辐射百合雄性不育突变体的RAPD分析

近年来,分子标记辅助育种取得了较大进展,各种标记方法的广泛使用极大地加快了新品种的选育速度。随机引物扩增DNA多态性分子标记(RAPD)因其灵敏度高、速度快,可对整个基因组进行标记且费用和技术难度较低,易于应用而倍受青睐[1],已在植物亲缘关系与品种鉴定[2～4]、遗传多样性检测[5,6]、遗传图谱的构建与基因定位[7]、辅助选择育种[8,9]、育种材料的早期的选择、突变体的鉴定等方面得到了较多的应用[10～13]。由于突变体是植物基因组(达2 0×109bp)少数位点发生突变的结果,1个随机引物仅能检测基因组的极少部分,因而突变体的检测相对困…     

辐射亚洲百合‘pollyanna’雄性不育突变体的RAPD分析

利用 8 0个 1 0bp随机引物对亚洲百合‘pollyanna’及辐射种球诱导出的 2 0个表现型雄性不育突变体进行了RAPD分析。其中有 31个引物对所有材料都能扩增出理想的带型 ,有 4个随机引物扩增出的带型显示其中的‘P1G0 3’、‘P2G0 4’等 9个突变体与‘pollyanna’基因组 (可育系 )之间具有稳定的多态性差异。它们表现出与‘pollyanna’差异的多态性位点有 7～ 1 8个 ,表明它们为‘pollyanna’的基因型突变体。     

不同植物组织RNA提取方法的比较分析

不同的植物组织都有较优化RNA提取方法。本文针对蜡质的红掌叶片、含糖较多的百合花瓣、含色素较多的万寿菊花瓣,使用改良CTAB法、Trizol法、快速RNA提取试剂盒法提取RNA,比较提取效果,以确定适合几种植物组织的最优RNA提取方法。结果表明:改良CTAB法提取的红掌叶片总RNA,Trizol法提取的百合花瓣总RNA和万寿菊总RNA,28SRNA和18SRNA条带都较清晰,且28SRNA亮度较18SRNA明亮,效果较好,部分RNA提取试验中5SRNA也较明亮,说明提取的总RNA有部分降解,但总RNA质量符合后续试验要求。RT-PCR检验符合上述结论。     

百合水通道蛋白LotNIP5-1基因的克隆及表达分析

为研究NIP5-1基因(Nodulin26-like intrinsic protein)在百合生长发育方面的作用机理,利用RACE技术克隆得到百合NIP5-1基因的全长cDNA序列。运用多个软件进行生物信息学分析;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及RT-PCR技术检测其表达特性。结果表明:1)百合NIP5-1基因全长为1 492bp,包含1个900bp的完整开放阅读框(Open reading frame,ORF),共编码299个氨基酸;2)百合NIP5-1蛋白属于跨膜通道蛋白MIP超家族。具有6个跨膜区;在B、E环分别具有NIP5-1蛋白特有的NPS、NPV模体,具有该蛋白Ar/R filter分子筛特有的AIGR模体;与小果野芭蕉、香瓜、葡萄、黄瓜、番茄的相似性分别为86%、83%、84%、83%和82%;3)荧光定量结果显示,百合NIP5-1基因在茎中表达量最高,在花瓣中表达量较低,在叶、鳞茎、根中表达量均极低。RTPCR半定量检测显示,其在"湿"柱头上表达量显著高于"干"柱头,这与转录组测序结果相符合。上述研究暗示,百合NIP5-1可能是硼酸通道蛋白,在促进茎生长及生殖活动中发挥作用。     

低温及赤霉素GA3处理对郁金香促成开花的作用

本文研究了采用９℃低温湿藏,５种不同冷藏时间处理后对郁金香促成开花的影响．发现处理之间差异极显著,从目前的实验看,以６周低温湿藏处理对郁金香花茎伸长效果最好．同时研究了“ＧＡ３处理＋９℃低温湿藏”对郁金香促成开花的影响．发现处理之间的差异极显著,从目前实验结果看,以“ＧＡ３浸泡＋６周低温湿藏”对郁金香花茎伸长效果最好．     

耐旱节水型宿根花卉在北京城市绿化中的应用

水资源短缺是制约北京可持续发展的重要因素之一。本文讨论了大面积绿化与水资源短缺之间矛盾。在多年引种、栽培及抗旱生理研究的基础上,提出耐旱、节水型宿根花卉在城市园林绿化中应用,可以缓解上述矛盾;并对可应用种类的繁殖、栽培等进行了初步研究。     

部分中国野生百合亲缘关系的RAPD分析

采用随机引物扩增多态性DNA(RAPD)技术分析了中国野生百合25份种质的亲缘关系。从160个10bp随机引物中筛选出15个重复性好的随机引物,通过扩增共得到156个DNA片段,其中多态性谱带为133条,占85.3%。根据多态性结果进行聚类分析,将25份种质分为4类3个亚类。除野百合(秦岭种源)外,RAPD聚类结果与传统形态分类基本吻合。轮叶百合聚为第I类,轮叶组与其它组明显分开;4种喇叭花组百合聚为第II类;另4种喇叭花组百合及未鉴定的河南1号聚为第III类;第IV类含有15份种质,大部分为卷瓣组野生百合,但第IV类第3亚类含有钟花组3种野百合,表明卷瓣组和钟花组之间存在着基因交流。     

百合花粉管粘附与定向生长相关基因SCA的克隆及基因多样性分析

以亚洲百合‘Tresor’、麝香百合‘White heaven’和东方百合‘Caruso’为试材,首次在百合基因组中扩增到SCA基因全长序列,在亚洲百合和东方百合中分别获得4个SCA基因拷贝,在麝香百合中获得3个SCA基因拷贝,各拷贝之间具有72.97%～99.68%相似性。从百合基因组中克隆到的SCA基因均含有两个外显子和一个内含子,推导编码113～115个氨基酸残基的前体蛋白(其中成熟蛋白均含91个氨基酸残基)。SCA蛋白具有典型的LTP蛋白N端信号肽,保守的8个半胱氨酸残基和2个五肽模序,并且氨基酸序列之间的相似性高于基因序列相似性,为87.91%～98.90%。亚洲百合、麝香百合、东方百合SCA氨基酸序列比对发现在某些氨基酸位点存在着明显种系间差异。在系统进化树中,三个杂种系的11个SCA基因的氨基酸序列与单子叶植物LTP亲缘关系较近,与双子叶植物较远,这与植物分类学中亲缘关系的远近相一致。     

授粉方法对克服百合‘cordelia’×毛百合远缘杂交障碍的影响

研究了辐照花粉辅助授粉、杂交液辅助授粉及切割花柱授粉等措施对克服百合‘cordelia’(♀)×毛百合远缘杂交障碍的影响。结果表明:采用普通柱头授粉能够获得许多膨大果实和饱满种子,表明该杂交组合为亲合性组合。用经1000Gy或2500Gy剂量60Co辐照的母本花粉进行辅助授粉明显地提高了座果率和饱满种子结籽数,表明两种剂量的辐照花粉辅助授粉均能有效地克服该组合的杂交障碍。结籽数的提高有利于后续的选育工作。采用杂交液辅助授粉,座果率和饱满种子结籽数有所提高。而切割花柱授粉明显地减少了座果率和结籽数,表明该方法不适合于克服‘cordelia’(♀)×毛百合杂交障碍。