大豆PLMT基因的克隆及在盐、碱胁迫下的表达分析

为了探明GmPLMT在大豆盐、碱胁迫中的作用及变化趋势,本研究从吉育72号大豆中克隆了GmPLMT基因的cDNA,设置3种不同NaCl、NaOH条件对大豆进行胁迫,分别处理24 h、48 h、72 h、96 h,复水处理24 h,以未处理的大豆材料为对照,测定大豆叶片GmPLMT的相对表达。实验结果表明:成功克隆GmPLMT全长627 bp c DNA序列,包含完整504 bp ORF阅读框;经NaCl、NaOH胁迫处理后,GmPLMT的表达水平均明显增加,经50 mmol/L NaOH胁迫处理96 h并复水处理24 h后,GmPLMT相对表达水平达到最大值0.223 1,是对照的1.13倍。磷脂酰胆碱是植物生长发育的重要代谢物,也是植物细胞膜主要脂质组分。大豆磷脂酰甲基转移酶(GmPLMT)是卵磷脂合成的关键酶,有研究表明PLMT与植物的盐、碱胁迫有关,为大豆GmPLMT功能的深入研究提供理论帮助。     

房产税计税依据改革刍议

房产税是对在我国境内拥有房屋产权的单位和个人就其房产原值(余值)或租金收入征收的一种税。它的征税对象是房屋。但现阶段的房产税只按静止价值计税,缺乏弹性,且不能反映真实状况,没有体现公平税负的原则。我国现行房产税仍然执行1986年发布施行的《中华人民共和国房产税暂行条例》,采用的是从价或从租计征的方法。对经营自用的房屋,按房产的原值     

紫苏溶血磷脂酰转移酶基因PfLPAAT的克隆及功能研究

溶血磷脂酰转移酶(Lysophosphatidicacidacyltransferase,LPAAT)是植物甘油三酯生物合成的关键酶,通过研究紫苏LPAAT基因(PfLPAAT)在油脂积累过程中的功能,为揭示植物油脂积累的分子机制提供参考。本研究利用RT-PCR法获得PfLPAAT,采用生物信息学方法分析PfLPAAT的推定蛋白的基本理化性质、跨膜结构域和亚细胞定位等,并进行同源蛋白的系统发育分析。使用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对PfLPAAT在紫苏不同组织及种子不同发育时期的表达水平进行了分析。构建植物表达载体pCAMBIA1303-PfLPAAT,通过花序侵染法转化拟南芥,并对转基因拟南芥种子的含油量及脂肪酸组成进行分析。结果表明PfLPAAT序列长度为1149 bp,编码382个氨基酸,推定蛋白的理论等电点为9.60,分子质量为43.02kD。生物信息学分析表明,PfLPAAT蛋白在内质网行使功能,属于PLN02380超家族。qRT-PCR表明, PfLPAAT在紫苏的各组织中均有表达,其中在叶片和开花后15 d的种子中达到最高水平。与野生型拟南芥相比,转基因拟南芥...     

大豆GmAAP 基因的克隆、生物信息学分析及亚细胞定位

本研究以大豆Williams 82为实验材料，采用RT-PCR技术克隆到了GmAAP 基因，其开放阅读框长度为1440 bp，编码479个氨基酸。生物信息学分析表明，GmAAP蛋白分子量为53.286 kD，理论等电点为8.93，不稳定指数为34.04，属于稳定的蛋白结构；其二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规卷曲分别占据47.18%、15.66%、2.71%、34.45%；跨膜区与疏水性分析显示其含有10个跨膜区，且构成跨膜区的氨基酸多为疏水性氨基酸；GmAAP与野生大豆AAP6亲缘关系最为相近，且序列比对的一致性为100%，可能为大豆AAP6 基因。构建融合表达载体，利用PEG-Ca2+介导法转化拟南芥原生质体进行亚细胞定位分析，结果显示GmAAP定位在质膜上。AAP能提高豆科植物对外源氮的吸收与利用率，进而增加种子内贮藏蛋白含量，提升大豆品质。本研究的结果可为GmAAP 功能 的进一步研究奠定基础，同时也为氮素的高效利用提供候选基因。