不同培养方法及培养密度对绵羊腔前卵泡发育的影响

通过对绵羊腔前卵泡培养方法的研究,能够探索出适宜绵羊腔前卵泡生长发育的培养条件,以及为进一步揭示绵羊卵泡生长发育的规律奠定一些基础。试验一通过使用微滴法和琼脂培养基法培养腔前卵泡,观察其对绵羊腔前卵泡生长的影响;试验二通过绵羊腔前卵泡单独培养与群体培养,探讨不同培养密度对绵羊腔前卵泡生长的影响。试验结果显示,使用微滴法与琼脂培养基法培养的绵羊腔前卵泡,在培养3天时,卵泡直径增加值和存活率差异均不显著(P0.05);但培养6天时,琼脂培养基法培养的腔前卵泡的直径增加值和存活率均极显著高于微滴法培养的腔前卵泡(P0.01);在使用琼脂培养基培养的条件下,对绵羊腔前卵泡进行单独培养和群体培养,在培养的6天时间内二者卵泡直径增加值和存活率差异均不显著(P0.05)。试验结果表明,琼脂培养基法是较为适宜的绵羊腔前卵泡体外培养方法;培养密度对绵羊腔前卵泡体外培养并无显著影响。     

用奶孕酮试验改善奶牛繁殖力

通过测定奶孕酮来监测奶牛的繁殖状态在国外已有二十多年的历史，美国、英国和加拿大等畜牧业发达国家已应用相当普遍，作为奶牛生产常规服务工具。通过奶样测定，奶中的孕酮浓度可用作卵巢活动的指标。近二十年，国内已有一些农业院校和研究所采用牛奶中孕酮测定（放免或酶免）作奶牛早期妊娠诊断、发情鉴定、甚至繁殖疾患诊断。但所报道中诊断牛的数目偏少（奶样少于５００个），对生产的作用有限；或者因为采样点少（一般每个发情周期采一个奶样），提供的诊断信息不够丰富。本试验选择６个项目区，代表了我国奶牛业的不同环境条件。在采…     

成熟液和时间对绵羊体外孤雌胚发育的影响

颗粒细胞在卵母细胞体外成熟和体外受精进程中具有重要的作用,能显著提高卵母细胞体外成熟和体外受精率;但也有研究发现,颗粒细胞存在与否并不影响卵母细胞体外成熟和体外受精率,甚至还可显著降低其体外成熟率和体外受精率.     

肉鸡腹水综合征的防制

腹水综合征是发生于肉用仔鸡的一种常见的非传染性疾病,主要发生于20～40日龄的快大型肉鸡.其特征性病变主要表现为腹腔明显的积水,心、肝、肺受到严重损害.发病率虽然不高,但发病后的死亡率接近100%.     

不同培养液及血清浓度对绵羊孤雌生殖胚胎发育的影响

体外成熟的绵羊卵母细胞，经5 μmol/L A23187 5 min和2 mmol/L 6-DMAP 4 h激活后，分别在SOFaa、M-199两种培养液中进行培养，试验比较了SOFaa、M-199液分别添加BSA和不同浓度（10%、20%）胎牛血清对绵羊孤雌生殖胚体外发育的影响。M-199+FCS组的卵裂率显著低于SOFaa+BSA和SOFaa+FCS组（P<0.05），SOFaa+BSA组的囊胚率显著低于M-199+BSA、SOFaa+FCS、M-199+FCS三组（P<0.05）；SOFaa+10% FCS与SOFaa+20% FCS组的卵裂率及囊胚率均无显著差异，M-199+10% FCS和M-199+20% FCS组的卵裂率及囊胚率间均无显著差异。结果表明：SOFaa比M-199更适合绵羊孤雌生殖胚体外发育，此外添加10%的FCS即可达到较好的培养效果。     

丁内酯-Ⅰ对绵羊卵母细胞体外成熟和受精的影响

绵羊(Ovis arise)卵母细胞经丁内酯-Ⅰ(BL-Ⅰ)抑制培养,然后转入成熟培养液培养不同时间,进行体外受精并观察胚胎发育情况.结果表明,解除8 h抑制再培养8 h组处于MⅡ期卵母细胞率6.38%,显著低于其它组(P<0.01).继续培养16和20 h的卵母细胞成熟率与对照组(常规培养24 h)差异不显著,培养24 h组卵母细胞成熟率(70.83%)稍高于对照组(66.18%),但差异不显著(P>0.05).培养16和20 h组囊胚率分别为2.99%和13.64%与对照组24.39%差异显著(P<0.05),培养24 h组的囊胚率20.33%与对照组差异不显著(P>0.05).表明BL-Ⅰ对绵羊卵母细胞的体外成熟有明显抑制作用,但其抑制作用是可逆的,而经BL-Ⅰ处理后未能提高绵羊卵母细胞体外受精和胚胎的整体发育能力.     

浅析公路工程试验检测工作的现状与发展

公路工程建设质量事关重大,而试验检测工作作为公路工程质量管理的一个重要环节在整个工程建设过程中具有十分重要的作用。本文主要对于公路工程试验检测中存在的问题进行了探讨,并结合近年来公路工程试验检测的发展,提出了相应的解决措施,最后对于试验检测工作在未来道路的发展做出了推测。     

利用脂质体法建立转Toll样受体4基因大尾寒羊胎儿成纤维细胞株的研究

利用脂质体转染法获得转Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)基因的成纤维细胞,将其作为供体细胞,再通过体细胞核移植技术构建重构胚,最终生产出转TLR4基因且性别可控的大尾寒羊。本研究通过原代培养大尾寒羊胎儿皮肤成纤维细胞,并进行SRY基因性别鉴定,利用脂质体转染法转入TLR4基因,然后分别从形态学与分子水平检测TLR4基因的表达,将稳定表达转TLR4的成纤维细胞核移植入绵羊去核卵母细胞中构建重构胚。最终获得5个稳定表达TLR4的阳性细胞克隆,经SRY基因性别鉴定为雌性细胞株,通过实时荧光定量PCR分析,在第4代转染的细胞中TLR4表达量最高,比未转染细胞高出7.4816倍(P<0.01),卵裂的重构胚中有EGFP的表达。试验成功构建出含TLR4基因的重构胚,为今后生产出性别可控的抗病转基因绵羊地方新品种奠定基础。     

绵羊子宫内膜上皮细胞的纯化培养与鉴定

为了探索一种分离纯化绵羊子宫内膜上皮细胞的简便高效方法,本试验采用先组织块培养后消化纯化和直接消化后过筛纯化两种方法对绵羊子宫内膜上皮细胞进行培养、纯化,最后用免疫荧光方法对上述方法得到的细胞进行角蛋白检测从而鉴定上皮细胞纯度。结果表明先组织块培养后消化纯化法可以得到纯度95%,且形态均一、活性良好的绵羊子宫内膜上皮细胞;先消化后过筛纯化法得到的子宫内膜上皮细胞形态良好但是纯度仅为70%,与前一方法相比有待提高。因此,先组织块培养后消化纯化法是获得绵羊子宫内膜上皮细胞的一种简单易行且高效的方法,该方法得到的细胞可以在体外传至3-4代。     

利用CTC染色进行猪精子不同体外获能方法的比较

为了探讨不同方法对猪精子体外获能的影响,本试验以猪的新鲜精液为研究对象,分别经肝素上游法、钙离子载体诱导法和咖啡因诱导法进行精子不同获能时间的处理,并利用金霉素荧光染色法（chlortetracycline,CTC）对其获能效果进行检验。结果表明,采用肝素上游法孵育40 min处理后,精子的获能比例显著高于其他各处理组（P<0.05）,说明肝素上游法可以较好地诱发猪精子在体外获能。