柑桔黄龙病菌LAMP检测制样方法比较

分析比较了CTAB-trion法、磁珠法、裂解法、浸提法等4种制样方法对环介导等温扩增(LAMP)法检测柑桔黄龙病的影响。结果表明,CTAB-trion法和磁珠法提取的核酸质量最好,其OD_(260)/OD_(280)值在1.8~2.0之间,满足LAMP扩增要求,但操作步骤繁琐、成本较高,且CTAB-trion法需使用苯酚和氯仿等有害试剂;裂解法提取的核酸质量虽不高,但可满足LAMP扩增,同时其操作简便,成本低、耗时少,相对环保;浸提法提取的核酸无法满足LAMP扩增要求。裂解法是柑桔黄龙病LAMP检测的最佳制样方法。     

检测柑橘黄龙病的四对常规PCR引物特异性和灵敏度比较

柑橘黄龙病是目前危害柑橘产业的重要危险性病害，实验室中通过PCR技术检测柑橘黄龙病是最有效的方法，因此，确定一组特异性好、灵敏度高的引物至关重要。本文通过荧光定量PCR标定柑橘黄龙病菌核酸浓度的方法，对目前各实验室常规PCR应用比较广泛的4对引物（P400F/R、P535F/R、OI1/OI2，16SF/R）做了特异性和灵敏度的比较。结果发现4对引物均能排除其它来源核酸的干扰，表现出明显的特异性，但在灵敏度方面4对引物差别很大，灵敏度结果是依次为：16SF/R＞P400F/R ＞P535F/R=OI1/OI2，灵敏度最高的16SF/R引物检测柑橘黄龙病菌核酸含量约为1.87×10﹣2 ng/μl。本研究结果为实验室开展检测柑橘黄龙病研究提供了很好的理论与实践基础     

高温对亚洲柑橘木虱死亡率和活动行为的影响

[目的]研究高温对亚洲柑橘木虱死亡率和活动行为的影响,为亚洲柑橘木虱的防治提供理论依据.[方法]在光照培养箱中模拟高温环境,研究40、42、44、45和46℃高温条件下亚洲柑橘木虱的死亡率;研究36~46℃逐渐升温对亚洲柑橘木虱活动行为的影响;在45℃下,研究不同光照对亚洲柑橘木虱死亡率的影响,以及36与45℃循环变温对亚洲柑橘木虱死亡率的影响.[结果]在40、42、44、45和46℃高温条件下50%亚洲柑橘木虱死亡时间(LT50)分别为138.038、17.140.、11.695、10.593和0.337 h;95%亚洲柑橘木虱死亡时间(LT9s)分别为181.970、26.978、18.843、14.718和0.500 h:在36~46℃逐渐升温过程中,亚洲柑橘木虱的活动逐渐增强;高温(45℃)条件下暗处理的LT50和LT9s分别为6.353和8.913 h,均小于正常光照处理的10.593和14.718 h,而36与45℃循环变温的LT50和LT95分别为13.740和18.967 h,均大于恒温处理的10.593和14.718 h.[结论]高温导致木虱种群生存时间缩减是亚洲柑橘木虱在高温季节出现种群消退现象的主要原因.     

用荧光染色法研究山羊瘤胃原虫对细菌吞噬速率的初报

 【目的】采用荧光染色标记细菌（fluorescence labeled bacteria,FLB）技术,研究山羊瘤胃中原虫对细菌的吞噬速率。【方法】利用4只装有永久性瘤胃瘘管的徐淮山羊,采集瘤胃液以获取瘤胃原虫和细菌。试验设置清洗原虫祛除瘤胃自由细菌的荧光全标组（WFLB）及未清洗原虫保留瘤胃自由细菌荧光标记组（FLB）。【结果】WFLB组和FLB组的吞噬速率分别为398.4 cells/(cell•h)和230.4 cells/(cell•h),换算为细菌N为：2.15 pg N/(cell•h)/和1.24 pg N/(cell•h)。【结论】每天每头羊由原虫在瘤胃内循环中带出的细菌N损失在WFLB组和FLB组分别估计为103.2 mg N/(d•头)、59.5 mg N/(d•头),或者细菌蛋白损失为0.645 g/(d•头)和0.372 g/(d•头)。结果同时表明,荧光染色标记技术可以应用于瘤胃原虫对细菌吞噬速率的研究。     

一种提取细胞结合性马立克病毒基因组的新方法及其高效转染

马立克病毒(Marek′s disease virus,MDV)是一种高致瘤性α-疱疹病毒,基因组为166～184 kb的线状双股DNA,同时因为其严格的细胞结合性特点,如何分离纯化病毒DNA,一直阻碍人类对MDV的研究.常规方法制备的病毒基因组中含有大量的细胞基因组,不利于高效转染.通过密度梯度离心法从宿主细胞中分离MDV DNA,由于MDV DNA的浮密度与宿主细胞基因组相近,所以制备时也有细胞DNA的污染[1-2].Robin等用脉冲电泳的方法分离MDV基因组[3],虽然完全去除了宿主细胞基因组,但是这种方法对设备和技术要求都较高,所以没有得到推广.因此发展一种新的提取纯化MDV基因组方法对于MDV的分子生物学研究至关重要.     

抗高脂血症降脂中草药的实验研究概述

国内外现代医学对高脂血症进行了广泛的研究,取得了一系列重要的进展,目前已开发出多种治疗高脂血症或调节脂质代谢的药物,如他汀类(β-羟基β-甲基戊二酸辅酶A还原酶抑制剂)、贝特类(苯氧乙酸类)、胆酸结合树脂类、烟酸类和不饱和脂肪酸类等药物。然而,以上降脂或调脂药均有一     

生鲜肉品中已烯雌酚残留的检测方法比较研究

己烯雌酚(Diethylstilbestrol,DES)是人工合成的非甾体雌激素,在兽医临床上,主要用于治疗胎衣不下、子宫内膜炎和排除死胎等。在畜牧生产上,己烯雌酚对雌性动物的生殖、泌乳和产蛋的效应有正负双向调节作用。然而,己烯雌酚的毒副作用也日益凸现,为了寻求一种经济、简便、灵敏、特异性强的测定方法,试验以残留量较高的肝脏为检测对象,分别用高效液相色谱法、荧光分光光度计法、毛细管区带电电泳法对其中的DES含量进行检测,同时以己烯雌酚片剂为参照对3种检测方法的最低检测限进行了比较。     

实用鹧鸪养殖技术

鹧鸪原为一种野鸟，属鸟纲，鸡形目，雉科，是由美国驯化后引进我国的珍稀特禽。鹧鸪又称石鸡、红腿小竹鸡，全长27．0～37．0厘米，体重400～500克。     

利用甜叶菊渣为主要原料制备发酵饲料的研究

以甜叶菊渣为主要原料配合适当辅料生产微生物发酵浓缩饲料。原料配比甜叶菊渣:玉米粉:豆粕为5:4:1,采用黑曲霉、里氏木酶和酿酒酵母三种菌种混合发酵分段添加,设计三种菌种按比例添加的正交试验L9(34),发酵前后测定真蛋白、游离氨基酸、粗纤维和可溶性还原糖含量进行比较分析。试验结果显示最佳发酵效果的菌种接种量是黑曲霉8%、里氏木酶4%、酿酒酵母3%,该条件获得的发酵饲料中真蛋白含量为21.44%、游离氨基酸5.19%、可溶性还原糖6.87%,比发酵前分别提高了57.65%、278.83%和161.21%;粗纤维含量从原来的15.85%降为7.86%,降解率50.41%。甜叶菊渣作为主要原料制备发酵饲料是一种很好的资源利用方式。     

不同植物油脂对体外培养条件下培养液酶活及微生物活力的影响

本文旨在研究不同饱和程度的植物油脂对体外培养条件下培养液酶活及微生物活力的影响.试验以3头装有瘤胃瘘管的山羊提供瘤胃液,采用单因子试验设计,对照组不加油脂,试验组分别添加花生油、菜籽油、玉米油和豆油进行体外培养.结果表明:乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶3种酶的活性都以菜籽油组最高,豆油组、玉米油组、花生油组依次降低...