响应面法优化微波辅助提取芦荟凝胶多糖工艺

以库拉索芦荟为试材,在单因素试验的基础上,选择微波时间、微波功率、液料比3个因素,利用Box-Benhnken中心组合试验和响应面分析法,对数据进行回归分析,优化微波辅助提取库拉索芦荟中的多糖提取工艺。结果表明:芦荟多糖微波辅助提取的优化工艺条件为微波时间2min,微波功率800W,液料比39∶1mL/g,在此工艺条件下,芦荟多糖的提取率可以达到6.03%。     

苹果采后青霉病拮抗菌株的分离、鉴定和低能N~+注入诱变

以苹果表面分离到拮抗扩展青霉的菌株BA-16为试材,经形态学、生理生化及16S rRNA序列分析,该菌被鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。为了增强该菌株防治青霉病的能力,通过低能N+注入技术对其进行诱变选育,获得抑菌性能显著提高且遗传性能稳定的突变株BA-16-8。为检测该突变株防治青霉病的增强效果,分别对野生株BA-16和突变株BA-16-8的菌悬液和无细胞发酵液进行果实生防检测。结果表明:突变株的菌体及代谢产物的抗病性能显著高于野生菌株,对于苹果采后青霉病的生物防治具有良好的应用开发前景。     

解淀粉芽孢杆菌所产脂肽丰原素是防治苹果采后青霉病的关键物质

为构建解淀粉芽孢杆菌丰原素合成酶基因fenC缺失突变株,研究丰原素在苹果采后青霉病防治中所起的作用。根据同源重组的原理,采用PCR扩增fenC基因上、下游的同源序列,将其连接至穿梭质粒pMAD,构建含有壮观霉素抗性基因(spc)的同源重组质粒pMAD-Δfen,通过电转化技术,将其转至解淀粉芽孢杆菌BA-16-8,通过抗生素抗性筛选、蓝白斑筛选和高温培养筛选出解淀粉芽孢杆菌fenC基因敲除突变株BA-16-8-Δfen。通过高效液相色谱(high performance liquid chromatography,简称HPLC)分析、质谱鉴定和抑菌性试验检测敲除fenC基因对解淀粉芽孢杆菌防治青霉病的影响。结果表明,与野生株相比,突变株菌株细胞及其所产抗生素脂肽对扩展青霉的防治效果显著降低。说明丰原素在解淀粉芽孢杆菌BA-16-8防治青霉病中发挥主要作用。     

复合微生物拮抗菌剂的研制及其在大棚甜瓜生产中的应用

从甜瓜大棚土壤中筛选出菌株FP2,它可有效抑制甜瓜白粉病病原菌、甜瓜枯萎病病原菌、甜瓜疫病病原菌和甜瓜霜霉病病原菌的生长,通过形态学、生理生化和分子生物学研究,FP2被鉴定为枯草芽孢杆菌。为增强该菌株的拮抗能力,用He-Ne激光诱变FP2,得到拮抗活性强且传代最稳定的突变株FP27和FP29,经发酵后将其按1∶1的比例制备成复合接抗菌剂。将复合拮抗菌剂和实验室前期生产的生化黄腐酸菌肥进行复配,首次研发出大棚甜瓜专用的生化黄腐酸复合微生物菌肥。将该菌肥应用于大棚甜瓜的生物防治,结果表明,该菌肥可有效防治大棚甜瓜各类病害的发生,甜瓜长势良好,含糖量高,具有显著的社会效益和经济效益。     

高效石油烃降解菌CQ6的分离鉴定及He-Ne激光诱变

从长庆油田石油污染土壤中分离得到一株产生生物表面活性剂的高效石油烃降解菌。通过形态学、生理生化和分子生物学研究,筛选出的菌株CQ6被鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。为了增强该菌降解石油烃的能力,对其进行He-Ne激光诱变,获得6株突变株,通过检测其表面张力、排油圈直径和烃降解率,降解石油烃能力最强且遗传性状稳定的突变株CQ66被挑选出来。本研究表明,He-Ne激光诱变育种技术可有效改良石油烃降解菌,该手段对修复石油污染土壤具有现实意义。     

耐盐碱微生物复合菌剂的选育、复配及其对盐碱地的改良效果

筛选得到4株能够在盐碱环境下生长的假单胞菌（ Pseudomonas sp．）、枯草芽孢杆菌（ Bacillus subtilis）、巨大芽孢杆菌（ Bacillus megaterium）、酵母菌（ Yeast）,并对这4株菌进行He－Ne激光诱变育种,正突变菌株能在高盐和髙碱条件下生长。经过复配后将其作为功能菌发酵生产生物有机肥,应用于盐碱地改良。与对照相比,微生物复合菌剂对降低盐碱地含盐量、pH值效果显著,有机质含量上升明显。在经过改良的盐碱土中种植紫花苜蓿,出苗率、株高、产量均不同程度增加。     

植物土传疾病拮抗菌的筛选及其生防潜力评价

通过筛选出对植物土传疾病具有良好拮抗效果的菌株BS-17,对其生防效果进行测定,旨在为开发植物土传疾病广谱抗菌生物制剂提供一定依据。采用平板对峙法,筛选出对9种常见植物土传疾病具有拮抗效果的拮抗菌,抑菌率均在80%以上。利用形态学、生理生化及分子生物学的方法对其进行了鉴定,并对拮抗物质产生的位置以及性质进行初步研究;通过土壤定殖试验对其生防潜力作出评价。通过形态学、生理生化及分子生物学的方法鉴定菌株BS-17为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。该菌产生的主要抗菌物质分布于胞外,拮抗物质对热、pH值、紫外线以及蛋白酶均不敏感。此外,菌株BS-17具有较好的产纤维素酶及蛋白酶的能力。土壤定殖试验证明,该菌表现出良好的定殖能力以及抑制病原菌生长的能力。菌株BS-17作为生防菌用于防治植物土传疾病,具有较好的开发和利用价值。     

外源Ca(OH)2对壶瓶枣果实风味及矿质元素的影响研究

枣树为我国栽培面积最大干果树种，具有显著的经济价值和生态效益。研究发现，外源Ca(OH)2能有效抑制 “枣黑顶病”的发病率从而减少枣农损失。为提高壶瓶枣果实营养成分和改善口感，寻找Ca(OH)2最佳喷施浓度。以壶瓶枣为研究对象，分别喷施不同浓度梯度的Ca(OH)2，枣果成熟后测定果肉中可溶性糖、有机酸和矿质元素含量。结果表明：1.不同浓度Ca(OH)2处理条件下，壶瓶枣果肉中可溶性糖含量、有机酸含量均随Ca(OH)2处理浓度的增大而增大，而糖酸比随Ca(OH)2处理浓度的增大，有下降趋势；2.外源Ca(OH)2能显著提高壶瓶枣果肉中Ca、Mg元素的含量且Ca(OH)2饱和溶液稀释150倍浓度提升效果最明显；3.喷施Ca(OH)2溶液对壶瓶枣体内K元素含量有明显抑制作用；4.喷施外源Ca(OH)2溶液能有效提高壶瓶枣果肉中Fe、Mn、Cu、Zn元素含量， Ca(OH)2饱和溶液稀释150倍浓度效果最好。综合以上结果外源Ca(OH)2饱和溶液稀释150-200倍浓度为最佳喷施浓度。     

放线菌产纤维素酶的化学修饰

[目的]提高纤维素酶的使用价值。[方法]首先通过对放线菌进行活化、选择及液体发酵生产纤维素酶,经离心后得到粗酶液。然后利用不同浓度的甲醇、聚乙二醇(PEG)、乙酰丙酮、巯基乙醇(ME)4种修饰剂对纤维素酶进行化学修饰。最后分别测定了修饰前后的酶活力,并进行比较。[结果]与修饰前相比,乙酰丙酮和ME修饰后的酶活力基本不变,但甲醇和PEG的修饰导致酶活力明显降低。[结论]乙酰丙酮和ME的修饰对纤维素酶活性中心影响较小,而甲醇和PEG的修饰对纤维素酶的活性中心影响较大。     

一种新型生物活性膜的制备及对鲜切苹果的保鲜效果

为制备兼具抗氧化和抗菌性能的壳聚糖食品防腐保鲜膜,以壳聚糖(CH)-甘油(GLY)-茶渣提取物(TRE)为原料,制备了一种防腐保鲜活性膜。并在此基础上采用色度测量、傅里叶变换红外光谱(FTIR)、扫描电子显微镜(SEM)、抗氧化性分析、鲜切苹果保鲜效果评价和抗菌分析等方法对所得膜的光学特性和理化特征进行了研究。色度测量结果表明,不同浓度的TRE加入会增加活性膜的光泽度;FTIR结果表明,甘油的添加会增强茶渣提取物与壳聚糖之间的相互作用;电镜观察结果表明,复合膜的各组件之间具有良好的相容性;抗氧化性分析结果表明,壳聚糖复合茶渣提取物所制备的活性膜具有良好的抗氧化活性,DPPH自由基清除能力为86.6%;鲜切苹果的保鲜效果评价结果显示,与对照组相比,活性膜处理可有效维持鲜切苹果的硬度、维生素C含量及可溶性固形物的含量,延缓了MDA的上升,显示出了良好的保鲜效果;抗菌性分析结果表明,含有15%甘油和20%TRE的壳聚糖膜抑菌圈最大,抗菌性最强。本研究所制备的活性膜在鲜切水果的防腐保鲜方面有较好的应用前景。