奶山羊乳房炎灭活疫苗的制备及免疫效果检测

为评估奶山羊乳房炎灭活疫苗的免疫效果,以大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌为材料,经甲醛37℃灭活,按照6∶1（V／V）与铝胶盐充分混匀,分别经腹股沟皮下、颈部皮下注射途径,免疫泌乳期奶山羊,免疫剂量均为2 mL,共免疫2次,每次间隔14 d。分别在免疫前及第1次免疫后10、24、60、180 d 采集血样和乳样,ELISA 测定抗体效价,用快速诊断液检测隐性乳房炎,统计患病奶山羊的数量。结果显示,与对照组相比,两次免疫后血液及乳汁中针对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性表皮葡萄球菌及产色葡萄球菌的抗体效价含量均显著增加（P ＜0．05）,抗体维持时间长;颈部皮下免疫组免疫后180 d,腹股沟皮下免疫组免疫后的60 d,隐性乳房炎奶山羊数量均明显下降。结果表明,本研究制备的奶山羊乳房炎疫苗不仅能够刺激机体产生较好的体液免疫应答,而且还对隐性乳房炎有显著的治疗效果。     

秃疮花针剂对小鼠淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ的影响

为了将秃疮药制剂应用于临床实践中,本试验研究运用ELISA技术,研究秃疮花针剂对小鼠淋巴细胞IL-4和IFN-γ的影响,试验结果表明,秃疮花针剂对小鼠淋巴细胞有明显的调节功能,能提高小鼠的细胞免疫和调节体液免疫水平。     

秃疮花针剂对小鼠淋巴细胞CD4和CD8的影响

为了将秃疮药制剂应用于临床实践中,本试验研究运用流式细胞术技术,研究秃疮花针剂对小鼠淋巴细胞CD4和CD8的影响,试验结果表明,秃疮花针剂对小鼠淋巴细胞有明显的调节功能,能提高小鼠的细胞免疫和调节体液免疫水平。     

奶山羊IL-22的原核表达

根据signal IP3.0信号肽分析软件分析结果,设计IL-22不含信号肽表达引物,PCR扩增获得奶山羊IL-22基因,连接表达载体pET-32a,重组质粒转化BL21感受态细胞。对阳性克隆进行诱导表达,对诱导温度、IPTG诱导浓度、诱导时间等条件进行优化,在最佳条件大量诱导蛋白表达。结果显示,在37℃、IPTG浓度为0.1mmol/L、诱导5 h可获得IL-22最大表达量,目的蛋白以包涵体形式存在,包涵体经洗涤、变性和复性,纯度可达90%以上。本研究为进一步探讨IL-22在奶山羊乳腺免疫中的作用奠定了基础。     

DO11.10小鼠卵清蛋白免疫耐受模型的建立

为建立D011.10小鼠的卵清蛋白(OVA)免疫耐受模型,试验组小鼠尾静脉注射5 μg/只OVA,对照组注射PBS,共3次,每次间隔5 d.最后一次注射后的第3天、第12天分别用OVA进行免疫,第18天颈椎脱臼处死小鼠.利用MTT法检测小鼠OVA、OVA323-339肽段特异性脾淋巴细胞增殖情况,利用流式细胞术检测CD...