百合未授粉成熟雌蕊转录组测序研究

本研究旨在大量发掘百合雌蕊特异表达基因,为研究百合杂交障碍的分子机制提供依据。利用Illumina高通量测序平台,进行百合未授粉成熟雌蕊转录组测序和数据组装,并对获得的Unigene进行功能注释、分类和代谢通路分析。“干柱头”雌蕊LoP1和“湿柱头”雌蕊LoP2分别获得40792条和39708条Unigene。2个样品的Unigene通过序列拼接,去冗余处理,以及同源转录本聚类,得到44175条All-Unigene。基于NR、NT、Swiss-Prot、GO、KEGG和COG等6个数据库进行相似性比对（E值≤10-5）,依次分别有30343、21647、21281、19274、12964和22227个基因被注释。KEGG分析中,19274条AllUnigene被注释到128个代谢通路上。基因分析显示,百合未授粉成熟雌蕊已为授粉受精做好了物质、能量、信号转导以及抗病原等准备工作。     

亚洲百合糖代谢相关基因的表达与代谢分析

以亚洲百合‘蜂鸣’为试材,采用转录组测序、荧光定量PCR技术以及测量种球的表型和生理指标的方法,研究了亚洲百合种球膨大过程中的生理变化及种球膨大前后共11个与种球膨大相关基因的表达量,以期了解亚洲百合糖代谢相关基因及糖代谢途径。结果表明：亚洲百合种球膨大过程中过氧化氢酶(CAT)活性和过氧化物酶(POD)活性显著提高,尤其在根系发育中起重要作用的POD,活性也明显高于CAT;参与蔗糖代谢的可溶性酸性转化酶(SAI)、己糖激酶(HK)、蔗糖磷酸合成酶(SPS)、蔗糖合成酶(SS),负责淀粉合成的结合态淀粉合成酶(GBSS)和可溶性淀粉合成酶(SSS)活性均有显著增长且变化幅度相似。同时发掘到了与百合种球膨大相关酶8个,分别为CAT、POD、GBSS、SSS、SAI、HK、SPS、SS;相关基因11个,分别为LaSPS、LaSS、LaGBSS、LaGBE1、LaUGP、LaAGPase、LaGSK-3β、LaCAT、LaPOD、LaSAI、LaHK基因;相关代谢物4个,α-D-甘露糖1-磷酸、2-异丙基苹果酸、熊果苷和L-丝氨酸。     

王百合雄性不育突变体无性系花蕾花药的生化分析

对王百合及其雄性不育突变体无性系“白天使”金王二号‘花蕾和花药的游离氨基酸、糖、蛋白质含量，POD及CAT酶活性，POD酶谱进行了比较研究。结果表明：从花粉母细胞初期、减数分裂中期I至四分体-单核期，两不育系花药中游离氨基波合量、脯氨跋含量、还原糖合量、蛋白质合量都比王百合低，花蕾POD酶活性比王百合高；花药中总糖含量及CAT活性与王百合相近。减数分裂中期1不育系花药POD酶谱比王百多2—3带，又有些带比王百合深．表明POD酶活性比王百合强。上述物质含量、酶活性及酶谱的变化可能与花粉的败育有关。     

辐照花粉辅助授粉对百合远缘杂交结实的影响及杂种早期分子鉴定

研究了辐照花粉辅助授粉对百合‘pollyanna’(♀)×毛百合杂交结实的影响。结果表明:采用普通柱头授粉能获得许多膨大果实和饱满种子,表明该组合为亲合性组合。用经1000和2500Gy的60Coγ射线辐照的母本花粉进行辅助授粉明显提高了果实中饱满种子的结籽率,表明2种剂量的辐照花粉辅助授粉均能有效克服该组合的杂交障碍。结籽数的提高能获得更多的后代,增加了从F1代中选育新优单株的几率。随机选取辐照花粉辅助授粉获得的杂交子代15株,采用ISSR技术对其组培苗进行亲子鉴定,6条ISSR随机引物在15个子代中共扩增出372个条带,其中具有父本特征带114条,具有母本特征带67条,具有双亲共有带65条。ISSR鉴定结果证实了杂种的真实性。     

光照对紫叶稠李花色素苷合成调控通路的影响

为探究光照强度对紫叶稠李花色素苷合成途径上关键基因及转录因子的影响,对紫叶稠李进行80％遮光处理,通过无参转录组测序,分析差异基因表达量、功能及富集通路情况.结果表明:差异基因主要富集在类黄酮生物合成途径.对花色素苷合成途径相关的差异基因进行荧光定量PCR验证,结果显示,相对全光照条件下,遮光处理下PAL、CHS、CH...