北京昌平地区泌乳期和干乳期荷斯坦奶牛血液生化指标分析

为了了解泌乳期和干乳期荷斯坦奶牛血液生化指标的变化规律,进一步指导奶牛实际生产工作,本试验使用一次性注射器采集奶牛颈静脉血液置于2 mL离心管中,标记并记录每头奶牛耳号以及采样日期,采用全自动血细胞分析仪对加抗凝剂的全血进行血常规和血液生理生化指标测定。结果显示：白细胞数目在泌乳前期会有一定程度升高(P>0.05)血红蛋白含量在整个泌乳时期变化均不显著(P>0.05);总蛋白量(TP)在泌乳盛期达到高峰,碱性磷酸酶(ALKP)在泌乳前期量最多,丙氨酸转氨酶(ALT)在泌乳盛期降低,对于血糖(GLU),在泌乳盛期血液里含量显著高于其他泌乳时期(P<0.05)     

牛子宫内膜上皮细胞的体外培养及鉴定

旨在改良牛子宫内膜细胞原代培养方法,并鉴定其特征。分别比较了单纯组织块培养法和先组织块培养后再消化纯化的方法对牛子宫内膜细胞进行培养以及纯化。经免疫荧光染色方法对两种方法获得的牛子宫内膜上皮细胞进行角蛋白表达鉴定。研究结果表明：先组织块培养后再消化纯化的方法获得的牛子宫内膜上皮细胞形态良好,纯度较高。因此,组织块培养后再消化纯化得到的牛子宫内膜上皮细胞是一种操作简单、高效的方法,用该方法得到的细胞可以在体外传至4~5 代,此结果为牛繁殖生理及其机制模型的建立奠定基础。     

牛妊娠相关糖蛋白6快速检测试纸条的制备及应用

奶牛妊娠的早期诊断至关重要，妊娠相关糖蛋白6(PAG6)是母体胎盘组织分泌至外周循环中的特异蛋白质，因此，本研究致力于制备牛妊娠相关糖蛋白6快速检测试纸条。制备牛妊娠相关糖蛋白6多克隆抗体，将其稀释后加样至NC膜上，通过固定和封闭制备出一种可检测boPAG6的快速检测试纸条，在试纸条上加入待检血清进行孵育后洗涤，再加入二抗孵育后洗涤，最后加入显色液显色后进行快速检测。标准化快速检测试纸条是将抗体用PBS稀释成10μg/mL点样至NC膜上，在37℃温箱中固定抗体30 min，经5%的脱脂奶粉封闭后制成。待检血清滴加至试纸条后，在37℃温箱中孵育1 h后，进行洗涤和二抗孵育，最后在DAB显色试剂盒作用下显色3 min即可判定。临床检测的初步应用表明，在未孕与怀孕奶牛的混合血清中仍然可以判定是否怀孕，快速检测试纸条特异性强；血清在稀释3200倍的最低检测限时，快速检测试纸条的敏感性良好；而且该结果与ELISA的符合率在80%之上。试验重复性良好，并能在4℃和-20℃条件下保存2周。建立了一种奶牛早期妊娠诊断的快速检测试纸条并应用于初步的妊娠诊断。