单核细胞增生性李斯特氏菌tatD基因缺失对小鼠毒力和肠道菌群的影响

【目的】探究单核细胞增生性李斯特氏菌Listeria monocytogenes tatD基因缺失对小鼠Mus musculus毒力和肠道菌群的影响,为tatD在单核细胞增生性李斯特氏菌与宿主互作中的作用及减毒疫苗研究提供参考。【方法】采用Bliss法将亲本菌株(LM10403s)、缺失菌株(LM10403sΔtatD)和互补菌株(LM10403sCΔtatD)口服感染小鼠,确定菌株对小鼠的半数致死量(LD50)。LM10403sΔtatD以1.00×105 CFU口服免疫小鼠观察其免疫保护效果。将40只6周龄雌鼠随机平均分为对照即磷酸缓冲盐溶液组(PBS)、LM10403s组、LM10403sΔtatD组和LM10403sCΔtatD组,PBS组小鼠灌胃200μL无菌PBS,实验组分别灌胃200μL含1.00×106 CFU的菌液。灌胃24 h后剖杀各组小鼠,收集肠道内容物,采用Illumina Hiseq测序技术测定各处理小鼠盲肠样品微生物16S rRNA V3～V4区序列,并比较分析其微生物群落结构、多样性和信号通路富集。【结果】LM10403sΔtatD的LD50为8.11×1...     

猪源艰难梭菌的分离鉴定及特性分析

为了解河南省规模化猪场猪源艰难梭菌的流行、耐药以及毒素基因携带情况,收集来自豫西地区5个养殖场中疑似艰难梭菌感染(clostridium difficile infection,CDI)猪的粪便标本(n=41)。采用厌氧培养法,用艰难梭菌选择性培养基环丝氨酸-头孢西丁-果糖琼脂(cycloserine-cefoxitin-fructose agar,CCFA)完成分离培养。采用表型培养法进行菌株分离和鉴定,以多重PCR同时鉴定菌株并检测tcdA和tcdB毒素基因及二元毒素编码基因cdtA和cdtB。采用E-test法检测艰难梭菌对常用抗生素的最低抑菌浓度(minimal inhibitory concentration,MIC)值并判定菌株对药物的敏感性。结果从分离的41份样本中,经染色镜检及PCR鉴定,分离出符合艰难梭菌生长特性的菌株1株。药敏结果显示分离菌株对万古霉素和甲硝唑呈现高度敏感,对氟喹诺酮类药物以及四环素等表现出不同程度的耐药。艰难梭菌的研究大多集中在人源方面,本研究首次在河南省规模化养猪场中分离出艰难梭菌,对所分离菌株进行毒素基因检测,毒素A、B呈阳性,而无二元毒素基因。分离的猪源艰难梭菌对红霉素、万古霉素、甲硝唑、利福平均呈现高度敏感,对克林霉素、阿莫西林、左氧氟沙星、利奈唑酮和青霉素呈现不同程度的耐药。     

食源性病原菌激发固有免疫细胞胞外诱捕网的研究进展

固有免疫细胞在外源物质刺激后向细胞胞外环境释放由染色质DNA和多种胞内颗粒蛋白组成的纤维样网状物质，称为胞外诱捕网（extracellular traps，ETs）。ETs是一种新型的宿主防御机制，能够捕获或杀灭病原菌，有效控制病原菌的扩散，从而使机体免受感染。大肠杆菌、沙门菌等食源性人兽共患病病原体引发的疾病是全球广泛关注的公共卫生问题。本文就食源性病原菌激发固有免疫细胞ETs的形成、ETs的生物学活性以及细菌部分蛋白对ETs形成的影响等研究进展进行综述，以期为食源性疾病的防控提供相关理论参考。     

亚硫酸钠对小鼠睾丸组织氧化损伤作用研究

亚硫酸钠(Na_2SO_3)是食品行业中常用的添加剂,具有明显的漂白、防腐、疏松、抗氧化等作用。但长期低剂量食用亚硫酸钠对机体组织器官有明显的损伤作用。为了研究亚硫酸钠对雄性小鼠生殖能力的影响,笔者拟用不同浓度的亚硫酸钠攻毒雄性小鼠7d,而后检测睾丸内超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力。通过制作睾丸组织石蜡切片和超微切片,观察分析攻毒前后睾丸组织的细胞和亚细胞变化。结果发现,试验组SOD、GSH-PX活力都有不同程度的降低,MDA含量增高,与对照组比较差异显著或极显著。睾丸精小管内各级精细胞稀疏,排列紊乱,局部细胞有坏死脱落现象,坏死细胞核固缩、浓染或者崩解。精细胞内线粒体肿胀,线粒体膜不完整,溶酶体增多,内质网紊乱,细胞核内染色质缺损。部分精细胞坏死,核崩解或消失。以上结果说明,亚硫酸钠过度使用会降低睾丸组织内的抗氧化酶活力,提高代谢产物丙二醛的含量,对睾丸组织细胞和亚细胞结构造成损伤。攻毒组内睾丸抗氧化酶活力和病理学变化呈现出明显的量效关系。     

鼠伤寒沙门菌5'-nucleotidase基因缺失对小鼠盲肠菌群影响的研究

为探究5’-nucleotidase基因对鼠伤寒沙门菌感染小鼠盲肠菌群的影响，本研究将15只6周龄BALB/c雌鼠随机平均分为对照组、野生株SL1344组和缺失株SL1344Δ5’-nucleotidase组，对照组小鼠灌胃200μL无菌PBS,SL1344组和SL1344Δ5’-nucleotidase组分别灌胃200μL含1.0×10⁶ cfu的菌液。灌胃72 h后剖杀各组小鼠，收集盲肠内容物，采用Illumina Hiseq测序技术测定各组小鼠盲肠样品微生物16S r RNA V3-V4区序列，并比较分析其微生物群落结构、多样性和信号通路富集。结果显示，与对照组相比，SL1344和SL1344Δ5’-nucleotidase组操作分类单元(OTU)以及Alpha多样性指数Chao1和Observed species均下降，Beta多样性分析显示SL1344组部分样品分布偏远，表明SL1344和SL1344Δ5’-nucleotidase感染使小鼠盲肠微生物数目减少，且SL1344对盲肠菌群影响较大。门、纲和属水平微生物种群分析结果显示，与SL1344组相比，...