家蚕一种富含半胱氨酸蛋白基因BmCRP的原核表达与定位研究

从家蚕蛹cDNA文库中获得一条cDNA序列,经生物信息学分析显示该cDNA序列全长1 011 bp,包括5′-UTR 200 bp和3-′UTR 136 bp,编码224个氨基酸,其编码蛋白质的N-端富含半胱氨酸,将该基因命名为BmCRP(基因登录号:DN985186.1)。该基因编码蛋白主要有α螺旋、β-折叠、无规则卷曲3种二级结构,具有cAMP和cGMP依赖的蛋白激酶磷酸化位点等5种功能位点。构建重组表达载体pET-28 a(+)-BmCRP并转化至大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导后获得融合蛋白,用纯化后的目的蛋白免疫新西兰大白兔制备的多克隆抗体与BmCRP有较好的特异性。W estern b lotting检测结果:BmCRP蛋白在家蚕卵、幼虫、蛹、蛾4个发育时期均有表达,蛹期表达量最高;在5龄幼虫的表皮、头部、卵巢、睾丸、马氏管中均有表达。荧光定量RT-PCR检测结果:BmCRPmRNA在家蚕卵、幼虫、蛹、蛾的整个生命周期中,其转录水平呈增加趋势;在5龄幼虫不同组织中的转录水平从高到低依次为表皮、头部、生殖腺、中肠、马氏管、气管、丝腺和脂肪体。细胞定位实验结果显示BmCRP蛋白在Bm5细胞的细胞核和细胞质中均存在,细胞核中的荧光信号比细胞质中的信号强。研究结果有助于进一步探明家蚕BmCRP蛋白的结构和功能。     

百合片真空低温干燥和热风干燥的品质比较

以兰州优质百合为原料,从感官品质、硬度、营养成分3个方面比较了低温真空冻干法与鼓风烘干法研制的百合干特性。结果表明,采用该加工方法制得的原味即食百合酥片的色泽与口感综合分数为98分,优于市售烘干百合干片综合分数的36分,原味即食百合酥片的硬度为695.666 g,是烘干百合干片硬度3 838.522 g的1/6~1/5。百合酥片中的脂肪含量比烘干法研制的百合片脂肪含量降低了7.1%,能量降低了1.0%,碳水化合物含量提高了3.9%,VC含量提高了29.1%。此加工工艺保留了百合原有的营养成分与风味,使产品符合现代人们健康饮食的习惯。