柔嫩艾美耳球虫MIC4-N的真核表达

应用RT-PCR技术扩增柔嫩艾美耳球虫的MIC4-N端基因并去掉信号肽,为了表达检测和纯化的方便,设计引物时改变了3＇端的终止密码子,使MIC4-N的C末端带有c-myc和6His抗原标签。通过双酶切,使加工好的MIC4-N基因连接到毕赤酵母表达载体pPICZαA上,转化JM109感受态细胞。再经EcoRⅠ与NotⅠ双酶切、菌落PCR及测序鉴定,证明目的基因与真核表达载体pPICZαA构建成功,单酶切重组表达载体、电转转入GS115酵母感受态细胞中。用含高浓度Zeocin的YPD平板筛选酵母菌落,菌落PCR法鉴定转化成功的阳性菌,在BMMY培养基中摇瓶培养,并用甲醇诱导,经SDS-PAGE及Western Blot鉴定,蛋白分泌表达成功。     

贞芪扶正泡腾片的辅料处方优选的研究

目的 优选贞芪扶正泡腾片的处方。方法 本实验用酒石酸为酸源,NaHCO₃为碱源,崩解时限、口感等为考察指标,单因素试验筛选酸碱比例,通过正交试验筛选酸碱总量、药粉总量以及崩解剂,采用HPLC测定泡腾片中特女贞苷的含量。结果 贞芪扶正泡腾片的最佳处方：药粉15%、酒石酸17.78%、NaHCO₃ 22.22%、PEG6000 11.11%、PVPP 3.5%、α-乳糖30.14%、硬脂酸镁0.25%,以蒸馏水作为润湿剂,用酸碱分开的方式制粒。所得泡腾片口感好、硬度适中、片重差异小、脆碎度、崩解时限以及含量符合规定。结论 该处方合理,制成的泡腾片符合规定。     

谈谈气缸压力

一、气缸压力对发动机性能的影响 气缸压力是指发动机压缩终了时气缸内的气体压力。在一定的压缩比、转速和正常热状态下,它与机油粘度、气缸活塞组的技术状况、配气机构调整的正确性及气门、气缸垫的密封性有关。若气缸压力降低,会导致发动机动力性、经济性下降,引起机车行驶无力、油耗增加、起动困难等一系列故障。     

西藏羊蜱蝇中巴尔通体检测及gltA基因序列分析

为了明确西藏部分地区绵羊体外寄生羊蜱蝇携带病原巴尔通体的感染情况,作者于2019年1-9月采集了西藏林芝、日喀则、那曲地区绵羊体外寄生羊蜱蝇298只,通过形态学鉴定、PCR扩增羊蜱蝇18S rRNA基因进行虫体鉴定,并对病原巴尔通体的gltA基因进行检测,将部分阳性PCR产物连接pMD^TM-18T后转入DH5α感受态细胞,将阳性结果进行测序并进行遗传进化分析。结果显示,雌性阳性率49.8%（113/227）,雄性阳性率42.3%（30/71）,雌雄之间差异不显著（χ²=0.944,P=0.267）;羊蜱蝇携带病原巴尔通体的总感染率为48.0%（143/298）,林芝极显著高于日喀则、那曲地区（χ²=13.801,P<0.01;χ²=17.067,P<0.01）,日喀则和那曲地区无显著差异（χ²=0.084,P=0.771）;散养模式羊蜱蝇携带阳性率44.3%（102/230）,圈养阳性率85.0%（34/40）,屠宰场阳性率23.3%（7/30）,宿主散养和圈养、屠宰场存在极显著差异（χ²=20.929,P<0.01;χ²=24.38,P<0.01）,宿主散养和屠宰场存在显著差异（χ²=3.989,P=0.046）;将测序结果上传GenBank数据库获得3个巴尔通体gltA基因登录号（MN623006、MN623007、MN623008）;序列比对表明和云南、新疆巴尔通体相似性为99.6%~100%。本次研究首次检测出西藏羊蜱蝇携带病原巴尔通体,为了解西藏绵羊体外寄生虫携带病原巴尔通体和病原防控提供依据。     

一株西藏牦牛源多杀性巴氏杆菌基因分型及rpoE基因生物信息学分析

为分析本实验室分离保存的一株西藏牦牛源多杀性巴氏杆菌基因型和rpoE基因编码蛋白的生物特性,通过16SrDNA、特异性基因、荚膜分型、脂多糖分型、rpoE基因扩增等分子生物学和生物信息学方法对此株牦牛源多杀性巴氏杆菌进行分析。结果表明:此株牦牛源多杀性巴氏杆菌为B∶L2∶ST44基因型,rpoE基因和印度牛源多杀性巴氏杆菌rpoE基因相似性为100%,分子量22.0ku,理论等电点4.86,属于不稳定、无跨膜结构、无信号肽、有保守结构域和有潜在磷酸化的胞内亲水性蛋白,二级结构α-螺旋占比最高67.02%,三级结构为棒状微弯曲模型,存在多个抗原表位,预测可与10个蛋白存在相互作用。综上,本研究对一株西藏牦牛源多杀性巴氏杆菌进行基因分型和rpoE基因进行生物信息分析,为进一步了解西藏牦牛源多杀性巴氏杆菌基因型和探索RpoE蛋白的生物学特性提供数据参考。     

禽流感病毒疫苗研究进展

禽流感是由禽流感病毒引起的传染性强、传播速度快的呼吸道感染疾病,该病不仅对国内外养殖业的发展造成危害,也威胁人类健康。流感病毒疫苗是目前防控流感病毒的有效方法,为了人类健康和养殖业的健康稳定发展,国内外学者不断研发不同类型流感病毒疫苗,以防控大流行性流感再次来袭。本文旨在综述现如今国内外学者对流感病毒疫苗不同种类的研发进展,以及不同疫苗的实验效果,为今后科研工作者研发新型流感病毒疫苗提供新思路。     

我国南方毛竹林生态系统碳储量的估算

竹林在我国南方分布广、生长快、再生能力强,具有很高的固碳潜力。但是对于区域尺度竹林生态系统碳储量的估算方面仍然存在精度差、缺乏机理模型的不足。本研究针对福建、湖南、江西和浙江4省的毛竹林生态系统,通过野外调查,基于植被生长与温度、水分等因子的相关性原理分析毛竹林生态系统单位面积碳储量与纬度和海拔的关系,构建二元线性回归模型;采用数字高程模型(digital elevation model,简称DEM)和省级毛竹统计面积数据,基于纬度和高程梯度划分统计单元,估算我国南方4省毛竹林生态系统的碳储量。结果表明,36个采样点毛竹林生态系统单位面积碳储量为C 78.7~252.6 t/hm2,其中土壤层(0~60 cm)的碳储量是主体,占66.9%~87.0%;由模型估算,2009年我国南方区域毛竹林生态系统碳储量的总和为C 409.0 Tg,福建、湖南、江西和浙江的碳储量分别为C 109.1、102.1、88.6和109.2 Tg;这4省毛竹林生态系统平均单位面积碳储量分别为C 122.0、122.3、109.5和136.5 t/hm2。