大豆PLMT基因的克隆及在盐、碱胁迫下的表达分析

为了探明GmPLMT在大豆盐、碱胁迫中的作用及变化趋势,本研究从吉育72号大豆中克隆了GmPLMT基因的cDNA,设置3种不同NaCl、NaOH条件对大豆进行胁迫,分别处理24 h、48 h、72 h、96 h,复水处理24 h,以未处理的大豆材料为对照,测定大豆叶片GmPLMT的相对表达。实验结果表明:成功克隆GmPLMT全长627 bp c DNA序列,包含完整504 bp ORF阅读框;经NaCl、NaOH胁迫处理后,GmPLMT的表达水平均明显增加,经50 mmol/L NaOH胁迫处理96 h并复水处理24 h后,GmPLMT相对表达水平达到最大值0.223 1,是对照的1.13倍。磷脂酰胆碱是植物生长发育的重要代谢物,也是植物细胞膜主要脂质组分。大豆磷脂酰甲基转移酶(GmPLMT)是卵磷脂合成的关键酶,有研究表明PLMT与植物的盐、碱胁迫有关,为大豆GmPLMT功能的深入研究提供理论帮助。     

土壤pH值对烤烟叶片光合特性及体内保护酶活性的影响

采用盆栽土培法，研究了pH值对烤烟叶片光合特性及体内保护酶活性。结果表明，生长初期，pH6．5～7．5处理的烟叶内叶绿素、光合速率都较高，旺长期达到高峰；土壤pH值与POD活性呈负相关，而SOD、CAT活性和MDA含量则是随着pH值的升高而增加。成熟期，随土壤pH值的升高，CAT、POD、SOD活性增加；MDA含量则表现为，pH4．5～6．5处理的呈增加趋势，pH7．5～8．5处理的呈下降趋势，pH8．5处理的MDA含量最低。在成熟期各处理中，光合速率则以pH8．5最高。     

利用外源DNA导入技术培育向日葵育种新材料

采用氯仿－异戊醇－RNA酶法，从菊芋、罗马尼亚向日葵幼叶中提取总DNA，利用花粉管通道法和子房注射法导入向日葵品种“吉农92－1”、“吉农92－5”中，发现D1代及D2代在植株形态、种皮色、百粒重、好粒大小等性状上出现了新的变异类型。     

土壤pH值对烤烟叶片光合特性和烟碱含量的影响

试验研究了土壤pH值对烤烟叶片光合特性和烟碱含量的影响。结果表明:随着烟株的生长发育,不同pH处理的烟叶在光合特性和烟碱含量方面存在差异。从团棵期到现蕾期,pH 4.5~7.5各pH处理的叶片内叶绿素含量、光合速率等都随着pH增大而升高,旺长期pH 7.5处理的叶片叶绿素含量最大(1.334 mg/g),现蕾期pH 7.5光合速率最高[23.0μmol/(m2.s)],烟碱含量最低(0.71%)。而团棵期到旺长期,比叶重增加缓慢,平均增加15%;成熟期各pH处理的烟叶内叶绿素含量、光合速率下降,pH 4.5处理烟叶内叶绿素含量(0.178 mg/g)和光合速率[3.95μmol/(m2.s)]最低,pH 7.5处理叶片比叶重(6.45 mg/cm2)、烟碱含量(1.97%)达到高峰。pH 8.5处理的植株与其它4种处理规律不同,生长后期仍保持较强的生长势,表现为叶绿素含量(1.072 mg/g)、光合速率[11.05μmol/(m2.s)]都最高,比叶重(3.59 mg/cm2)和烟碱含量(0.68%)最低。     

土壤pH值对烤烟叶片内超氧物歧化酶活性及丙二醛含量的影响

以烤烟NC89为材料，研究土壤不同pH值对烤烟叶片内超氧化物歧化酶（SOD）活性及丙二醛（MDA）含量的影响。结果表明：土壤pH值为4．5时，烤烟叶片的SOD活性最强，MDA含量最小；从团棵期到成熟期，SOD活性降低，MDA含量上升。     

1个新的玉米半透明皱缩胚乳突变体的遗传分析及基因定位

【目的】解析半透明皱缩玉米胚乳形成机制.【方法】以纯合玉米突变体M-E-479为供试材料,通过对M-E-479籽粒进行表型鉴定、遗传分析、主要成分测定及扫描电镜观察,构建定位群体,利用图位克隆技术对突变基因进行遗传定位.【结果和结论】M-E-479突变体胚乳中脂肪含量增加,蛋白质和淀粉含量下降,淀粉粒的大小、形状、排列空间发生改变;用F2群体将突变基因定位在10号染色体SSR标记bnlg1074与umc1506之间,两标记的遗传距离约为3.6 cM,两标记的物理距离约为2.2 Mb.可见M-E-479是一个新的玉米半透明皱缩胚乳突变体,突变性状是由隐性单基因控制.     

农业高校本科分子生物学实验教学改革的探索

分子生物学是生命科学领域的前沿学科,其研究手段和方法已成为生物农业的核心技术。为培养符合现代农业产业需要的全面性高级人才,需重视分子生物学的实验教学。本文针对分子生物学实验教学的内容设计、教学手段以及实验结果评价体系等方面提出探索性改革意见,以全面提高学生的综合素质、创新能力以及竞争能力。     

几种玉米叶片总RNA提取方法的比较研究

本研究以玉米(B73)叶片为实验材料,比较了Trizol法、CTAB法和改进的SDS酚法提取后RNA的质量。琼脂糖凝胶电泳结果表明,CTAB法和Trizol法提取物中含有大量多糖,RNA质量不足以进行后续的研究工作,而通过加入适量的乙醇等实验步骤改进的SDS酚法,提取的RNA纯度高,电泳效果好。通过特异引物扩增试验发现,利用改进的SDS酚法能扩增出预期的目的基因片段,可很好的应用于基因克隆等后续分子生物学实验。     

玉米淀粉合成酶SSⅡa启动子的克隆及功能分析

【目的】克隆玉米Zea mays淀粉合成酶SSⅡa启动子,并分析其功能,为进一步研究和应用SSⅡa启动子奠定基础。【方法】通过NCBI上公布的玉米基因组序列,在网站Maize GDB上BLAST查找到SSⅡa 5'侧翼序列,利用PCR方法从玉米B73中克隆SSⅡa启动子;通过Plant Care在线分析启动子顺式作用元件,用特异性引物分别克隆出长度为1 407、867、633、483和365 bp的片段,与植物表达载体p CAMBIA3301连接,构建5种5'缺失体的植物表达载体,命名为P1、P2、P3、P4和P5。用农杆菌介导法转化拟南芥Arabidopsis thaliana,获得转基因拟南芥。【结果】以玉米B73基因组DNA为模板,用特异性引物SSⅡa F/SSⅡaR进行扩增,得到2 526 bp序列;除草剂筛选的阳性拟南芥植株PCR验证均检测出gus基因;GUS组织化学分析表明,5种类型启动子构建的表达载体在成熟期叶片、果荚中均显蓝色;gus基因定量分析表明,成熟期5种转基因拟南芥叶片中,gus基因表达量P1最高,其他基本一致;种子中gus基因表达量P1和P2相近,且高于P3、P4和P5。【结论】成功克隆玉米SSⅡa启动子;构建的5种SSⅡa启动子缺失体表达载体在转基因拟南芥中均具有活性,长度为1 407 bp(P1)和867 bp(P2)的启动子具有胚乳特异性。     

植物Dof转录因子的结构特点及功能研究进展

Dof(DNA binding with one finger)蛋白是植物中特有的转录因子,其N-末端具含保守锌指结构的Dof结构域,能够识别AAAG序列;Dof转录因子能够发挥多种功能,主要是由于其具有多变的C-末端,它是Dof蛋白的特异转录调控结构域。在植物中,Dof转录因子的功能主要与维管发育、叶片极性、保卫细胞特异基因的调控、碳氮代谢、种子发育和萌发、光响应及光周期调控的开花和花粉发育、次生代谢物合成、防御反应、生长素响应等生理过程有关。将这些进程归纳为组织分化、种子发育和代谢调节三个方面,通过对植物Dof转录因子的结构特点及功能进行分析,为Dof转录因子的深入研究提供参考。