牛病毒性腹泻病毒Core蛋白的原核表达及多克隆抗体制备

为制备牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的Core蛋白及其多克隆抗体,根据Core蛋白的编码基因序列,设计合成一对特异性引物,利用RT-PCR扩增BVDV Core基因并定向插入Pet30a载体中,构建重组质粒Pet30a-Core,经酶切鉴定后转化大肠埃希菌TOP 10感受态细胞,筛选获得阳性重组菌,以IPTG进行诱导后成功表达出分子质量为20 ku的重组Core蛋白。将诱导表达的蛋白产物经融合蛋白的Ni柱亲和法进行纯化,利用纯化的重组蛋白免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,并利用间接ELISA法测出多克隆抗体效价达到1∶512 000。蛋白质印迹法(Western blot)和间接免疫荧光试验(IFA)证实,多克隆抗体可与细胞中的BVDV抗原发生反应,具有良好的免疫原性和特异性。本实验成功制备了BVDV重组Core蛋白的兔源多克隆抗体,为BVDV的检测及其Core蛋白功能研究奠定了基础。     

黄白健脾口服液对犊牛湿热泄泻的治疗效果分析

本试验旨在评价中兽药黄白健脾口服液对犊牛湿热泄泻的治疗效果。筛选符合犊牛湿热泄泻诊断标准的患病犊牛,并对其进行病原检测,给予黄白健脾口服液进行治疗。通过比较治疗前后犊牛的临床表现、血液生化指标变化及细胞因子水平变化,验证黄白健脾口服液对犊牛湿热泄泻的治疗效果。病原检测发现,在犊牛粪便中检测到冠状病毒、隐孢子虫、轮状病毒、大肠杆菌K99、贾第鞭毛虫等5种常见的可导致犊牛腹泻的病原,其中冠状病毒的感染率最高,为34.78%,混合感染比例为39.13%,另有32.61%的病例未检测到这5种常见病原。经黄白健脾口服液治疗,46头湿热泄泻犊牛中19头病牛完全康复,20头病牛明显好转,总有效率为84.78%。治疗前发病犊牛血清尿素氮水平显著高于对照组（P<0.05）,尿酸、肌酐和IL-1β水平极显著高于对照组（P<0.01）,总胆固醇、碱性磷酸酶、白蛋白及血磷、IL-10和TFF3水平极显著低于对照组（P<0.01）。经黄白健脾口服液治疗后,肌酐、尿素氮和IL-1β水平极显著低于治疗前（P<0.01）,总胆固醇、碱性磷酸酶、白蛋白及血糖、IL-10和TFF3水平极显著高于治...