亡畜禽收集转运体系运行效率,理顺死亡畜禽无害化处理监管机制等建议。     

不同营养液的使用对马铃薯原原种生产的影响

2005年在本溪市马铃薯研究所进行了不同营养液的使用对马铃薯原原种生产影响的对比试验,试验表明:剪枝后对基础瓶苗喷施营养液能显著提高产量、结薯率和合格薯率。并且通过对比试验认为,C配方即每10kg水中添加10g硫酸钾、2g过磷酸钙、8g硝酸铵、0.03g硼酸、0.02g硫酸锰、0.0005g硫酸铜、0.0022g硫酸锌、0.4g硫酸亚铁的增产效果最为明显。     

充分发挥农行职能作用 大力支持渔业生产发展

近几年来，我省的渔业生产在党的富民政策和搞活经济总方针的指引下，出现了前所未有的大好形势。1984年我省结束了前20年渔业产品持续下降的局面，尔后一年一大步、到1987年养鱼水面已达460万亩，水产品量达10．1万吨，创历史最高水平。但是，从我省自然资源看，发展渔业生产不论是外延还是内涵两个方面仍有很大的潜力。     

节水灌溉技术推广需要解决的问题

通过水的优化配置可以实现扩大灌溉面积,提高灌溉效益。关键要依靠科技,不断开发新技术,健全技术推广服务体系,走科技兴水之路。