植物几丁质酶及其应用研究进展

几丁质酶是高等植物普遍存在的一种重要的病程相关蛋白,近年来被广泛应用于植物抗病基因工程的研究.本文概述了国内外有关植物几丁质酶的研究情况,介绍了几丁质酶的特性、结构、分类、细胞学定位和功能及几丁质酶基因的克隆与其在植物基因工程中的应用.     

“设施农业环境学”课程教学实践及改革探讨

以福建农林大学设施农业科学与工程专业核心课程"设施农业环境学"为例,分析了目前课程中存在的问题(适宜的专业教材缺乏,相关课件及辅助资料不完善;网络教学平台利用不充分,教学效果的反馈和跟踪困难;教学案例的筛选与组织有待加强,人文素质培养环节需要重视),提出了改革措施(精心组织问题和案例讨论,提升学生学习兴趣;结合多元化考核和教学效果跟踪,提高授课效果;加强学生的人文素质培养,提高其环保意识、农产品质量安全意识等)。     

中国水仙NtSTK基因的克隆、序列和组织表达分析

MADS-box基因在植物花发育中发挥着重要的作用。为了研究D类MADS-box基因在中国水仙花发育中的功能,本实验采用RACE和RT-PCR技术从中国水仙‘金盏银台’中分离到1个MADS-box基因,命名为NtSTK。该基因含有1个705 bp的开放阅读框,编码234个氨基酸,并且该基因在3个不同类型的中国水仙中序列差异较小。系统进化树显示NtSTK属于D类MADS-box基因。荧光定量分析表明该基因在‘金盏银台’和‘玉玲珑’的雌蕊和子房中表达水平较高,在根和叶片中低水平表达,在花被和雄蕊及鳞茎中不表达。     

中国水仙NtPI基因的克隆与表达分析

采用RACE技术从中国水仙‘金盏银台’(Narcissus tazetta var.chinensis)花芽中获得1个与花器官发育有关的MADS-box基因,命名为NtPI(GenBank登录号:JQ326272).该基因全长804 bp,含有1个618 bp的开放阅读框,编码205个氨基酸,具有典型的MADS结构域和K结构域,与仙客来水仙(Narcissus cyclamineus)同源性最高,达98％.系统进化树显示,NtPI属于B类MADS-box基因家族的PI/GLO类基因.半定量RT-PCR分析表明,该基因在‘金盏银台’和‘玉玲珑’2种水仙花朵的各个部位均有表达,但表达的水平有所不同.在‘金盏银台’中,雄蕊和雌蕊的表达量大于花瓣和副冠,而在‘玉玲珑’花瓣和副冠中,表达丰度远远大于雄蕊和雌蕊.     

水仙荧光原位杂交体系的建立

建立以水仙染色体为靶、rDNA为探针的荧光原位杂交实验技术,为进一步利用荧光原位杂交技术分析水仙的亲缘和进化关系奠定了基础.水仙的染色侉制片以去壁低渗-火焰干燥法较好,容易获得大量清晰、分散的有丝分裂中期相;切口平移法地高辛标记探针、染色体和探针90℃变性5min能有效的进行水仙rDNA的染色体荧光原位杂交定位.     

苯甲酸与赤霉素对中国水仙切花保鲜效果的影响

本研究以中国水仙‘金盏银台’切花为材料,在基础瓶插液（1%蔗糖）中分别添加不同浓度苯甲酸与赤霉素,通过观测切花的瓶插寿命筛选适宜的保鲜剂配方;同时测定了这一过程中切花的鲜重变化,丙二醛（malondialdehyde, MDA）、游离脯氨酸（proline, PRO）和可溶性蛋白质的含量,超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）、过氧化物酶（peroxidase, POD）和过氧化氢酶（catalase, CAT）活性,分析保鲜剂发挥作用的生理生化基础。结果表明,1%蔗糖溶液添加200 mg/L苯甲酸的复合瓶插液可延长中国水仙切花瓶插寿命1.6 d;瓶插期间MDA含量呈上升趋势;瓶插过程中SOD和CAT活性、可溶性蛋白含量等高于同期对照组。1%蔗糖溶液添加200 mg/L赤霉素可延长切花瓶插寿命2.5 d;瓶插过程中SOD和POD活性、可溶性蛋白含量等高于同期对照组;但PRO含量在第15天较对照下降了40%。综合来看,1%蔗糖溶液添加200 mg/L赤霉素对中国水仙切花的保鲜效果最好。     

含两种抗真菌基因植物表达载体的构建

近年来,植物抗真菌病害基因工程研究日益受到重视．并取得了显著进展,目前主要是通过转几丁质酶基因和β-1,3-葡聚糖酶基因来提高这两种酶在植物体内的表达水平,以此增强抗真菌病害的能力。体外抑菌实验表明：β-1,3-葡聚糖酶能够抑制某些真菌的生长,而一旦与几丁质酶共同作用时,其抑菌作用会大大增强。本实验将几丁质酶和葡聚糖酶     

西瓜高频再生系统的研究

以西瓜栽培种中育1号为材料对影响西瓜组织培养的多个因素进行了研究,建立了西瓜茎尖、子叶块的高频再生系统。结果表明无菌苗子叶呈淡绿色时不定芽诱导率最高,茎尖和子叶块适于直接诱导不定芽,其中茎尖的诱导率稍高于子叶块,MS+6-BA1.0+IBA0.5可较好的诱导子叶块分化不定芽,MS+6-BA1.0+IBA0.1对茎尖较为合适,低浓度的IAA有利生根,低温、高湿可提高移栽的成活率。     

用RAPD标记研究多花水仙若干品种类型的亲缘关系

利用随机引物多态性DNA（RAPD）技术分析了7个多花水仙品种类型，从260条随机引物中筛选出18条，共扩增出129条稳定条带，以此来计算品种类型间遗传相似系数，进行聚类分析，构建树状分枝图。结果表明：7个品种类型可分成四组：第一组I-1和I-2；第二组II-1和 II-2；第三组III-1和 III-2；III-3单独成为一组。     

中国水仙STK类抗病基因同源序列的克隆与分析

根据丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶类(serine-threonine kinase,STK)抗病基因结构中的保守结构域设计简并引物,以中国水仙的基因组DNA为模板,扩增获得4条STK类抗病基因同源序列。同源性分析表明,其均具有STK保守结构域,与已经克隆的Xa21、Pto、Lr10、Lectin等基因在氨基酸水平上的同源性为38.3%～68%。系统进化树分析表明,它们可能是抗病基因的同源序列,这为进一步克隆中国水仙中STK类抗病基因提供依据。