扁茎变异茅苍术植原体的分子检测及鉴定

茅苍术种植基地内发现少数植株表现为扁茎、叶序紊乱、花变叶等症状,与植原体侵染引发的症状类似。为确定是否是植原体侵染,以及是何种植原体侵染,本研究利用植原体通用引物P1/P7和R16F2n/R16R2对扁茎变异茅苍术植原体的16S rDNA基因序列进行巢式PCR扩增、克隆、测序,并进行分析。结果表明,所得扩增产物约1.2 kb的植原体特异片段,通过对实验结果分析,确定该苍术变异原因为植原体感染。系统进化分析结果表明,引起茅苍术发生扁茎变异的植原体属于翠菊黄化组(Aster yellows group)16SrI-B亚组。本研究首次从分子水平确定了引起中国湖北英山地区茅苍术扁茎变异的病原菌为植原体,明确了其分类地位,为指导苍术该病害流行学研究和苍术植原体防治提供了理论依据。     

空心莲子草乙酸乙酯部位体内外抗H9N2亚型禽流感病毒活性的研究

【目的】探究空心莲子草乙酸乙酯部位(ethyl acetate extract from Alternanthera philoxeroides,AETAC)体内外抗H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 subtype Avian influenza virus, AIV-H9N2)活性及其作用机制。【方法】利用CCK-8法检测不同浓度AETAC作用不同时间对鸡胚成纤维细胞(DF-1)的抑制作用,通过预防感染、影响复制、阻止吸附及直接杀灭4种方式作用后检测AETAC对DF-1细胞的毒性,选择体外最佳抗AIV-H9N2作用方式。尿囊腔接种不同浓度AETAC确定其对鸡胚的最大安全浓度;将AETAC以3种不同给药方式作用于AIV-H9N2感染后鸡胚,选择体内最佳给药方式。经尿囊腔同时接种AETAC和AIV-H9N2,统计各组鸡胚存活数,测定血凝效价,并观察胚胎的发育情况和鸡胚法氏囊病理组织变化。【结果】在一定范围内,随着AETAC浓度升高或作用时间延长,AETAC对DF-1细胞的抑制率升高。与空白对照组相比,4种抗AIV-H9N2作用方式下,病毒对照组和药物组细胞存活率均显著降低(P<0....     

空心莲子草醇提物抗AIV-H9N2作用的研究

为了研究空心莲子草醇提物[Alternanthera philoxeroides(Mart.)Griseb. alcohol extract, AAE]的体外抗H9N2型禽流感病毒(avian Influenza virus, AIV)的效果，探索空心莲子草体外抗病毒的作用方式，试验测定了AIV-H9N2对DF-1细胞的TCID₅₀;采用观察细胞病变联合CCK-8检测的方法，测定AAE对DF-1细胞的毒性作用；通过计算各试验组(空白对照组、病毒对照组、给药组)细胞的存活率，观察3种作用方式(预防感染作用、抑制复制作用及直接杀灭病毒作用)下，不同浓度AAE体外抗AIV-H9N2的效果，并计算治疗指数(TI)。经尿囊腔接种病毒，测定鸡胚的半数胚致死量(ELD₅₀),测定AAE对鸡胚的最大安全浓度，然后对鸡胚进行攻毒用药试验，统计各组存活情况及血凝效价，观察胚体的发育情况。结果表明：收获的AIV-H9N2病毒液TCID₅₀为1×10^-4.23/0.1 mL;AAE对DF-1细胞作用24,48小时时的CC<...